HPLC法测定冬虫夏草发酵菌丝粉中腺苷的含量

研究高效液相色谱法测定虫草发酵菌丝粉中腺苷含量的方法,对检测波长、流动相比例、图谱的特性、回收率及样品的超声波前处理等进行了讨论。实验表明:在反相键合的ODS Hypersil(5μm,125×4 mm)色谱柱上,以0.06 mol/L磷酸二氢钾-甲醇-四氢呋喃(150:10:1.5,v/v/v)为流动相,检测波长UV260 nm,平均回收率为99.11%。该方法灵敏度高、选择性好,样品前处理方法简单快速,回收率符合试验要求。

虫草菌丝粉辐照灭菌研究

In this paper, radiation decontamination effects of mycelium powder of sinensis with Co γ-rays and influ- 60 ence on its components were studied. The results showed that the irradiation was very effective in killing bacteria and moulds in mycelium powder. The D10 value for bacteria and moulds were 5.51kGy and 5.72kGy respectively. The optimum dose for decontamination of mycelium powder was 8—9kGy. Irradiating the mycelium powder to 8—9kGy did not cause obvious changes in the content of fatty acid, protein, total polysaccharide, total free amino acid and major nutrient components of adenosine, mannitol, and nitrogen. The irradiated mycelium powder, lost respectively 8.4%—9.5% and 29.6%—33.3% vitamin C and E, but they are minor nutrient components. After radiation decontamination, the quality-guaranteed mycelium powder has extended shelf life.

复方虫草菌丝粉对镉致雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用

[目的 ]探讨复方虫草菌丝粉对镉致雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用及其机制。 [方法 ]大鼠皮下注射氯化镉(CdCl2 ) ,按镉计 1 0mg/kg ,同时经口给予不同浓度复方虫草菌丝粉 ( 0 12 5g/kg、0 2 5 g/kg、0 5 0 g/kg) ,观察其对镉致大鼠生殖毒性作用的影响。[结果 ]CdCl2 可使大鼠精子活动率、计数、睾丸绝对重量和脏器系数降低 (P <0 0 5 ) ,精子畸形率增高 (P <0 0 5 ) ,高剂量虫草可以提高精子活动率、计数、睾丸重量和脏器系数 (P <0 0 5 ) ,降低精子畸形率 (P <0 0 5 ) ;CdCl2 使睾丸钙和镉含量升高 (P <0 0 5 ) ,尿镉排出量增加 (P <0 0 5 ) ;低剂量虫草增加尿镉的排出 (P <0 0 5 ) ,高剂量虫草降低睾丸钙和镉含量 (P <0 0 5 ) ,促进尿镉的排出 (P <0 0 5 )。 [结论 ]复方虫草菌丝粉通过促进镉的排出 ,减少镉的蓄积 ,对镉致大鼠生殖毒性有一定的拮抗作用。

豆渣固体发酵生产灵芝菌丝粉条件优化及三萜化合物含量的测定

利用豆渣代料固体发酵灵芝菌丝粉,结果表明菌丝生长势与菌丝培养温度、培养料/糖比密切相关,培养温度在28℃,料/糖比为100:2,菌丝生长势最强;以单位重量菌丝粉含三萜化合物量为目标函数,利用豆渣培养基培养灵芝菌丝体的最佳条件则为料/糖比为100:2;培养温度为24℃;培养时间为菌丝满瓶后12d。每g菌丝粉三萜化合物含量可达2.44mg。灵芝菌丝特有三萜化合物含量可间接反映菌丝粉中纯菌丝含量及灵芝多糖的含量。

高效液相色谱法测定虫草发酵菌丝粉中腺苷的含量

本文讨论了高效液相色谱法测定虫草发酵菌丝粉中腺苷含量的方法。实验表明:在ODSHypersil(5μm,125×4mm)色谱柱上,以0.06mol/L磷酸二氢钾-甲醇-四氢呋喃(150:10:1.5)为流动相,检测波长260nm,腺苷的检出限为50.25μg/mL,成功测定了不同批号虫草发酵菌丝粉中腺苷的含量,平均回收率为101%,分析方法灵敏、准确、重现性好。

