东北传统大酱中产抗菌物质菌株的筛选及安全性研究

以东北大酱为原料,分离、鉴定产抗菌物质的微生物菌株,分析其抗菌能力。结果显示,共分离得到44株具有抑菌活性的菌株,主要为芽孢杆菌属。通过抑菌谱试验发现,贝莱斯芽孢杆菌R2可抑制6种食源性致病菌生长,具有抑菌广谱性,并可从中扩增出其编码非核糖体脂肽类物质杆菌霉素D、丰原素、鞭毛蛋白、伊枯草菌素A、芽孢菌溶素、枯草菌脂肽和蛋白物质类TasA的相关基因片段。通过对贝莱斯芽孢杆菌R2的功能、表型和安全相关特性的研究,发现菌株贝莱斯芽孢杆菌R2菌株不溶血,对10种抗生素敏感,并具有蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶活性。本研究为酱类低盐发酵微生物资源的高值化利用提供参考。

天名精内生真菌的分离鉴定及抗肝癌活性研究

目的对天名精内生真菌进行分离和鉴定,并从中筛选出具有抗肝癌作用的活性菌株,为寻找新的抗肝癌先导化合物提供菌株资源。方法采用植物组织切块法和平板划线法对天名精内生真菌进行分离纯化;MTT法筛选对肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用的活性菌株,并计算活性显著内生真菌的IC50值;运用形态学鉴定和分子鉴定的方法对活性菌株进行鉴定。结果从天名精中共分离得到60株内生真菌,其中TMJ-03、TMJ-13、TMJ-15、TMJ-23、TMJ-54为活性内生真菌,其发酵物抑制HepG2细胞增殖的IC50值分别为19.49(TMJ-C-03)、31.13(TMJ-C-13)、88.65(TMJ-C-15)、37.42(TMJ-D-23)、17.22(TMJ-D-54)、32.72(TMJ-C-54)μg·mL^(-1)。5株活性菌株均鉴定到种,分别为Aspergillus terreus、Chaetomium globosum、Alternaria tillandsiae、Fusarium proliferatum、Alternaria arborescens。结论首次从天名精中筛选出对HepG2细胞增殖具有抑制作用的活性内生真菌,为寻找新的抗肝癌药物提供了菌株资源。

益生菌对发酵乳品质影响的研究进展

发酵乳营养丰富、风味独特,市场发展迅速,是益生菌在食品领域的重要产品应用形式。与嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种等发酵菌株相比,益生菌在主发酵过程中参与度较低,但通过协同发酵对发酵乳的质构、风味、后酸化程度等产生一定作用,影响发酵乳品质。本文综述了益生菌对发酵乳质构、风味品质、后酸化进程的影响;分析了益生菌利用代谢及产EPS维持发酵乳的质构,通过产生风味化合物改善发酵乳的风味品质,以及通过影响商业发酵剂的生长而影响发酵乳后酸化进程的相关机理;总结提出了提高益生菌在发酵乳中稳定性的相关技术,以期为功能性发酵乳的研发和品质提升提供参考。

纳豆激酶高活性菌株的筛选及其发酵条件的优化

为开发具有特定生理活性的新型纳豆保健品,从24种豆制品中分离和筛选出3株有明显纤溶活性的芽孢杆菌菌株,其中BN-6菌株活性最高,达到900U/ml。通过单因素试验和正交实验确定了液体发酵纳豆激酶最佳条件培养液中豆粕粉2%,玉米粉1%,初始pH=6.5,温度37℃。

南大洋抗植物病原真菌活性菌株的筛选及系统发育分析

以尖刀镰孢菌为指示菌,从第27次南极科考采取的南大洋海水样品中筛选到20株活性菌株,其中2株属于嗜冷杆菌,2株属于假单胞菌,16株属于假交替单胞菌。对4株具有较强抑菌活性的菌株进行抑菌谱研究,结果表明,菌株312-1、83-1、195对尖刀镰孢菌、辣椒疫霉、大丽轮枝菌、番茄早疫病菌、瓜亡革菌、水稻纹枯病菌、芦笋茎枯病菌均具有明显的抑菌效果。

