莫那可林J的电喷雾质谱裂解规律研究(MS^1～MS^6)

采用电喷雾离子阱质谱技术,在正离子检测模式下对化合物莫那可林J的质谱裂解规律(MS1~MS6)进行研究。试验发现:该化合物由于其结构的特征,主要通过失去H2O、CH3COOH或多烯烃离子CnH2n(n=1~5)形成各碎片峰;其中通过氢迁移和逆DA反应使B、C环裂解形成众多小分子碎片(相对分子质量小于200),体现了烯烃和环烯烃的质谱裂解特征。这些规律为莫那可林J及其他他汀类化合物的构效关系研究提供了参考数据。

RNAi沉默lovF基因实现土曲霉一步法发酵生产辛伐他汀

辛伐他汀是重要的降胆固醇处方药物。莫那可林J是辛伐他汀合成过程的关键中间体,也是洛伐他汀生物合成的中间产物。为获得莫那可林J并通过一步法发酵生成辛伐他汀,构建了洛伐他汀生物合成关键基因lov F基因的RNAi载体p MHJ137,通过农杆菌介导的方法转化土曲霉F001,筛选整合到染色体的阳性菌,并在阳性菌株MJ1-24的发酵过程中加入了DMB-S-MMP验证其直接合成辛伐他汀的效率。结果显示MJ1-24不再产生洛伐他汀,产物中仅有莫那可林J累积。如果在发酵过程中加入前体物质,可得到产物辛伐他汀。综上,RNAi技术能够有效实现土曲霉基因沉默。此项技术推进了一步法发酵生产辛伐他汀的工艺开发。