人工虫草菌丝粉防治慢性马兜铃酸肾病的研究

目的探讨人工虫草菌丝粉对慢性马兜铃酸肾病的防治作用。方法将40只大鼠随机分为4组：正常组、木通组（关木通煎剂10g·kg^-1·d^-1灌胃）、治疗组（关木通煎剂10g·kg^-1·d^-1与人工虫草菌丝粉混悬液5g·kg^-1·d^-1灌胃）、马兜铃酸（AA）组（皮下注射AA10mg·kg^-1·d^-1）各10只，给药8w。结果8w后木通组、治疗组、AA组与正常组相比，24h尿蛋白定量、尿NAG酶、尿β2-微球蛋白（β2-MG）增加（P〈0．05，P〈0．01）。治疗组与木通组相比，24h尿蛋白定量及尿β2-MG定量无统计学差别（P〉0．05），治疗组尿NAG酶明显低于木通组（P〈0．01）。3组肾小管间质病理积分显著高于正常组（P〈0．01），治疗组与木通组积分无统计学差异（P〉0．05）。3组转化生长因子β1（TGF-β1），金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1），基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达较正常组明显上调（P〈0．01）。治疗组TGF-β1，TIMP-1表达较木通组下调（P〈0．05），MMP-9表达较木通组上调（P〈0．01）。结论人工虫草菌丝粉可降低尿NAG酶和TGF-β1，TIMP-1的表达，但其缓解慢性马兜铃酸肾病所引起的肾损害的作用还未全部达到统计学意义。

虫草菌丝粉对NK细胞自然杀伤率的调节作用

为了探讨虫草菌丝粉对免疫系统，特别是人体NK细胞功能的影响，我们进行了口服虫草菌丝粉胶囊的临床试验，测量了NK细胞自然杀伤率。

蝙蝠蛾被毛孢菌丝粉中腺苷的HPLC-PDA测定

目的建立蝙蝠蛾被毛孢菌丝粉中腺苷含量的高效液相色谱(HPLC)初步定性,PDA进一步定性。方法以UltimateTM AQ-C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),甲醇:0.01mol.L-1磷酸二氢钾溶液为流动相(10:90,V/V),检测波长260nm。结果线性回归方程和相关系数为:腺苷在1.0～100.0μg.mL-1范围内线性良好,腺苷回收率为93.6%,相对标准偏差分别为3.8%。结论本方法简便,重现性好,灵敏度高,定性准确,定量精确。

两种米曲霉固态发酵香菇菌丝粉的效果

以香菇(Lentinus edodes)菌丝粉中可溶性糖、呈味核苷酸和游离氨基酸等非挥发性呈味成分的释放率为指标,研究了米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 2436及其纤维素酶高产突变菌株Ⅱ5固态发酵香菇菌丝粉的效果。结果表明,米曲霉CICC 2436在其最佳发酵时间时香菇菌丝粉的可溶性糖、呈味核苷酸、游离氨基酸和非挥发性总呈味成分的释放率分别为22.50%、3.20%、3.06%、28.76%,而纤维素酶高产突变菌株Ⅱ5在其最佳发酵时间时香菇菌丝粉可溶性糖、呈味核苷酸、游离氨基酸和非挥发性总呈味成分的释放率分别为24.25%、3.42%、3.18%、30.85%,突变菌株Ⅱ5发酵香菇菌丝粉各种呈味物质的释放率均高于米曲霉CICC 2436。

猴头菇的药用功能及其菌丝粉冲剂的制作

猴头菇（Hericium erinaceus）,又叫猴头菌、刺猬菌、花菜菌或山伏菌等,为多孔菌目齿菌科猴菇菌属。子实体常悬于树干上,幼小时呈白色,成熟后变成黄棕色,表面布满长约1~3厘米针状菌刺,毛茸茸,形状极似猴子的头,也像刺猬,因而得名猴头菇、刺猬菌。

灵芝菌丝粉工厂化生产技术

介绍灵芝菌丝粉的培养基的制备、灵芝液体菌种的制备,菌丝体的培养,灵芝菌丝粉的加工等项技术。应用赤芝ly998和本项技术生产出的灵芝菌丝粉多糠含量多达12.61%,三萜含量达0.98%,有机硒达0.57mg/kg。

蝉花菌丝体粉胶囊的质量标准研究

目的:制定蝉花菌丝体粉胶囊的质量标准。方法:采用TLC法对蝉花菌丝体粉胶囊中的氨基酸、腺嘌呤、腺苷和尿苷进行定性鉴别;采用HPLC法对腺苷进行了含量测定,色谱条件:采用Inertsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾水溶液(15∶85),流速:1.0 mL/min,于260 nm处用外标法检测。结果:腺苷在0.007 475～2.99μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为99.60%,RSD为0.62%。结论:建立的方法简便,准确,重复性好,能有效控制蝉花菌丝体粉胶囊的质量。

珍稀药用真菌桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定

对桑黄菌丝体粉中总黄酮含量测定及方法学考察,为其质量标准的制定提供科学依据。方法:以70%乙醇溶液对桑黄菌丝体粉中黄酮进行回流提取,采用NaNO2-Al3+-NaOH体系吸光光度法,对桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定及方法学考察。结果:获得的芦丁标准曲线在0~0.04 mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,线性方程为:y=0.010x-0.016,线性相关系数R2=0.994;5批桑黄菌丝体粉中黄酮含量(mg/g)分别为:8.363、6.236、8.761、7.532、6.851,桑黄菌丝体粉中黄酮含量均在6.2 mg/g以上,平均含量为7.549 mg/g,相对标准差RSD为13.8%。结论:试验范围内,将桑黄菌丝体粉中黄酮含量的限度定为不少于6.0 mg/g;测定方法具有操作简单,回收率良好,专属性更强、精密度高的优点,可作为桑黄菌丝体粉中黄酮含量测定方法。

