莲子多糖对衰老模型小鼠抗氧化作用的研究

目的 观察莲子多糖对D 半乳糖所致衰老小鼠抗氧化作用的影响。方法 用D 半乳糖所致衰老小鼠进行实验。结果 莲子多糖可显著提高衰老小鼠血SOD,CAT、GSH PX活力,显著降低血浆、脑及肝匀浆LPO水平。结论 莲子多糖有较好的抗衰老作用。

莲子多糖增强环磷酰胺致免疫抑制小鼠机体免疫功能

背景:多糖类成分在中药中普遍存在,具有广泛的生物活性,能激活T、B和NK细胞,调节细胞因子和补体等,可能是中药发挥调节机体免疫功能的重要物质基础之一。目的:探讨莲子多糖对免疫抑制小鼠机体免疫功能影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,分子水平检测,于2001-02/07在河南中医学院药理实验室完成。材料:清洁级昆明种4周龄小鼠30只,由河南省医学实验动物中心提供;莲子多糖为睡莲科植物莲的干燥成熟种子的提取物,由河南中医学院化学室提供;香菇多糖片为浙江普洛康裕天然药物有限公司产品。方法:取6只小鼠作为正常对照组,剩余24只小鼠建立免疫抑制模型,分别于第1,2,3天腹腔注射环磷酰胺75mg/kg,造模后随机分为4组,大、小剂量莲子多糖组分别灌服400,200mg/kg莲子多糖水溶液,香菇多糖组灌服100mg/kg香菇多糖混悬液,模型组灌服等体积生理盐水。每天给药1次,连续给药7d。主要观察指标:腹腔巨噬细胞分泌白细胞介素1α的活性,脾细胞分泌白细胞介素2的活性,脾细胞体外增殖情况,血清可溶性白细胞介素2受体含量变化。结果:小鼠30只均进入结果分析。与模型组比较,香菇多糖组能显著提高腹腔巨噬细胞上清液按1∶2,1∶4稀释时所分泌的白细胞介素1α活性(F=2.886,3.012,P<0.05),大剂量莲子多糖组可明显提高腹腔巨噬细胞上清液按1∶2稀释时所分泌的白细胞介素1α活性(F=2.275,P<0.05);小剂量莲子多糖组可明显提高脾细胞上清液按1∶2,1∶4稀释时所分泌的白细胞介素2活性(F=2.405,2.574,P<0.05);香菇多糖组与大、小剂量莲子多糖组均能明显促进经刀豆素A或脂多糖刺激的脾细胞数量(F=2.489～6.207,P<0.05或0.01);香菇多糖组与小剂量莲子多糖组血清可溶性白细胞介素2受体水平均明显降低(F=5.298,P<0.01;F=2.435,P<0.05)。结论:莲子多糖可提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞分泌的白细胞介素1α、白细胞介素2活性,促进经刀豆素A或脂多糖刺激的脾细胞增殖,并降低血清可溶性白细胞介素2受体水平,具有较好的增强免疫效果。

莲子多糖微波辅助提取与纯化技术研究

采用微波辅助法提取莲子多糖,DEAE-52纤维素柱层析分离。通过设计正交试验,得出优化的工艺条件:以水为提取剂,料液比1∶15(w/v),提取时间20min,微波作用功率240W,微波提取多糖的得率为17.32%,DEAE-52纤维素层析柱采用水洗脱多糖的脱除效果较好。微波辅助提取不仅缩短了提取时间,降低了提取剂用量,而且提高了莲子多糖得率。

莲子多糖分离纯化的研究

为了研究莲子多糖的分离纯化工艺,文章采用蛋白酶和sevag试剂相结合的方法脱蛋白,采用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-20葡聚糖凝胶柱对莲子多糖进行分离纯化,紫外-可见光谱扫描法进行纯度鉴定。结果表明,莲子多糖的脱蛋白最佳工艺为:酶解温度为50℃、酶解时间为50 min和木瓜蛋白酶添加量为120 U/m L,在此条件下,蛋白质的脱除率和多糖的损失率分别为74.25%和5.88%。经过sevag试剂处理2次后,此时蛋白质脱除率为85.5%,多糖损失率为7.5%。莲子多糖为单一组分,该多糖组分在260nm和280nm附近无蛋白质和氨基酸的特征吸收峰,说明该组分为纯度较高的多糖。

最小偏二乘方法和近红外技术快速测定莲子多糖及抗氧化活性

目的对5个主要产区的莲子多糖含量和抗氧化活性进行测定,分析比较各省份莲子质量差异,并进一步采用近红外分析技术构建莲子多糖的快速预测模型。方法采用苯酚-硫酸法测定莲子多糖的含量;利用对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(1,1-diphenyl-2-picozide radical,DPPH)清除率测定莲子的抗氧化活性;并利用偏最小二乘方法构建莲子多糖的快速预测模型。结果实现了5个产地的莲子多糖含量及其抗氧化活性的精确测定;构建的快速预测模型对多糖含量及抗氧化活性预测准确率较好,模型的训练集均方根差(root-mean-square error,RMSEC)为0.0185,测试集均方根差(root-mean-square error of prediction,RMSECP)为0.0236;训练集和测试集相关系数的平方分别达到了0.9592和0.8516。结论本文所构建的快速预测模型能够对不同产地的莲子的多糖含量和抗氧化活性进行快速预测,为评价莲子多糖含量和抗氧化活性提供了科学参考。

超声波辅助提取莲子多糖条件的优化研究

本文对超声波辅助提取莲子多糖的条件进行单因素试验筛选和正交试验优化研究。结果表明，影响莲子多糖提取率的因素主次关系为：提取温度〉料液比〉提取时间；最佳工艺条件为：超声波时间80℃，料液比1：20，处理时间30min。在此工艺条件下，莲子多糖的提取率为1．686％。

莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的研究

为考察莲子红衣多糖对体外胰脂肪酶活性的抑制效果,采用分光光度法测定了不同条件下对胰脂肪酶活性抑制作用的影响,并在单因素试验基础上运用L_9(3~4)正交法优化得到莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的最佳条件。结果显示,在pH 7.2、莲子红衣多糖提取物浓度0.15 g/mL、反应时间10 min条件下,可达到最高抑制率94.61%。此外,Dixon和Lineweaver-Burk分析表明,莲子红衣多糖对胰脂肪酶的抑制作用类型为非竞争性抑制,抑制常数为0.073 6 g/mL。

空心莲子草多糖不同提取工艺的优化与比较

优化并比较药食两用植物空心莲子草多糖(Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb polysaccharides,APPs)的超声波辅助法(utrasonic-assisted extraction,UAE)、酶法(enzymatic extraction,EE)、超声-酶协同法(ultrasonic-assisted enzymatic extraction,UAE-EE)提取工艺。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计和响应面法优化3种提取工艺参数,并比较多糖提取率。结果表明:优化后的最佳提取条件依次为:超声波辅助法,液料比19∶1(mL/g)、超声时间39 min、超声功率165 W;酶法,液料比24∶1(mL/g)、纤维素酶量433 U/g、酶解温度54℃;超声-酶协同法,液料比24∶1(mL/g)、酶量471 U/g、超声时间为26 min。在3种工艺的最优条件下,多糖提取率分别为(5.19±0.16)%、(5.44±0.13)%、(5.82±0.21)%,与各自模型预测值5.29%、5.52%、5.64%接近,且按多糖提取率大小排列依次为超声-酶协同法>酶法>超声波辅助法。因此,采用超声-酶协同法制备空心莲子草多糖有利于提高产量,且安全、环保,便于进一步研究其生物学活性。