石莼类菌孢素氨基酸的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理

为探明石莼类菌孢素氨基酸(MAAs)的提取工艺及对副溶血弧菌的抑菌机理,本研究采用单因素实验和响应面优化试验,分析了液固比、提取温度和提取时间对石莼MAAs得率的影响,并对MAAs进行了硅胶柱层析分离以及HPLC和ESI-MS鉴定。通过扫描、荧光显微镜观察胞内核酸、蛋白质的泄露及DNA分解等分析MAAs对副溶血弧菌的抑菌机理。结果表明,石莼MAAs的最佳提取参数为液固比25:1 mL/g、提取温度40℃和提取时间118 min,制备到的MAAs得率为179.34±3.91 mg/g。石莼MAAs明显破坏了副溶血弧菌的细胞膜,导致了胞内核酸和蛋白质泄露,并促使菌体内DNA发生分解。MAAs经硅胶柱层析分离获得2个组分,经鉴定组分H2为shinorine,其在石莼干粉末中含量可达10.32 mg/g。本研究为石莼MAAs的制备和副溶血弧菌的生物防治提供了技术参考。

铜绿微囊藻中的紫外保护物质类菌孢素氨基酸(MAAs)与水华形成机制探讨

类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acids, 间称MAAs)存在于许多生物体内,对紫外辐射(UVR)有较高的吸收能力,被认为有保护细胞、减少UVR损伤的功能. 通过对从太湖分离、室内培养的铜绿微囊藻和以微囊藻为优势种类的太湖浮游植物样品的吸收光谱和反相高效液相色谱分析,发现铜绿微囊藻和太湖浮游植物都含有shinorine和porphyra-334两种MAAs,但以shinorine为主. 本文还讨论了MAAs与铜绿微囊藻水华形成的关系.

Alternaria tenuis菌孢热模拟生烃试验研究Ⅰ

本文以类似于地层中常见的无孔多胞孢的现代菌类—Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｔｅｎｕｉｓ菌孢进行热模拟生烃试验，分为常温、１００℃、２００℃、２５０℃、３００℃、４００℃、５００℃七个温度级试样，进行气体、族组分、元素、热解色谱、红外光谱、差热等分析，所获结果表明菌类也是良好的生油（气）原始母质，相当于Ⅰ型或Ⅰ—Ⅱ型干酪根，３００℃—４００℃是菌类热模拟产烃高峰期。

lternaria tenuis菌孢热模拟生烃试验研究Ⅱ

通过Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｔｅｎｕｉｓ 菌孢的实验室热模拟试验，进行了菌孢反射率、荧光、有机差热及Ｘ射线衍射等测试分析。在热演化过程中， 菌孢的菌孢反射率随温度的升高而逐渐增大；荧光随温度的升高逐渐减弱直至消失；有机差热研究表明，菌孢的成烃性能由强变弱，有机质变质程度逐渐增高；解析Ｘ衍射图谱，求出芳香度ｆａ 值，定量反映出菌孢中的饱和结构与芳香结构的变化规律及其有机质成熟度。通过这几项测试分析，探讨菌孢在热演化过程中有机质演变与成烃作用的关系，认为菌孢中有机质的演化大致经历了３ 个阶段：从常温至３００℃为未成熟期；３００ ℃至４００℃为成熟期，烃类大量生成；而４００ ℃～５００ ℃这一阶段菌孢中有机质变质程度高，为过成熟期，产烃性能变差。

江蓠中类菌孢素氨基酸(MAAs)分离纯化及其成分分析

存在于海洋生物中,尤其是藻类中的类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acids,MAAs),是一种吸收紫外线的物质,可用于紫外线防护品的原料,具有商业开发的前景。对湛江沿海产江蓠中MAAs进行了分离和结构鉴定,确定江蓠MAAs的主要组成及比例。利用C-18 Sep-Pak固相萃取柱和半制备型HPLC对湛江产江蓠中MAAs成分进行分离纯化。根据化合物的特征、紫外吸收波长和波谱数据鉴定其主要成分的结构,并结合参考文献确定湛江产江蓠MAAs的4种主要成分是palythine、shinorine、palythinol和porphyra-334,其比例约为4.9∶1∶1.2∶9.9。同时,比较了UV法和HPLC法对湛江产江蓠MAAs主要成分porphyra-334含量检测的准确度,建立了两种检测方法的拟合曲线,并通过试验验证,最终确立了HPLC对MAAs主要组成成分的检测方法。

