菊苣酸对脂多糖诱导的H9C2细胞损伤的保护作用及机制

目的,研究菊苣酸(chicoric acid,CA)预处理在脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)诱导的损伤中对心肌细胞的保护作用及机制。方法用LPS对大鼠心肌细胞H9C2进行诱导损伤,评估不同浓度CA对心肌细胞的保护作用。CCK-8法检测细胞活力,化学比色法检测细胞内活性氧(ROS)释放量,流式细胞学检测细胞的凋亡率,Western blot检测沉默信息调节因子1(SIRT1)、核转录因子-κB(NF-κB)、IκBa、Caspase-3的表达。结果LPS可降低细胞活力,显著增加细胞内ROS的生成量,同时升高NF-κB、Caspase-3的表达,降低IκBα、SIRT1的表达水平,而CA预处理可以减轻LPS对细胞的损伤,减少ROS生成,同时减少NF-κB、Caspase-3表达,升高IκBa、SIRT1表达(P<0.05)。结论CA可通过调节SIRT1/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的H9C2细胞损伤。

菊苣酸(CA)对LPS诱导的牦牛PBMC细胞炎性因子分泌及表达的影响

为了探究菊苣酸(chioric acid,CA)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的牦牛外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)炎性相关因子分泌及转录水平的调节作用,用Ficoll法分离牦牛PBMC,体外将PBMC与LPS和CA共同培养,通过CCK-8法筛选LPS最佳刺激浓度,ELISA试剂盒检测CA对炎性相关因子含量的影响,实时荧光定量PCR法检测炎性相关因子mRNA表达情况。结果表明,CCK-8法筛选的LPS最佳致炎质量浓度为1.0 mg/L。与对照组相比,CA处理组显著提高IL-10的含量(P<0.05),LPS处理组显著提高IL-6和IL-1β的含量(P<0.05),极显著提高了IL-8、TNF-a和INF-γ的含量(P<0.01);与LPS处理组相比,CA+LPS处理组IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-a和INF-γ的含量均显著降低(P<0.05),但IL-10的含量显著升高(P<0.05)。同时,与对照组相比,CA处理组显著降低IL-1βmRNA表达(P<0.05),显著升高IL-10 mRNA表达(P<0.05),LPS处理组极显著升高IL-6、IL-8、IL-1β、INF-γ和TNF-αmRNA表达(P<0.01);与LPS组相比,CA+LPS处理组IL-6、INF-γ和TNF-αmRNA表达显著降低(P<0.05),IL-8和IL-1βmRNA表达极显著降低(P<0.01),IL-10 mRNA表达显著升高(P<0.05)。上述结果说明,CA可通过调节牦牛PBMC炎性因子的分泌及表达,从而发挥抗炎作用。