利用转座子Tn5诱变冰核细菌获得无冰核活性菌株

以云南省冰核细菌的优势种类丁香假单胞菌Pseudomonassyringae和菠萝泛菌Pantoeaananas为重组基因工程菌的受体菌 ,采用Tn5转座子诱变技术 ,以大肠杆菌EscherichiacoliS17/pZJ2 5∶∶Tn5作为转座子诱变的供体菌 ,使Tn5插入并整合到冰核细菌基因组中 ,使冰核基因的线性连续性被破坏 ,失去冰核活性。大量筛选接合子 ,获得 15

无抗菌活性株及其变株的初步鉴定

对天然无抗菌活性的菌株Ｎｏ．１２和其变株Ｎｏ１２－１０３的菌体形态、培养特征及细胞壁组成作了初步分析，鉴定结果均属拟诺卡氏菌。同时对激活株的抗菌谱作了研究。并以Ｎｏ１２－１０３为出发株，诱变后选出６支阻断株，经共合成试验发现其中两株（Ｂ１，Ｂ３）可以共同合成抗生素，其余４株无此特性。而原株Ｎｏ１２和两阻断株Ｂ１、Ｂ３也能共同合成和Ｎｏ１２－１０３分泌的同种抗生素，证明在原始天然无活性株Ｎｏ１２中确实存在一条合成该种抗生素的途径。

絮凝活性菌株培养条件的响应面优化

选取对甘薯淀粉具有明显絮凝效果的活性菌株,利用响应面分析法对其培养条件进行优化。在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken中心组合实验设计,以初始pH、接种量、培养温度和培养时间四个因素为响应因子,絮凝率为响应值分析各因子与絮凝率之间的影响关系。最终建立二次回归方程为Y1=-103.602+5.166X1+5.848X2+8.312X3+0.0580X4-1.028X1X1-0.14X1X2+0.263X1X3+0.0185X1X4-0.141X2X2-0.097X2X3-0.003X2X4-0.166X3X3-0.002X3X4-0.0006X4X4,并得到相关系数R2=0.9550,对各因子的显著性及交互作用分析后,确定了最佳培养条件为:初始pH6.0、接种量8%、培养温度27℃、培养时间48h。在此培养条件下絮凝率的理论值为48.72%,重复验证值为48.65%。

抗真菌活性菌株BP08的鉴定及培养条件和培养基的优化

【目的】对抗真菌活性菌株BP08进行鉴定,并对其最适培养条件和最佳培养基组分进行优化。【方法】从华南农业大学杀虫植物标本园土壤中筛选出1株BP08拮抗菌株,采用形态和生理生化鉴定方法、16S rDNA序列测定和系统发育分析对菌株BP08进行鉴定;以菌体生物量和发酵液拮抗水稻纹枯病菌活性为指标,通过单因素试验,对培养基初始pH值、发酵温度、装液量、接种量等进行优化,在此基础上以发酵液拮抗水稻纹枯病菌活性为指标,对发酵培养基组分进行优化。【结果】筛选的菌株BP08初步鉴定为短小芽孢杆菌;在培养基初始pH值7.08.0,发酵温度30℃,装液量100 mL/L,接种量为3%,180 r/min条件下,菌株BP08生长量及拮抗水稻纹枯病菌的活性较高。培养基最佳碳源、氮源、无机盐分别为葡萄糖、牛肉膏、CaCl2。【结论】短小芽孢杆菌菌株BP08在优化培养条件下能够得到大量的抗真菌物质,具有一定的开发利用潜力。

生物膜中活性菌株的分离纯化及抑藻活性研究

对防污漆表面细菌黏膜进行分离纯化,并对分离纯化的6种活性菌株进行发酵,制得发酵液并离心获得上清液。以中肋骨条藻为受试浮游藻类,采用活性菌株发酵液及上清液对其进行抑藻试验的研究。研究结果表明,细菌发酵液对中肋骨条藻的抑制作用要稍弱于其上清液的抑制作用,6种细菌对中肋骨条藻表现出的抑制作用大小为:Aureobasidium pullulans HN最强;其次为Bacillus cereus和Pseudoalteromonas;Exiguobacterium indicum、Exiguobacterium acetylicum和Kytococcus sedentarius抑制作用相差不大。

