黄芪甲苷对BALB/C小鼠肝癌H22腹水瘤抑制作用及机制

目的探讨黄芪甲苷对BALB/C小鼠肝癌H22腹水瘤的抑制作用及机制。方法 BALB/C小鼠100只,腹腔注射H22细胞建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型后,随机分为阴性对照组(0.9%NS)、阳性对照组(0.5 mg·kg-1顺铂)、黄芪甲苷低(0.3 mg·kg-1)、中(1.0 mg·kg-1)、高(3.0 mg·kg-1)剂量组,每组20只,每日1次,连续给药14 d,末次给药24 h后处死小鼠,计算腹水量、瘤细胞抑制率及腹膜瘤最大结节直径,ELISA检测VEGF的含量,免疫组化检测VEGF、MMP-2、MMP-9、AQP-1和CD31蛋白的表达。结果黄芪甲苷组腹水量、瘤细胞存活率以及最大结节直径均降低(P<0.05);VEGF含量明显减少,与阴性对照组比较有显著差异(P<0.001),VEGF、MMP-2、MMP-9、AQP-1和CD31蛋白的表达降低。结论黄芪甲苷通过影响血管生成、抑制转移相关基因和水通道蛋白的表达抑制H22腹水瘤肝癌。

西松烷型二萜对小鼠H22肝癌腹水瘤的抑制作用及其机制

目的研究西松烷型二萜对小鼠H22肝癌腹水瘤抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法建立昆明小鼠H22肝癌腹水瘤模型,随机分为生理盐水组（Ⅰ组）、西松烷型二萜低剂量组（Ⅱ组）、中剂量组（Ⅲ组）、高剂量组（Ⅳ组）与环磷酰胺组（Ⅴ组）。建模后24 h开始给药,Ⅱ~Ⅳ组以不同剂量的西松烷型二萜连续灌胃给药7 d,对照组给予同体积生理盐水,Ⅴ组连续腹腔注射环磷酰胺7 d,末次给药24 h后处死半数动物。计算平均腹水量、腹水抑制率、腹水中瘤细胞数、瘤细胞存活率、细胞因子白细胞介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）浓度。另一半小鼠继续观察生存状况,计算生存期及生存延长率。结果Ⅲ、Ⅳ组腹水量与Ⅰ组比较明显减少（F=28.37,q=2.91、4.76,P〈0.05）,腹水抑制率随药物剂量增加而升高。Ⅱ~Ⅳ组瘤细胞计数及瘤细胞存活率与Ⅰ组比较显著降低（F=7.21-19.13,q=2.92~4.76,P〈0.05）。Ⅱ~Ⅳ组小鼠平均生存期与Ⅰ组比较显著延长（F=35.77,q=2.91~4.75,P〈0.05）,延长率分别为20.21%、42.10%和51.02%。与Ⅴ组比较,Ⅱ、Ⅲ组小鼠在饮食、活动等方面状态较好。Ⅳ组用药期间食欲下降,活动少,停药后好转。Ⅱ~Ⅳ组IL-2和IFN-γ含量与Ⅰ组比较,差异均有显著性（F=21.17、35.47,q=2.93~4.77,P〈0.05）。结论西松烷型二萜对H22肝癌腹水瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与影响细胞免疫功能有关,其有可能开发成为一种新的海洋源性抗肿瘤药物。

含笑内酯对H22肝癌腹水瘤模型小鼠腹腔积液的治疗作用

目的探讨含笑内酯(MCL)对H22肝癌腹水瘤模型小鼠腹腔积液的治疗作用及机制。方法取H22肝癌腹水瘤细胞(0.2 m L,约2×10~7个)注射至40只BALB/C小鼠腹腔建立腹水瘤模型。接种24 h后小鼠随机分为MCL组[50 mg/(kg·d)MCL连续腹腔给药7 d]和模型组(等剂量生理盐水),每组20只。每日观察小鼠日常活动状态,记录小鼠体质量、腹围的变化。末次给药24 h后各组处死13只小鼠,采血后检测肿瘤标志物糖类抗原(CA)199、血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白、CA242、甲胎蛋白(AFP)水平;留取肝脏组织及腹水瘤细胞行HE染色,观察其病理状态;流式细胞术检测2组小鼠腹水瘤细胞凋亡情况。结果实验第4天开始,与模型组相比,MCL组体质量下降,腹围缩小(P<0.05)。与模型组比较,MCL组CEA、CA242、AFP水平出现下降,铁蛋白明显升高,肝组织及腹水瘤细胞水肿程度降低,腹水瘤细胞凋亡率升高(均P<0.05)。结论 MCL可抑制H22肝癌腹水瘤小鼠腹腔积液的生成,其机制可能是通过诱导肝癌细胞凋亡来实现的。

