口腔白念珠菌耐药性及毒力因子表达水平相关性研究

目的了解口腔白念珠菌分泌型水解酶、生物膜和菌丝相等毒力因子的体外表达水平及其耐药性,并分析两者的相关性。方法分别采用牛血清白蛋白平板、卵黄琼脂平板和三丁酸甘油脂平板检测口腔白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)、磷脂酶(PL)和脂肪酶(Lip)的活性;采用结晶紫法检测其生物膜的形成,采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测菌丝壁蛋白1(HWP1)基因的表达;检测白念珠菌对常用抗真菌药物的耐药性。结果80%的菌株高产分泌型SAP,98%的菌株高产PL,78%的菌株Lip产量中等,无菌株高产Lip;50株菌株均能形成生物膜,其中30株(60%)生物膜形成能力强;SAP和PL的体外表达水平呈正相关(P<0.05),其他毒力因子之间均无相关性;耐药株与敏感株的毒力因子体外表达及HWP1表达之间没有显著性差异。结论大部分口腔白念珠菌高表达SAP和PL,中等表达Lip,生物膜形成能力强,SAP和PL的体外表达水平呈正相关,口腔白念珠菌的毒力与耐药性之间没有显著相关性。

阴道白念珠菌毒力因子表达水平及与耐药的相关性

目的 了解复发性念珠菌性阴道炎(RVVC)患者与阴道白念珠菌定植者的阴道白念珠菌的生物膜、水解酶和菌丝壁蛋白1(HWP1)基因等毒力因子的体外表达水平及其耐药性,初步探究白念珠菌致病性和耐药性与毒力因子之间的关系,为进一步探明白念珠菌引起的RVVC的致病和耐药机制提供资料。方法 前瞻性收集分离来源于成年女性RVVC患者和阴道白念珠菌定植者的100株阴道白念珠菌,采用酵母样真菌药物敏感性试剂盒检测对5种常用抗真菌药物的敏感性,采用结晶紫染色法检测其生物膜形成能力,采用牛血清白蛋白平板、卵黄琼脂平板和三丁酸甘油脂平板检测阴道白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)、磷脂酶(PL)和脂肪酶(Lip)的活性,采用实时荧光PCR检测HWP1基因的表达。结果 5种常用抗真菌药物中至少1种耐药的白念珠菌RVVC患者来源有13株,阴道定植者来源有10株;RVVC患者来源菌株的生物膜、3种分泌型水解酶和HWP1基因体外表达水平均高于阴道定植者来源菌株(均P<0.05),两组在生物膜形成强弱、3种水解酶表达高低等定性角度,差异均有统计学意义(均P<0.05);耐药性菌株生物膜表达水平高于非耐药性菌株外(P<0.05),对3种分泌型水解酶和HWP1基因体外表达水平上两组间没有差异(均P>0.05);Pearson相关性分析结果显示,除HWP1基因和生物膜-OD之间呈弱相关性(r=0.211,P=0.039)外,其他各项指标之间没有相关性(均|r|<0.2,P>0.05)。结论 白念珠菌的毒力因子生物膜、SAP、PL、Lip和HWP1都可能在RVVC的致病过程中发挥了重要作用,HWP1与生物膜的形成呈弱相关性,生物膜的形成与阴道白念珠菌的耐药性产生可能存在关联。