生物膜中活性菌株的鉴定及抑菌活性研究

对采集于青岛港六号码头浮筏的防污涂料样板上的生物膜进行分离和纯化,共获得细菌26株,酵母菌23株,并对其进行活性菌株的筛选,最终获得具有抑菌活性的细菌7株,酵母菌1株,通过基因测序确定不同菌株的种属,为环境友好型防污剂的获得提供基础。

香果树可培养内生真菌的群落结构及功能活性菌株的筛选

为进一步保护和利用香果树这一濒危植物,以香果树为材料,运用传统组织分离与分子生物学方法相结合,对4个居群地(庐山、井冈山、三清山、铜鼓)的香果树的内生真菌物种多样性、群落组成以及生态分布规律进行研究,并对庐山香果树不同季节内生真菌进行对比分析。结果显示:从香果树1980个组织块中分离出757株内生真菌,其中产孢菌株240株,占总数31.70%,不产孢菌株517株,占总数68.30%。根据形态学特征和分子鉴定结果,757菌株隶属于Arthopyrenia、Colletotrichum、Phomopsis、Penicillium等40个分类单元。在属级水平,以Arthopyrenia(19.42%)、Colletotrichum(15.32%)和Diaporthe(9.64%)为优势菌群;根据分离频率,不同居群地香果树内生真菌存在差异,分离频率顺序为:三清山(31.18%)>井冈山(30.32%)>铜鼓(24.52%)>庐山(13.98%);根据相似性系数,4个居群地香果树内生真菌相似性系数在0.29-0.52之间。同时研究发现不同季节香果树不同组织部位内生真菌在数量、种群分布以及优势种群等方面都存在较大差异,其分离频率顺序为:叶(50.99%)>根(25.63%)>茎(23.38%),冬季(41.74%)>秋季(40.06%)>夏季(18.21%)。形成内生真菌分布差异性可能与不同地理位置、气候因素、土壤理化性质和宿主植物组织的生理状况等密切相关。同时,对分离获得757株香果树内生真菌菌株进行溶磷、解钾、分泌IAA的功能活性筛选,获得82株具溶磷效果,36株具解钾活性,13株具分泌IAA活性的菌株,9株既有溶磷又有解钾活性,为进一步探索香果树植物内生真菌对宿主植物促生效应提供依据。

海洋放线菌BH3A8代谢产物杀线虫活性研究

植物寄生线虫的危害日趋严重,利用生物防治技术是控制线虫危害的研究重点。对从渤海海域不同深度水样中筛选出的具有杀线活性的菌株BH3A8代谢产物进行研究,测定了BH3A8代谢产物杀线虫谱和对南方根结线虫的温室防效以及对松材线虫形态与运动频率的影响。结果表明,BH3A8代谢产物对南方根结线虫幼虫毒力最强,对松材线虫幼虫毒力次之,对大豆孢囊线虫幼虫毒力最弱。在温室测定中活性菌株发酵液对南方根结线虫防治效果为73.75%。活性菌株代谢产物明显抑制松材线虫运动频率。中毒线虫起初表现为虫体扭曲、颤抖、痉挛,接着线虫游动缓慢、扭动身躯,最后线虫反应迟钝,摆动减慢,首尾同侧展开,标志着线虫死亡。虫体死亡多为僵直状态。BH3A8杀线虫谱广、效果好、使用成本低,在生产上具有很好的应用前景。