清肝化瘀颗粒对H22肝癌腹水瘤小鼠的治疗作用

目的:研究清肝化瘀颗粒对H22肝癌腹水瘤小鼠的治疗作用。方法:建立H22肝癌腹水瘤小鼠模型,将120只小鼠随机平均分为模型组、肝复乐组(1.35 g/kg)、氟尿嘧啶组(50 mg/kg,i.p)、清肝化瘀颗粒低剂量组(0.67 g/kg)、清肝化瘀中剂量组(1.34 g/kg)、清肝化瘀高剂量组(2.68 g/kg),连续给药10 d,每3日监测体重及腹围,第11天每组随机选择8只小鼠取材,检测腹水量、腹膜渗透性及腹膜组织病理染色等,剩余小鼠观察生存期。使用Westernblot法检测腹膜组织血管内皮生长因子A(VEGFA)及血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达量。结果:与模型组相比,氟尿嘧啶组、中剂量组、高剂量组小鼠体重增长较慢(P<0.05);与模型组相比,各用药组小鼠腹围增长较慢,第6天,氟尿嘧啶组、中剂量组腹围显著小于模型组(P<0.05);第12天高剂量组腹围显著小于模型组(P<0.05)。此外,与模型组相比,中、高剂量组小鼠腹水量明显减少(P<0.05);中、高剂量组、氟尿嘧啶组小鼠腹水上清吸光度明显降低(P<0.05);中剂量组和氟尿嘧啶组生存期明显延长(P<0.05)。低剂量组、肝复乐组上述指标的差异无统计学意义。腹膜病理染色显示,氟尿嘧啶组、中、高剂量组小鼠腹膜结构较完整、水肿较轻、血管新生较少,优于肝复乐组和低剂量组。与模型组相比,清肝化瘀中剂量组VEGFA及VEGFR2表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清肝化瘀颗粒可抑制H22肝癌腹水瘤小鼠腹水产生、延长小鼠生存期,并降低腹膜渗透性、抑制腹膜新生血管的增加,其机制可能与抑制VEGF/VEGFR通路相关。

雷公藤对荷肝癌(H_(22))小鼠的抑瘤作用的实验研究

目的:探讨中药雷公藤治疗实验性肝癌的疗效。方法:建立荷实体型肝癌(H22)小鼠模型,观察经雷公藤治疗对其肿瘤生长的影响。结果:雷公藤能显著抑制肿瘤的生长,其抑瘤率达35.46%。结论:雷公藤有明显的抗肿瘤作用。

人参皂甙Rh_2注射液对荷肝癌(H_(22))小鼠免疫功能的影响

本研究以荷肝癌 (H2 2 )小鼠为实验模型 ,观察人参皂甙Rh2 注射液对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素、NK细胞毒活性和IL - 2免疫指标的影响。结果表明 :人参皂甙Rh2 注射液能提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、增加血清溶血素抗体生成能力、促进小鼠脾NK细胞杀伤活性和IL - 2活性。人参皂甙Rh2注射液明显提高荷瘤小鼠免疫功能。

