菊花多糖和绿原酸免疫调节作用的研究

目的探讨菊花中的多糖成分和绿原酸对肠道免疫功能的调节作用。方法提取金菊花中多糖成分;分离大鼠肠道淋巴细胞,分别与菊花中多糖、绿原酸共培养,ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和γ-干扰素(IFN)水平;比较菊花中多糖、绿原酸对肠道淋巴细胞免疫功能的调节作用。结果菊花多糖和绿原酸均可促进淋巴细胞上清液中TNF-α和γ-IFN水平升高;菊花多糖对肠道上皮内淋巴细胞影响较小;绿原酸对肠道上皮内淋巴细胞功能影响显著。结论金菊花中菊花多糖和绿原酸可调节肠道淋巴细胞分泌TNF-α和γ-IFN,具有免疫调节功能。

醇析水提法提取菊花中菊花多糖

目的探讨水提醇沉法从菊花中提取菊花多糖的最佳工艺。方法用正交设计法研究影响菊花多糖提取的因素,用硫酸-苯酚法测定菊花多糖的相对百分含量。结果菊花多糖的最佳提取工艺为水浸提2 h,浸提温度100oC,氯仿萃取1次,沉析用乙醇浓度为80%。结论该工艺适合菊花多糖的提取,为深入研究菊花多糖提供了基础。

菊花多糖提取工艺研究

[目的]研究菊花多糖的最佳提取工艺。[方法]采用单因素试验和正交试验,考察微波功率、提取时间、固液比对菊花多糖提取率的影响,确定微波提取的最佳工艺条件,并与常规提取法进行比较。[结果]最佳提取条件为微波功率800 W,固液比1∶15,提取时间15 min;在该条件下,多糖的提取率为5.59%。常规提取法的多糖提取率为2.73%。[结论]与传统提取方法相比,微波提取具有操作简单、省时、节能和高效的优点,适合工业化提取菊花多糖。

菊花多糖提取工艺研究

[目的]确定菊花多糖的提取、醇沉以及纯化的最佳条件。[方法]以多糖得率为指标,采用正交试验对菊花多糖的提取、醇沉及纯化工艺进行优选。[结果]菊花多糖水提工艺因素影响顺序:提取次数>固液比>提取温度>提取时间;提取工艺为:固液比20∶1(V∶M,g/ml),提取时间4h,提取温度95℃,提取3次。醇沉工艺因素影响顺序:醇沉时间>乙醇体积分数>药液浓缩程度;醇沉工艺为:乙醇体积分数80%,药液的浓缩程度1∶3,醇沉时间9h。纯化工艺因素影响顺序:氯仿∶正丁醇>纯化时间>样品∶氯仿-正丁醇;纯化工艺为:氯仿与正丁醇的配比5∶1,样品和氯仿-正丁醇的体积比2∶1,纯化时间10min。[结论]该工艺适合菊花多糖的提取。

复合酶法超声辅助提取高寒香菊花多糖

通过对复合酶超声辅助提取高寒香菊花多糖的工艺研究,以提取得率和纯度为指标,确定了适宜工艺条件。以未经酶解和未采用超声处理的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶及超声处理对高寒香菊花多糖结构的影响。结果表明:在复合酶2.5%(纤维素酶2.0%,酸性蛋白酶0.5%),酶解温度55℃,pH值4.5的条件下酶解2.0 h,多糖提取得率和纯度分别达到9.83%和28.58%,经聚酰胺柱纯化后纯度为64.57%。近红外光谱分析表明加酶和超声对多糖的结构没有显著影响,但提高了多糖提取得率。

野菊花多糖对雏鸡T淋巴细胞亚群的影响

本试验采用流式细胞技术,检测了雏鸡服用不同剂量野菊花多糖后,外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞数量的动态变化。结果发现:1、5、10和20 mg/mL野菊花多糖水溶液0.5 mL均能够提高雏鸡外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量,降低由于接种疫苗引起的雏鸡外周血中CD4+/CD8+比值的增高,野菊花多糖的最佳使用浓度为10 mg/mL。本研究表明:野菊花多糖可通过上调雏鸡血液中CD4+和CD8+T淋巴细胞水平,增强机体对抗原的免疫应答反应,从而增加机体抵抗力。