古旱莲内生细菌多样性及产酶活性鉴定

分离古旱莲(Magnolia denudate Dest var.purpurascens Rehd et Wils)内生细菌,研究其多样性及产酶活性;纯培养分离古旱莲内生细菌,纯化后对分离菌株进行分泌胞外淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶活性研究,使用16S rRNA系统发育分析对菌落进行鉴定;共分离出内生细菌52株,根据测序结果不同,将菌株归为19个分类单元(OTUs)。系统发育分析表明,这些菌株分属4个门,分别为拟杆菌门(Bacteroidetes,占总数7.7%),厚壁菌门(Phylum Firmicutes,占总数15.4%),变形菌门(Proteobacteria,占总数19.2%),放线菌门(Actinobacteria,占总数40.4%)及占总数为17.3%的未培养细菌;产酶结果表明,22株产蛋白酶、3株产淀粉酶、7株产纤维素酶、4株产脂肪酶,还有16株未发现产酶活性。本研究分离到古旱莲内生细菌52株分为4门19个分类单元,细菌多样性及产酶活性丰富。

细菌呼吸活性与降解有机污染物效能研究(英文)

研究了饮用水处理系统中活性炭柱上获得六株细菌（编号为菌株1#～6#）的活性和降解有机污染物效能。采用微电极呼吸速率法研究细菌的呼吸活性。结果表明，2#，3#和5#三株细菌在所有实验检测条件下均具有较高的呼吸活性；降解预氧化松花江原水中有机物静态实验表明，六株细菌对有机污染物的去除能力大不相同，其中2#，3#和5#三株细菌的CODMn。去除率为34．72％～43．72％，TOC去除率为46．24％～57．79％，体现出更好的环境适应能力和底物降解能力，即具有更强的代谢活性。此外，研究结果也证实了通过微电极呼吸速率测定法筛选活性菌株方法的可行性。

饮用水中高效降解有机污染物菌株中药废水的应用研究

目前国内水厂采用的各种饮用水污染控制技术中，化学预氧化一生物活性炭技术处理效果较好，其中生物降解对水中有机污染物去除发挥了一定的作用。筛选出高活性菌株，形成高效生物活性炭，强化提高生物处理效率势在必行。

海洋黏细菌防治甘蔗梢腐病的筛选评价

【目的】明确来源于广西北部湾的海洋黏细菌对甘蔗梢腐病病原真菌的生物防治潜力,为研发有效防治甘蔗梢腐病的生物农药提供科学依据和物质基础。【方法】以来源于广西北部湾不同海洋生境的12种62株黏细菌为研究对象,以2株广西蔗区甘蔗梢腐病优势病原菌甘蔗镰孢菌(Fusarium sacchari)9DF-3-2和FS-2-1为靶标,通过平板对峙培养法评价黏细菌对甘蔗镰孢菌的拮抗作用,初步筛选出潜力活性菌株;利用透析膜对峙培养法、菌丝裂解法和菌丝生长速率法等从拮抗作用方式、对病原菌菌丝生长的影响等方面评价潜力活性菌株对甘蔗镰孢菌的生物防治潜力。【结果】通过平板对峙培养法从62株黏细菌中发现47株黏细菌对2株甘蔗镰孢菌9DF-3-2和FS-2-1具有明显的抑制作用,其活性菌株率达75.8%,有18株黏细菌对2株甘蔗镰孢菌的抑菌直径大于1.000 cm,其中以叶柄黏球菌(Myxococcusstipitatus)T163和蜂窝囊菌(Melittangiumsp.)T269的抑制作用最强。黏细菌胞外发酵液对甘蔗镰孢菌菌丝裂解试验结果显示,黏细菌T163和T269的胞外发酵液对2株甘蔗镰孢菌的菌丝抑制作用最明显;透析膜平板隔离试验结果显示,黏细菌T269、T163和T071受透析膜隔离后对甘蔗镰孢菌仍具有很好的抑制作用;黏细菌发酵提取物抗菌活性测定结果显示,黏细菌T163和T269的发酵提取物对2株甘蔗镰孢菌均具有较好的抑制作用,其中浓度为100.0μg/mL的T163发酵提取物的抑菌活性最好,其对9DF-3-2和FS-2-1的抑制中浓度(EC50)分别为13.97和84.58μg/mL。【结论】来源于广西北部湾的海洋黏细菌T163和T269对甘蔗梢腐病病原菌甘蔗镰孢菌表现出较好的生物活性,具有开发成绿色生物防治剂的潜力。