BRAF调节RAF/MEK/ERK信号通路在莫替沙尼治疗甲状腺癌中的作用

目的探讨BRAF调节迅速加速纤维肉瘤蛋白(RAF)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在莫替沙尼治疗甲状腺癌中的作用。方法采用随机数字表法将90只BALB/C裸鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组30只。选用由小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3HOOK3-RET所构建的稳定的甲状腺癌细胞株,构建BALB/C裸鼠皮下移植甲状腺癌模型。治疗组和模型组BALB/C裸鼠在成功构建皮下移植甲状腺癌模型后分别给予莫替沙尼50mg/kg和0.9%氯化钠溶液50mg/kg腹腔注射治疗1个月,对照组BALB/C裸鼠未构建皮下移植甲状腺癌模型,给予0.9%氯化钠溶液50mg/kg腹腔注射治疗1个月。按照caspase3活性检测试剂盒说明书检测治疗组、模型组BALB/C裸鼠甲状腺癌组织和对照组BALB/C裸鼠甲状腺组织中caspase3活性,采用蛋白质印迹法(Westernblot)和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分别检测上述各组织中BRAF、RAF、MEK、ERK、核因子-κB(NF-κB)蛋白和mRNA的相对表达量,采用免疫组化法检测BRAF、RAF、MEK、ERK蛋白的平均光密度。结果治疗组BALB/C裸鼠的甲状腺癌组织中caspase3活性高于模型组BALB/C裸鼠的甲状腺癌组织和对照组BALB/C裸鼠的甲状腺组织(P<0.05);治疗组和模型组BALB/C裸鼠的甲状腺癌组织中NF-κB蛋白、NF-κBmRNA的相对表达量均低于对照组BALB/C裸鼠的甲状腺组织(P﹤0.05),BRAF、RAF、MEK、ERK蛋白和mRNA的相对表达量,及BRAF、RAF、MEK、ERK蛋白的平均光密度均高于对照组BALB/C裸鼠的甲状腺组织(P﹤0.05);治疗组BALB/C裸鼠的甲状腺癌组织中NF-κB蛋白和mRNA的相对表达量均高于模型组,BRAF、RAF、MEK、ERK蛋白和mRNA的相对表达量,及BRAF、RAF、MEK、ERK蛋白的平均光密度均低于模型组(P﹤0.05)。结论莫替沙尼对甲状腺癌具有一定的治疗作用,并可以通过调节BRAF所诱导的RAF/MEK/ERK信号通路促进甲状腺癌细胞死亡。