野菊花多糖对雏鸡新城疫疫苗免疫效果影响的研究

试验旨在研究野菊花多糖对雏鸡血清新城疫抗体水平的影响。将500只7日龄雏鸡滴鼻接种新城疫活疫苗．随机分为5个试验组．每组10个重复，每个重复10只鸡。1～4组（CP-1、cP-5、cP-10、CP-20）雏鸡分别颈部皮下注射1、5、10mg/mL和20mg／mL野菊花多糖0．5mL，每日1次，连续3d。5组为空白组，用生理盐水进行注射。28日龄．各组雏鸡二次接种新城疫油疫苗．同时按照7日龄时的处理方式给雏鸡注射野菊花多糖和生理盐水。在第1次接种后的0、7、14、21、28、35、42、49、56d和63d，每组随机选择20只鸡（每重复2只）进行心脏采血并制备血清，用以分析血清新城疫抗体滴度。结果表明，与对照组相比，第一次接种疫苗14d后，CP-5、CP-10组和CP-20组雏鸡新城疫抗体滴度均显著提高（P≤0．05），CP-1组雏鸡新城疫抗体滴度在接种后21d显著提高（P≤0．05）。另外，试验发现随着野菊花多糖剂量的增加，各试验组雏鸡新城疫抗体水平均显著提高（P≤O．05），当注射浓度超过10mg／mL时，这种促进作用不再随浓度的增加而显著提高（P〉0．05）。由此可见，野菊花多糖能够促使雏鸡较早产生特异性抗体并使之维持更长时间，提高疫苗的免疫效果，最佳使用浓度为10mg／mL。

菊花多糖饮料的研制

以野菊花为主要原料,经水浴浸提得到多糖溶液研制菊花多糖饮料。以稀释倍数、蔗糖添加量、柠檬酸添加量为因素采用正交试验,并对饮料色泽、气味、滋味进行品评。研究得知,该饮料的最佳工艺为:稀释倍数为10倍,蔗糖添加量为10%,柠檬酸添加量为0.15%,得到的菊花多糖浓度为56.495g/ml。在此条件下得到的菊花多糖饮料为淡黄色,略带花香,甘甜适中。

硫酸苯酚法测定金菊花中多糖的含量

目的从金菊花中提取多糖成分,并用硫酸苯酚法测定多糖含量。方法用水提醇沉法提取多糖,用硫酸苯酚法测定多糖含量。结果提取的多糖为类白色疏松粉状固体,平均相对百分含量为86.59%,RSD为4.23%。结论水提醇沉法提取的多糖成分含量较高,硫酸苯酚法可用于金菊花中多糖成分的含量测定。

野菊花多糖对小鼠免疫功能低下的保护作用

目的:研究野菊花多糖对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的保护作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、模型组及野菊花多糖高、低剂量组,每组10只。野菊花多糖高、低剂量组分别ig给药400,200 mg·kg-1·d-1,连续14 d;于ig的第10天开始,模型组及野菊花多糖高、低剂量组分别经腹腔注射环磷酰胺100 mg·kg-1·d-1,连续4 d,制备免疫功能低下小鼠模型。观察野菊花多糖对免疫功能低下小鼠碳廓清试验的影响;测定小鼠体重及胸腺、脾脏质量,计算胸腺、脾指数;采用二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应法(耳肿胀法)测定细胞免疫功能;检测血清溶血素含量。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的各项指标均显著降低(P<0.01)。野菊花多糖高、低剂量组的碳廓清指数分别为0.027 8±0.005 9,0.019 9±0.004 7,吞噬指数分别为5.397 0±0.735 6,4.827 8±0.480 1,耳肿胀度分别为(5.23±0.98),(4.89±1.10)mg,血清溶血素分别为(0.410±0.063),(0.357±0.058)。模型组的碳廓清指数为0.013 4±0.003 8,吞噬指数为4.231 6±0.367 2,耳肿胀度为(3.21±0.91)mg,血清溶血素吸光度(A)为0.299±0.032。各指标与模型组比较,均具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:野菊花多糖可增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的免疫功能。

制备高寒香菊花多糖的酶源确定

采用酶法辅助超声提取高寒香菊花多糖。通过单因素试验及正交试验分别对酸性蛋白酶,纤维素酶超声提取高寒香菊花花多糖的最优工艺条件进行了研究。结果表明:酸性蛋白酶超声辅助提取高寒香菊花多糖最佳工艺条件为:酶解温度为45℃,酶用量0.5%,pH 4.0,酶解时间2.5 h,高寒香菊花多糖提取率为8.25%,纯度为23.30%;纤维素酶超声辅助提取高寒香菊花多糖最佳工艺条件为:酶解温度为45℃,酶用量2.0%,pH 5.0,酶解时间1.0 h,高寒香菊花多糖提取率为7.84%,纯度为13.25%。