紫菜类菌孢素氨基酸抗皮肤光老化的研究

为探究从坛紫菜中提取的类菌孢素氨基酸(MAAs)化合物对紫外线诱导产生的小鼠皮肤光老化作用的保护机制,实验采用乙醇热水提取法,提取坛紫菜中的MAAs,对其化合物的基本成分组成进行鉴定;通过观测小鼠造模部位皮肤的损伤情况,结合皮肤病理切片来评价坛紫菜MAAs对光老化小鼠的保护作用,并通过测定小鼠组织中超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量和皮肤组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,分析MAAs化合物对光老化皮肤的保护机制。结果显示,从坛紫菜中提取的类菌孢素氨基酸类化合物主要组分为Porphyra-334和Shinorine;紫菜MAAs可有效改善因紫外线诱导而产生的皮肤光老化的发生;与模型组小鼠相比,外涂给药组小鼠皮肤组织中SOD、GSH-Px的活性及Hyp的含量显著性提高,MDA的含量显著降低;而灌胃给药组与空白对照组小鼠相比体内抗氧化酶活性作用水平变化不明显。研究表明,紫菜MAAs对紫外线诱导的皮肤光老化具有保护作用。

紫菜中类菌孢素氨基酸纯化工艺的优化及其抗紫外辐射作用研究

为了筛选纯化紫菜类菌孢素氨基酸(mycosporine-like amino acid,MAAs)的离子交换树脂,优化纯化工艺,并研究纯化后MAAs体外抗紫外辐射活性,本研究通过静态动力学吸附及解析实验,筛选纯化树脂;结合动态动力学吸附及解析单因素实验建立响应面法对SA-2型阳离子树脂纯化MAAs的二次多项式模型,对MAAs的纯化工艺进行优化;通过建立大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的复合紫外线(UVA+UVB)损伤模型,分析纯化后MAAs样品的体外抗辐射活性。结果表明:静态动力学吸附及解析实验筛选出SA-2型阳离子树脂为纯化MAAs的最佳树脂,吸附率和解析率分别为86.01%和56.63%;吸附的最佳工艺条件为:上样液质量浓度3 g/L、上样流速1 m L/min、上样液pH为6、洗脱液体积分数为3%、洗脱流速为1.5 m L/min、洗脱液pH为6;在此条件下吸附率为79.21%,洗脱率为64.02%;纯化后的MAAs样品能有效抑制紫外辐射而造成的损伤,将菌种失活速度分别降低了39.10%和40.58%,表现出显著的抗紫外辐射活性。

姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用

目的 探讨中药姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用。方法 将Wistar大鼠 随机分为5组,除空白对照组外,其余4组均经免疫抑制处理(注射阿糖胞苷与60Co全身照射),皮下接种胃癌细胞 悬液,制成胃癌大鼠模型。其中3组分别用姬松茸菌孢多糖大、小剂量及香菇多糖灌胃治疗,正常对照组和模型对照 组分别用相等剂量的生理盐水灌胃。10 d后,观察各实验组肿瘤生长情况及相关免疫指标IL-2、NK细胞的含量或 活性。结果 胃癌大鼠模型组与正常对照组比较,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著降低(P<0．01)。用药灌胃 后,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著提高(P<0．01),瘤块明显减小(P<0．01);姬松茸菌孢多糖组的治疗效果 优于香菇组(P<0．05)。结论 姬松茸菌孢多糖有促进胃癌大鼠IL-2、NK细胞免疫功能及抑制肿瘤生长的作用。

江蓠中类菌孢素氨基酸(MAAs)成分分析及提取研究

利用高效液相色谱技术对江蓠(Gracilariaceae)中类菌孢素氨基酸(MAAs)进行了分析,并采用响应面分析法对MAAs物质的提取工艺进行优化研究。根据正交旋转组合试验设计原理,采用四因素五水平的响应面分析法,依据回归分析确定各因素的显著程度及最优工艺条件。结果表明,江蓠中MAAs的主要成分为porphyra-334;提取温度、浸提时间、甲醇浓度及液固比为影响MAAs物质提取的显著因素。通过多元二次回归拟合模型响应面分析,得到最优工艺条件:提取温度48.12℃,液固比34∶1,甲醇浓度25%,浸提时间1.85 h,优化条件下预测提取率为4.943 mg/g;试验值为4.893 mg/g,试验值与预测值吻合较好,响应面回归模型的准确性得到验证。

