药桑叶具α-葡萄糖苷酶抑制作用的活性部位筛选及酶动力学研究

本研究以新疆药桑叶为试验材料,采用不同极性试剂提取得到活性部位,以阿卡波糖为阳性对照,对硝基苯-α-D-葡萄糖苷(pNPG)为底物,筛选出对α-葡萄糖苷酶有较强抑制活性的部位,然后采用莱恩威弗-伯克模型进行酶促动力学研究。结果表明:从药桑叶中获取的药桑叶粗浸膏、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位及经萃取后的剩余水相部位对α-葡萄糖苷酶均具有抑制作用,其中剩余水相部位抑制作用最强,半抑制浓度(IC_(50))为0.39 mg/mL;酶促动力学试验中剩余水相部位与α-葡萄糖苷酶-底物复合物的解离常数K_(II)为0.29 mg/mL,与α-葡萄糖苷酶的解离常数K_(SI)为0.04 mg/mL,K_(II)>K_(SI),可判断出剩余水相部位的抑制类型为线性混合型可逆抑制,其竞争作用大于非竞争作用。