四倍体菘蓝毛状根培养系统的建立及外界因子对其生长的影响

用发根农杆菌 Agrobacterium rhizogenes R16 0 1,A4,ATCC15 834菌株感染菘蓝 Isatis indigoticaFort.同源四倍体的子叶 10 d后 ,在子叶切口处均能陆续长出毛状根。转化根在不含激素的 MS固体培养基上快速生长并表现出典型的毛根性状 ,经冠瘿碱分析证明确已被转化。

RiT-DNA对四倍体菘蓝的遗传转化及其植株再生

目的 :建立一套利用发根农杆菌转化四倍体菘蓝的有效方法。方法 :利用发根农杆菌R16 0 1,ASTCC15 834和A4感染四倍体菘蓝的子叶外植体诱导出毛状根 ,再将毛状根置于含不同激素的培养基上诱导再生植株。结果 :3种农杆菌具有不同的诱导能力 ,毛状根在不含激素的MS固体培养基上快速生长并表现出典型的毛根性状 :多分枝、多根毛且无向地性 ,经冠瘿碱分析证明确已被转化。毛状根在无激素的MS增养基中悬浮培养两周后其生物量增加近 35倍 ,在含BA的MS固体培养基上不经愈伤组织阶段直接分化出不定芽 ,所有不定芽都可在生根培养基上生根长成再生植株。冠瘿碱检测表明Ri质粒的T DNA部分已转化到再生植株基因组中。结论 :发根农杆菌可以诱导四倍体菘蓝长出毛状根 ,经诱导出的毛状根具有再生完整植株的能力。