纳米银对小鼠H22肝癌腹水瘤抑制作用的实验研究

目的:研究纳米银腹腔注射对小鼠H22肝癌腹水瘤的疗效及安全性。方法:昆明小鼠40只经腹腔注射H22细胞建立肝癌腹水瘤模型,24 h后随机分为模型组(生理盐水),顺铂组及纳米银低、中、高剂量组,连续12天腹腔注射给药,记录小鼠一般状况、体重及腹围,并观察腹水生成及生存情况。另选择健康昆明小鼠20只随机分为对照组及纳米银高剂量组进行药物安全性实验,连续12天腹腔注射相应药物,记录小鼠体重及生存情况,全自动血细胞分析仪、全自动生化分析仪检测小鼠血常规及生化指标。结果:与模型组相比,纳米银组小鼠体重及腹围增加缓慢,生存期延长,纳米银高剂量组小鼠体重和腹围变化及生存期与顺铂组相比差异无统计学意义。安全性实验结果显示,与对照组相比,纳米银高剂量组小鼠体重、生存期、血常规和肝肾功能各项生化指标的差异均无统计学意义。结论:纳米银可抑制肝癌腹水生成并延长腹水瘤小鼠生存期,且无明显毒副作用,或可作为癌性腹水治疗的一种新方法。

化徵丸抗小鼠H22肝癌的效应及对淋巴细胞转化率的影响

目的:研究化丸对H2 2肝癌小鼠的抑瘤作用及免疫功能的影响,探讨中药化丸抑瘤作用的机制。方法:以接种H2 2细胞的昆明种小鼠为模型,随机分组,观察各组小鼠实体瘤病理组织变化,淋巴细胞转化率、存活时间、并测量瘤量、脾重、胸腺重,肿瘤最大直径和横径,计算抑瘤率。结果:化丸各组小鼠瘤重、脾重与盐水对照组相比差异均有显著性意义(P <0 . 0 1) ,随着化丸剂量的增加,小鼠瘤重逐渐降低,脾重随之增加。加高浓度剂量组抑瘤率可达74 .3 7%。化丸对H2 2小鼠淋巴细胞转化率与环磷酰胺组、盐水对照组相比均为P <0 . 0 1,差异有显著性意义。结论:化丸对H2 2肝癌小鼠的实体瘤具有较强抑瘤作用,并能显著提高机体免疫力,延长存活时间。

马钱子 天南星对小鼠移植性肿瘤H_(22)的抑瘤作用

目的观察马钱子、天南星水提取液对小鼠移植性肿瘤H22的抑瘤作用,探讨这两种中药在肿瘤临床应用的合理性。方法昆明种小鼠,接种H22后随机分为对照组、环磷酰胺组及给药高、低剂量组,观察药物对肿瘤的抑制作用及对动物体重、免疫器官重量的影响。结果与对照组相比较,环磷酰胺的抑瘤率达到56.6%(P<0.01),同时小鼠增重减慢,胸腺、脾也受到显著抑制;高剂量给药组的抑瘤率为38.9%(P<0.05),低剂量组作用不明显。但两剂量组小鼠体重及免疫器官重量均未见明显改变。结论马钱子、天南星水提取液在一定剂量下对小鼠移植性肿瘤H22的生长有明显的抑制作用,且对小鼠的免疫器官无明显损害,其在肿瘤临床中的应用具有一定的合理性。

十枣汤对荷瘤小鼠p53突变及内皮素表达的影响

目的观察十枣汤对荷H22腹水瘤种小鼠的抗肿瘤作用。方法小鼠随机分为空白对照组、荷瘤模型组、环磷酰胺(CTX)阳性对照组和十枣汤高、中剂量组。除空白对照组外,其余4组小鼠均以皮下注射瘤细胞悬液0.2 mL造模。于造模第2天,分别灌胃相应药物或生理盐水,或注射CTX。采用免疫组化方法检测瘤体内突变的p53蛋白;放射免疫法测定小鼠血浆内皮素(ET)水平。结果各用药组突变型p53表达水平明显低于荷瘤模型组(P<0.01),而3组间比较差异无显著性意义(P>0.05);模型组小鼠血浆ET水平明显高于空白对照组(P<0.01),各用药组ET水平均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01)。结论十枣汤可以降低突变型p53蛋白表达,降低血浆ET水平并减少肿瘤的血供,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

针灸对荷瘤小鼠瘤细胞和红细胞膜脂流动性的影响

目的:探讨针灸抗肿瘤的机理。方法:针刺、艾灸荷瘤小鼠的“气海”“足三里”穴,检测处理后各组瘤细胞和红细胞膜脂流动性。结果:处理后各治疗组腹水瘤细胞膜脂流动性明显低于模型组（P<0.01）;各治疗组红细胞膜脂流动性明显高于模型组（P<0.01）。结论:针灸治疗使肿瘤细胞生物学活性降低,使机体生物学活性升高,从而在一定程度上揭示了针灸抗肿瘤的生物学机制。

