单链莫奈林基因表达载体的构建及其分泌表达

根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single ChainMonellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因.基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因与设计的一致.该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于AOXI启动子的控制下,并通过电转化技术将重组质粒pPIC9K/SCM导入Pichiapastoris,在含有G418的YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子.转化子在BMMY培养基中经甲醇诱导表达,用SDS PAGE检测发酵液,表明SCM的分泌表达蛋白可达发酵液蛋白含量的90%.

植物甜蛋白的研究进展

20世纪60年代人们陆续从热带植物中发现了六种天然甜蛋白(嗦吗甜,莫奈林,马槟榔蛋白,培它丁,仙茅蛋白,奇果蛋白),介绍了几种甜蛋白的开发研究进展。

甜蛋白的研究进展

自 2 0世纪 6 0年代 ,人们陆续从热带植物中发现了 6种甜蛋白 (嗦吗甜、莫奈林、马槟榔、Brazzein、Pentadin、Curculin)和一种变味蛋白 (Miraculin) ,它们具有的高甜度或变味特性引起了人们的极大兴趣。本论文对这类蛋白的性质、氨基酸序列、结构作一介绍 。

开发天然甜味剂商机巨大

近些年来，许多国家，特别是发达国家，都相继出台了相应的管理措施，限制糖精的使用量，直至禁止使用糖精。我国自20世纪90年代末期以来也采取限制糖精生产及使用的相关配套政策及措施，如强行关闭一些糖精生产企业，限制产量及销量，禁止在婴幼儿食品中添加糖精等。因此，寻找和开发生产天然甜味剂，取代化学合成类甜味剂，是最近几年来国内外甜味剂行业共同关注的热点问题，具有巨大商机。