姬松茸菌孢多糖抗突变作用的实验研究

目的:通过研究姬松茸菌孢多糖对小鼠染色体畸变和微核形成的影响,探讨其抗突变作用。方法:用姬松茸菌孢多糖80mg/kg.d-1、40mg/kg.d-1、20mg/kg.d-1给各组小鼠灌胃,连续10d,于第9d腹腔注射环磷酰胺40mg/kg,染色体畸变实验,在处死动物前4小时腹腔注射秋水仙碱4mg/kg。取骨髓计数300个骨髓细胞分裂中期细胞染色体畸变细胞数、计算抑制率,观察1000个嗜多染红细胞中形成微核的细胞数。结果:姬松茸菌孢多糖能显著抑制染色体畸变(P<0.01),抑制率随剂量的增加而升高;能显著抑制微核形成(P<0.01),抑制率随剂量的增加而升高。结论:姬松茸菌孢多糖能显著抑制小鼠染色体畸变和微核形成,具有较强的抗突变作用。

姬松茸菌孢多糖对裸鼠移植瘤的抑制作用研究

目的:观察姬松茸菌孢多糖对裸鼠SGC-7901移植瘤的抑瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将体外培养的人胃腺癌SGC-7901细胞接种于BALB/C-nu/nu裸鼠的皮下,建立人胃癌移植瘤模型,共30只,随机分为5组:香菇多糖组、姬松茸菌孢多糖大、中、小剂量组、阴性对照组。结果:姬松茸菌孢多糖大、中、小各剂量、香菇多糖组与阴性对照组之间移植瘤体积存在显著性差异(P<0.01),姬松茸菌孢多糖中、大剂量组和香菇多糖组对照组裸鼠脾脏指数明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论:姬松茸菌孢多糖提高机体的免疫功能可能是其抑瘤作用机制之一。

姬松茸菌孢多糖对小鼠NK、LAK细胞活性影响的实验研究

目的:通过姬松茸菌孢多糖对自然杀伤NK、LAK细胞活性的影响研究,研究姬松茸菌孢多糖对机体非特异性免疫的提高作用机制。方法:NK、LAK细胞活性测定均采用MTT比色法。结果:姬松茸菌孢多糖对小鼠NK细胞杀伤作用具有增强作用,且与剂量呈正相关;姬松茸菌孢多糖对小鼠LAK细胞杀伤作用具有增强作用,但与剂量相关性不明显。结论:姬松茸菌孢多糖对机体非特异性免疫的提高作用与增强NK、LAK细胞的活性都有相关性。

生孢梭菌孢子作为生物指示剂用于残存概率灭菌工艺验证的可行性

测定并分析生孢梭菌孢子在不同介质及不同温度下的耐热参数 ,评价生孢梭菌孢子的耐热特性及其作为生物指示剂在残存概率湿热灭菌工艺验证中的应用。

姬松茸菌孢多糖对胃癌模型大鼠免疫调节网络的影响

目的:探讨中药姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠免疫调节网络IL-2-IFN-NK和M-ΦIL-1-Th1的影响。方法:将wistar大鼠随机分为5组,除正常对照组外,其余4组均经免疫抑制处理(注射阿胞糖苷与60C0全身照射)后,皮下接种胃癌细胞悬液,制成胃癌大鼠模型。其中用药组分别用姬松茸菌孢多糖大小剂量和香菇多糖灌胃治疗,空白组和模型对照组分别用相同剂量的生理盐水灌胃。10 d后,观察各组肿瘤生长情况及免疫网络的相关指标。结果:胃癌大鼠模型组与正常对照组比较,MΦ-IL-1-Th1网络的主要成员MΦI、L-1和IL-2-IFN--NK网络中的主要成员IL-2、NK均明显降低(P<0.01),姬松茸菌孢多糖大小剂量组均能明显提高NK、MΦ活性和IL-1、IL-2含量(P<0.01),并使胃癌大鼠的瘤块明显减小(P<0.01)。结论:姬松茸菌孢多糖能明显提高胃癌大鼠免疫网络水平,有抗胃癌作用。

生孢梭菌孢子作为生物指示剂的研究

用生孢梭菌孢子作为输液产品湿热灭菌工艺的生物指示剂 ,采用残存曲线法测定生孢梭菌孢子在 3种溶液中的耐热性 ,确定灭菌工艺的最小 F0 值 ,制订合理的灭菌工艺微生物学验证方案。