灵芝菌丝体速溶粉的体外抗氧化作用

试验研究灵芝菌丝体速溶粉的体外抗氧化作用,为其功能定位提供参考。主要对灵芝菌丝体速溶粉清除DPPH·、·OH、O_2^-·的能力,总还原力以及抑制脂质过氧化的能力进行测定,并检测了灵芝菌丝体中的多糖含量。结果表明,灵芝菌丝体速溶粉中的灵芝多糖含量为4.89%。随着灵芝菌丝体速溶粉浓度的增加,清除各自由基的清除率、总还原力和抑制脂质过氧化的抑制率均逐渐增大;清除DPPH·、·OH、O_2^-·的IC_(50)值分别为0.912 mg·mL^(-1)、3.173 mg·mL^(-1)、0.863 mg·mL^(-1),抑制脂质过氧化作用的IC50值为6.706 mg·mL^(-1)。说明灵芝菌丝体速溶粉有较强的抗氧化活性。

蝉花菌丝体粉胶囊Ⅰ期临床人体耐受性试验

目的：选择健康人为受试者，从安全的初始剂量开始，考察人体对试验药物的初步耐受性和安全性，为制定蝉花菌丝体粉胶囊Ⅱ期临床试验给药方案提供安全的剂量范围。方法：依据动物实验结果推算初始及最大剂量，从安全的初始剂量开始，顺序开展单次给药耐受性试验和累积性耐受性试验。试验共纳入46例受试者，其中单次给药耐受性试验34例，6个剂量组分别为3、6、12、18、24、30粒（330 mg/粒）；累积性（多次给药）耐受性试验12例，2个剂量组，分别为8粒/次和10粒/次。每天3次，连续给药7 d。观察指标为临床症状、生命体征和理化检查指标等，采用SAS 9.13统计软件进行统计学处理。结果：46例受试者共有6人发生6例次不良事件，其中2例次判断与试验药物的关系为不可能，4例次判断与试验药物的关系为可疑；不良反应主要表现为大便隐血弱阳性、尿红细胞相位差（MDI）红细胞计数轻度升高、尿常规红细胞计数轻度升高、面颊部红色丘疹。结论：蝉花菌丝体粉胶囊单次给药最大耐受剂量是30粒/天；多次给药为每次10粒，一天3次。推荐Ⅱ期临床试验的安全剂量范围为每天24～30粒，建议在Ⅱ、Ⅲ期临床试验中注意对不良反应的观察。

HPLC法测定深层液体发酵桑黄菌丝体粉中麦角甾醇的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定桑黄发酵菌丝体粉中麦角甾醇的含量。方法:采用甲醇超声提取菌粉中的麦角甾醇,色谱柱为Welch Mltimate LP-C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(98∶2),流速1 mL·min^(-1),检测波长283 nm,柱温30℃。结果:在进样量为0.100 721～1.007 214μg(r^2=0.999 9)范围内,麦角甾醇的浓度与峰面积具有良好的线性关系;平均加样回收率为98.02%(RSD 0.80%)。结论:该检测方法准确可靠,重复性好,可操作性强,可用于深层液体发酵桑黄菌丝体粉中麦角甾醇的含量测定,同时也为麦角甾醇列入桑黄发酵菌丝体粉的质量标准提供依据。

虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用

目的:观察虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对急性肝损伤小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝细胞变性及坏死程度的影响。方法:采用CCl_4诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,将动物随机分成5组,分别是空白对照组,模型对照组,虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物低、中、高剂量组(3个剂量组分别为1.11、3.33、10.00 g/kg BW),检测血清ALT、AST值,并取肝脏作病理切片,观察肝脏的病理损伤情况。结果:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物高剂量组能明显降低CCl_4急性肝损伤小鼠血清ALT值,减轻肝细胞坏死程度。结论:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤有辅助保护功能。

猴头菌菌丝多糖提取工艺的研究

目的：研究猴头菌菌丝多糖提取的最佳工艺。方法：采用热水煎煮的提取工艺，通过单因素试验和正交试验L9（3^4），研究了菌丝粉细度、加水倍数、提取温度对多糖提取率的影响。结果：菌丝粉细度、提取温度是影响多糖提取率的主要因素，提取的最佳工艺条件为：细度65目的菌丝粉，提取温度为95℃，料液比（g：ml）1：8，提取时间为4h，分二次提取，在此工艺条件下，猴头菌菌丝粉中粗多糖提取率可达到2．67％。结论：正交试验得到的工艺稳定可行，可作为发酵猴头菌菌丝多糖的提取工艺。