不同产地菊花多糖的抗氧化活性研究

目的用水提醇沉法提取菊花中的多糖,对比研究不同产地菊花多糖的抗氧化活性。方法采用铁氰化钾还原法测定总还原能力、水杨酸法测定清除羟自由基能力和邻苯三酚法测定清除超氧阴离子能力,从以上3个方面来评价4种产地菊花多糖的抗氧化活性。结果菊花多糖的抗氧化活性与多糖浓度成正比例关系,在10 mg·mL^-1时抗氧化活性最强,但4种产地菊花多糖的抗氧化活性均不如抗坏血酸。其中,总还原能力:杭白菊>亳菊>黄山贡菊>滁菊;羟自由基清除能力:杭白菊>黄山贡菊>滁菊>亳菊;超氧阴离子清除能力:杭白菊>亳菊>黄山贡菊>滁菊。结论杭白菊的抗氧活性最好,具有一定科学研究价值。

响应面法优化菊花菜中的多糖提取工艺及其抗氧化活性研究

采用响应面法优化安徽省黄山菊花菜多糖的提取条件及其抗氧化活性。在单因素试验基础上,选择纤维素酶浓度、料液比、提取时间、提取温度为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合法进行4因素3水平试验设计,以菊花菜多糖得率为响应值,进行响应面分析,并研究了菊花菜多糖的体外抗氧化活性。结果表明:菊花菜多糖的最佳提取条件为纤维素酶浓度为1.5%,液固比为40mL/g,提取时间为42min,提取温度为80℃,在此条件下,菊花菜多糖的得率可达3.94%。同时建立了酶-声波法提取菊花菜多糖的二次数学模型,对目标产物提取具有良好的预测作用。菊花菜多糖体外清除·OH、ABTS·、DPPH·能力的IC_(50)值分别为76.23、112.25、102.86μL。且多糖样品量与各项抗氧化活性指标呈量效关系。

5个药用菊花品种类型主要化学成分的动态累积

研究药用菊花红心13号、NJK-2、优单6号、似贡2号、大花6号等品种类型木犀草苷、绿原酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、挥发油、多糖等成分在花期的动态积累过程,为药用菊花最佳采收期的确定提供依据。采用高效液相色谱法(HPLC)测定杭白菊5个品种类型花序6个开放程度的木犀草苷含量、绿原酸含量、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量,采用蒸馏法测定挥发油含量,采用分光光度法测定菊花多糖含量。结果表明,除似贡2号外,其余品种类型绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最大值均出现于80%开放,即药用菊花普遍采收时期;而似贡2号绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最大值出现于胎菊时期。5个品种类型绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁、总黄酮的含量最小值都出现在100%开放时;多糖和挥发油的含量则不同品种有较大差异,但总体呈现随着开放程度增加而逐步下降的趋势。

提取工艺对高寒香菊花粗多糖体外抗氧化性的影响分析

以总抗氧化力、清除羟自由基(·OH)能力、(DPPH·)的清除能力为指标,对复合酶法超声辅助和超高压处理提取2种不同方法提取所得的高寒香菊花粗多糖进行了体外抗氧化性比较研究。结果表明,超高压处理提取的高寒香菊花粗多糖的抗氧化性远远高于复合酶法超声辅助法。

Study on Extraction Process of Polysaccharides from Chrysanthemum

[Objective] The aim was to study the optimum extraction process of polysaccharide from chrysanthemum.[Method] By dint of orthogonal and single-factor experiments,the influences of microwave efficiency,extraction time,and liquid ratio on the extraction rate of polysaccharides from chrysanthemum were studied.The optimum operation condition by microwave extraction method was determined and was compared with that by traditional extraction method.[Result] The optimum extraction conditions were:800 W,1:15(solid-liquid ratio),and 15 min.The polysaccharides extraction yield under such optimum condition was 5.59%.The extraction yield of impregnation was generally about 2.73%.[Conclusion] Compared with the traditional extraction method,the microwave extraction was simple,convenient,energy saving,and efficient,and was suitable for industrial extraction of polysaccharide.