姬松茸菌孢多糖对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤p53基因蛋白表达的实验研究

目的研究姬松茸菌孢多糖对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤p53基因蛋白表达的影响。方法采用SGC-7901胃癌细胞在BALB/C-nu/nu裸小鼠上进行造模,免疫组织化学方法检测p53基因蛋白表达水平。结果姬松茸菌孢多糖能显著下调突变型p53基因蛋白的表达水平。结论姬松茸菌孢多糖对突变性抗癌基因p53蛋白表达的影响是其抗肿瘤的作用机制之一。

姬松茸菌孢多糖对SGC-7901胃癌细胞增殖影响的实验研究

目的 :研究姬松茸菌孢多糖体外对SGC 790 1胃癌细胞恶性增殖的影响。方法 :采用集落形成法、MTT比色法、生长曲线法。结果 :与对照组相比 ,各剂量姬松茸菌孢多糖对SGC 790 1细胞成集落数均有抑制作用 (P <0.0 1) ,其IC50 是 3 1 2 5mg/mL ,且随剂量增加其抑制作用增强 ,呈剂量 -效应关系 ;与对照组相比较 ,姬松茸菌孢多糖各剂量对SGC 790 1细胞增殖均有抑制作用 (P <0. 0 1) ,当其为 3 1 2 5 μg/μL时其细胞存活率为 5 1% ,有剂量 -效应关系 ;生长曲线显示 ,对照组SGC 790 1细胞在接种后第二天开始快速生长 ,第三天细胞数量已高于药物组 (P <0 0 5 ) ,而姬松茸菌孢多糖处理的SGC 790 1细胞从第一天起生长即受到不同程度抑制 ,且随剂量和时间的增加 ,抑制作用越明显。结论 :姬松茸菌孢多糖在体外能抑制SGC 790

姬松茸菌孢多糖对人胃癌细胞移植裸鼠瘤Bcl-2基因蛋白表达影响的实验研究

目的研究姬松茸菌孢多糖对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤Bcl-2基因蛋白表达的影响。方法采用SGC-7901胃癌细胞在BALB/C-nu/nu裸小鼠上进行造模,免疫组织化学方法检测Bcl-2基因蛋白表达水平。结果香菇多糖组,姬松茸菌孢多糖大、中、小剂量组与空白对照组比较均具有显著统计学意义(P<0.01),姬松茸菌孢多糖各剂量组之间比较均具有统计学意义(P<0.05),姬松茸菌孢多糖具有降低Bcl-2基因蛋白表达水平的作用,并且与用药剂量呈相关性。结论姬松茸菌孢多糖降低Bcl-2基因蛋白表达水体可能是其防治实验性胃癌的作用机制之一。

姬松茸菌孢多糖对裸鼠SGC-7901移植瘤的抑制作用及相关免疫器官的影响

目的探讨姬松茸菌孢多糖对裸鼠SGC-7901移植瘤的抑瘤作用及其可能的作用机制。方法计算移植瘤体积、重量,测定脾脏和肝脏指数。结果姬松茸菌孢多糖能明显减少移植瘤体积,减轻移植瘤重量,拮抗移植瘤裸鼠脾脏和肝脏指数的减少。结论姬松茸菌孢多糖有较强的抑瘤作用,其机制与提高机体的免疫功能密切相关。

Corynespora foveolatum菌孢原生烃类与热解产物烷烃生物标志物特征

以一种类似地层中蠕虫状无孔多胞孢的现代真菌孢子Corynesporafoveolatum菌孢(竹棒孢)为样品,研究了地层中同类菌孢的原生烷烃生物标志物及其热解生烃特征。实验结果表明 ,Corynesporafoveolatum菌孢原生烃类烷烃组分主要由正构烷烃组成 ,并以nC29为主峰碳 ,nC29占正烷烃总量的42 8 %。除含量不高的植烷和姥鲛烷外,几乎不含异构烷烃和烯烃 ,烷基苯和烷基环己烷的含量也极低。Corynesporafoveolatum菌孢热解生烃 ,在未—低成熟阶段 ,以高碳数正烷烃为主 ,仍保持了原生烷烃的特征 ;但C17、C19和C20烯烃组分明显增加。检出了一组C17和C20的二环萜烷同分异构体 ,其中一个化合物可能是半日花烷。C28甾烯和甾二烯在甾烯化合物中占优势 ,这一点和Alternaria菌孢类似 ,而与盘星藻及陆生植物花粉不同。在正常成熟阶段 ,以低碳数正烷烃为主。Corynesporafoveo latum菌孢和Alternaria菌孢(细链格孢 ,无孔多胞孢的一个不同种)相比 。