菊苣总黄酮缓解酒精所致小鼠急性肝损伤

目的研究菊苣总黄酮(CTF)对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法小鼠被随机分为空白对照组(纯净水)、酒精模型组(纯净水)、阳性对照组(西利马林,10 mg/kg bw)、CTF低剂量组(50 mg/kg bw)和高剂量组(100 mg/kg bw).除空白对照组外,其余各剂量组在最后一次灌胃处理后禁食6 h,继而均灌胃56度红星二锅头白酒(12 mL/kg bw).实验结束后,采集所有小鼠血浆和肝脏,测定血浆相关指标,肝脏分别用于组织病理分析、生化分析及实时荧光定量PCR分析.结果CTF高剂量组能够明显缓解由酒精引起的肝脏指数即血浆ALT和AST活性的上升.CTF低剂量组和高剂量组血浆TC和TG水平显著降低.此外,CTF高剂量组肝脏中MDA水平明显降低,而GSH、GSH-PX和SOD水平有不同程度的升高.CTF高剂量组肝脏Nrf-2和HO-1基因的mRNA表达水平显著升高,而CYP2e1、TNF-α、TLR-4和FAS基因的表达水平则明显降低.结论菊苣总黄酮可以提高肝脏的抗氧化和抗炎能力,对酒精所致的急性肝损伤有明显的缓解作用.

栽培菊苣籽总黄酮的细胞毒性及清除羟自由基活性成分的识别

采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)法评价栽培菊苣籽总黄酮对小鼠巨噬细胞RAW264.7的毒性。从总抗氧化能力、清除2,2’-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt cation radical,ABTS+·)能力、清除O_2^-·能力以及抑制Fe^(2+)诱发的卵黄脂蛋白脂质过氧化能力4个方面评价栽培菊苣籽总黄酮的抗氧化活性,并与常见的抗氧化剂VC和叔丁基对苯二酚(tertbutylhydroquinone,TBHQ)作比较。之后采用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)法对栽培菊苣籽总黄酮中清除·OH的活性成分进行了识别。MTT实验结果显示,菊苣籽总黄酮质量浓度为1 mg/mL时,对RAW264.7细胞具有一定的毒性,而当其质量浓度适当减小后,则基本无毒性。抗氧化实验结果表明:栽培菊苣籽总黄酮的总抗氧化活性和清除ABTS^+·的能力弱于VC和TBHQ,但在低质量浓度时,其总抗氧化活性与TBHQ非常接近;在清除O_2^-·方面,活性由强到弱为VC>菊苣籽总黄酮>TBHQ;在抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化实验中,栽培菊苣籽总黄酮强于VC,但弱于TBHQ。HPLC法结果显示,绿原酸比洋蓟素具有更高的清除·OH的活性,且二者对·OH的清除率分别为66.42%和46.00%。