白背毛木耳菌丝体深层发酵工艺优化

以菌丝体干质量浓度为考察指标,对白背毛木耳液体深层发酵的培养基及工艺条件进行优化。通过正交试验(L9(34))确定了发酵培养基最佳配方。在此基础上,基于三因素三水平的Box-Behnken设计试验,采用响应曲面分析法对影响白背毛木耳菌丝体生长的发酵温度、摇瓶转速和发酵时间进行优化,确定最佳的培养条件。结果表明白背毛木耳深层发酵的最佳培养基组分为:葡萄糖2.00g/100mL、酵母膏0.20g/100mL、磷酸二氢钾0.25g/100mL、硫酸镁0.15g/100mL,当发酵温度为26℃、转速为182r/min、发酵时间为6.07d(145.7h)时发酵菌丝体干质量浓度最高,可达1.93g/100mL,较优化前提高了1.24倍。

红缘拟层孔菌的培养条件

为了解药用真菌红缘拟层孔菌的最佳培养条件,在单因素试验的基础上,以葡萄糖、蛋白胨、黄豆粉煮汁、pH值为因素,以菌丝干质量和发酵液抗肿瘤活性为标准,采用正交试验方法从中选出最优培养条件。结果表明:红缘拟层孔菌生长的最适温度为25℃,中性偏酸性环境,最适碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,以菌丝干质量为标准,最优培养条件为:葡萄糖25 g/L,蛋白胨10 g/L,黄豆粉煮汁3 g/L,pH值为6;以发酵液抗肿瘤活性为标准,最佳培养条件为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨8 g/L,黄豆粉煮汁4 g/L,pH值为6。

独脚金内酯对蜜环菌生长的影响

独脚金内酯是一类新型植物激素,既能影响植物生长发育,还能释放到植物根部周围影响根际微生物和寄生植物生长。对不同质量浓度的独脚金内酯GR24影响蜜环菌生长的情况进行分析,结果显示添加GR24可促进蜜环菌的分枝形成,促进液体培养基培养时形成的菌丝球直径增大;但在质量浓度较低(<2.0μg·L^(-1))和质量浓度较高(>2.0μg·L^(-1))时抑制蜜环菌的生长;添加GR24的质量浓度为2.0μg·L^(-1)时为最佳,此条件下促进蜜环菌生长,分枝菌索数最多,分枝率最高,菌丝干质量和菌丝多糖含量均增加。

红平菇液体培养条件的优化

为了优化红平菇液体培养条件,更好应用于生产实践,本试验采用Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,以温度、p H值、维生素B1含量为自变量,以红平菇菌丝体干质量为响应值进行了优化。先分别探究了不同因素对其生长的影响,确定最佳水平,然后采用响应面法拟合出最佳培养条件,最后结合实际验证得出了红平菇液体菌种的适宜培养条件。结果表明,红平菇液体培养适宜条件,培养温度为32℃,p H值为6.0,维生素B1含量为16.0 mg/L。在上述条件下,红平菇菌丝体干质量达10.19 mg/m L,与方程预测10.34 mg/m L结果一致,比优化前7.554 mg/m L提高了34.895%,表明所得模型有一定的生产实践指导意义。

苇蘑液体培养条件的优化

通过苇蘑菌丝体液体培养的单因素试验,初步确定苇蘑的较适生长条件:pH值为5~7;温度25℃;转速100~200 r·min^(-1);装液量50~90 m L。再经正交试验对培养条件进行优化,得出苇蘑的最适制种工艺为:初始pH值为6;温度恒定为25℃;转速保持150 r·min^(-1);装液量为90 m L/250 m L。在该培养条件下,苇蘑的菌丝干质量可达到19.4 g·L^(-1)。在通气量为4.5 L·min^(-1)条件下进行苇蘑液体菌种的5 L发酵罐培养,在44 h即达峰值19.9 g·L^(-1)。

蛹虫草液体发酵培养基的优化

采用统计学方法对1株蛹虫草Cordyceps militaris DY-1菌株进行液体发酵配方优化,以期得到适合蛹虫草生长的最佳培养基配方。以菌丝体干质量浓度为指标,首先采用单次单因子方法筛选出培养基中的最优碳源、氮源及无机盐和正交试验方法得出最佳的碳氮比(C/N);然后采用Plackett-Burman(BP)设计筛选出影响菌丝体干质量浓度的关键因素,通过中心组合和响应面法确定关键因素的最佳浓度,从而得到出菌株DY-1的液体发酵最佳培养基配方为:葡萄糖16.40 g·L-1,酵母浸膏粉5.00 g·L-1,硝酸钾1.00 g·L-1,硫酸镁0.20 g·L-1,磷酸二氢钾1.80 g·L-1,硫酸亚铁0.02 g·L-1。经验证,菌丝体干质量浓度为32.11 g·L-1,与模型的预测值基本一致。运用最佳培养基配方进行液体发酵,菌丝体干质量浓度较基础培养基提高了4.12倍。

虫草发酵培养基研究

采用摇瓶培养方法,以菌丝体干质量为指标,通过单因素和正交试验,对虫草液体发酵培养基组成进行研究。结果表明,虫草液体最优发酵培养基组成为:葡萄糖2.0%,蛋白胨4.0%,KH2PO4 0.20%,MgSO40.10%,在该条件下菌丝体干质量平均可达15.64 mg/mL。

白酒大曲中一株散囊菌的鉴定及培养条件优化

以分离自扳倒井中高温大曲中的一株散囊菌(Eurotium)CICC 41584为研究对象,经菌落形态观察、理化特征试验以及分子生物学研究对菌株CICC 41584进行鉴定。在基础生长培养基上,通过单因素试验、Plackett-Burman及Box-Behnken试验对菌株CICC41584培养条件进行优化。结果表明,菌株CICC 41584被鉴定为谢瓦散囊菌(Eurotium chevalieri),该菌株最佳培养条件为蔗糖添加量40 g/L,酵母浸粉添加量27.2 g/L,硫酸镁添加量2.6 g/L,培养温度28℃,培养时间10 d,转速120 r/min,接种量2%,装液量50 m L/250 m L。在此优化条件下,菌丝干质量达到1.95 g/100 m L,较优化前提高了8.29倍。