化癥口服液对荷瘤小鼠p53突变及内皮素表达的影响

目的:探讨化癥口服液对荷H22小鼠的抗肿瘤作用和可能的机制。方法:75只健康小鼠随机分为5组,即空白对照组、荷瘤模型组、化癥口服液高、中剂量组(简称高、中剂量组)和阳性对照组。除空白对照组外,其余4组小鼠均以皮下注射瘤细胞悬液,0·2ml/只造模。于造模第2天,空白对照组和荷瘤模型组小鼠以生理盐水(NS)灌胃。高、中剂量组小鼠分别予100%、50%浓度的化癥口服液10ml/kg灌胃,2次/d,共10天。阳性对照组小鼠以CTX10ml/kg腹腔内注射,隔日1次,共5次。免疫组化方法检测瘤体内突变的p53蛋白;放射免疫法测定小鼠血浆内皮素(ET)水平。结果:荷瘤模型组小鼠的突变型p53表达水平明显高于其他3组(P<0·05),3个治疗组小鼠突变型p53表达都有不同程度的下降,3组间比较差异无显著性意义(P>0·05);模型组小鼠血浆ET水平明显高于空白对照组(P<0·001),其余各组的比较,ET水平均有不同程度下降,尤以高剂量组接近空白对照组水平,且与中剂量组和阳性对照组相比,差异有显著性意义(P<0·05)。结论:化癥口服液可以降低突变型p53蛋白表达,降低血浆ET水平并减少肿瘤的血供,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

TNP-470对小鼠肝癌H22腹水瘤的治疗研究

目的探讨TNP-470治疗小鼠肝癌H22腹水瘤的疗效及机制。方法体外采用细胞增生法和迁移法探讨TNF-470的治疗机制;体内建立H22腹水瘤小鼠模型评价TNP-470的疗效。结果TNP-470对瘤细胞H22的增生、血管内皮细胞HMEC的增生和迁移都有抑制作用;能明显提高小鼠生活质量、降低腹水的产生和瘤细胞的存活率及小鼠失明率,延长生存期。结论TNP-470对荷H22腹水瘤小鼠有明显疗效。

青藤碱对α7nAChR参与的巨噬细胞M2极化和小鼠肝癌TAM极化的干预作用

目的 观察青藤碱对巨噬细胞M2极化及小鼠肝癌腹水瘤模型腹腔肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)的影响。方法 细胞实验以白细胞介素(IL)-4(10 ng·mL^(-1))单独或与IL-6联合(即IL-4+IL-6,浓度均为10 ng·mL^(-1))刺激小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7诱导M2极化,青藤碱(400μmol·L^(-1))干预后,ELISA法检测IL-10分泌量;荧光定量PCR法检测精氨酸酶1(Arg-1)、Fizz1和Ym1的mRNA表达水平;免疫印迹法检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)表达。动物实验分为正常组、模型组、青藤碱(40 mg·kg^(-1))组,采用小鼠肝癌细胞H22腹腔注射诱导小鼠腹水瘤模型,灌胃给药4 d,分离各组小鼠腹腔巨噬细胞,流式检测CD86、CD206和α7nAChR表达。结果 IL-4或IL-4+IL-6联合诱导后,M2极化指标Arg-1、Fizz1和Ym1的mRNA相对表达量及IL-10分泌量升高(P<0.05);IL-4+IL-6组明显高于IL-4单独组(P<0.05),且α7nAChR表达升高(P<0.05);青藤碱可下调M2表型,也可下调α7nAChR表达(均P<0.05)。肝癌腹水瘤小鼠腹腔肿瘤相关巨噬细胞与正常小鼠腹腔巨噬细胞比较,其CD86表达下降(P<0.05),CD206、α7nAChR表达上调(P<0.05);青藤碱干预后,CD86表达上调(P<0.05),CD206、α7nAChR表达下降(P<0.05)。结论 α7nAChR表达与M2极化和肿瘤相关巨噬细胞极化正相关,青藤碱能下调α7nAChR表达,抑制M2极化、促进肝癌腹水瘤中肿瘤相关巨噬细胞向M1极化。