内折香茶菜素和内折香茶菜素D抗肿瘤作用的实验研究

目的 研究内折香茶菜素和内折香茶菜素 D(以下简称内折素和内折素 D)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法 以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌 (ECA)、肉瘤 180 (S1 80 )、肝癌 (HCA)和 L ewis肺癌为模型 ,以 5 - Fu为阳性对照组 ,以生理盐水为阴性对照组 ,观察 12 .5和 2 5 m g/ kg内折素和内折素 D的抗肿瘤作用 ,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素和内折素 D对机体免疫状态的影响。结果 内折素和内折素 D与阴性对照组相比在体外对 ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力 ,在体内对 S1 80 实体型和腹水型肿瘤 ,HCA实体型和腹水型肿瘤以及 L ewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用 ,对机体免疫状态无明显影响。结论 内折素和内折素 D具有较强的抗肿瘤作用 。

显脉香茶菜素的晶体结构及其抗癌活性区的电子结构研究

显脉香茶菜素是从抗癌中草药,显脉叶香茶菜中,提取出来的一种具有抗癌活性的化合物.由X射线衍射测定结果可知,其晶体属正交晶系,空间群为P2_12_12_1 ,a=0.7629(2),b=0.9557(4),c=2.6473(9)nm,Z=4.晶体结构表明,分子中含有部分共轭的α-亚甲基环戊酮的五元环,该五元环具有较大的内应力,是一个抗癌活性区.由量子化学计算结果可知.抗癌活性区的LUMO是πMO,能级较高,容易接受电子参与反应,因此,该分子是亲电型的。

蜂斗菜素对人胃癌SGC7901细胞增殖抑制和诱导凋亡作用

目的观察蜂斗菜素对人胃癌细胞SGC7901增殖及凋亡影响,并探讨其作用机制。方法磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡及周期阻滞,免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤抑制基因p53蛋白的表达及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平。结果蜂斗菜素作用24、48、72 h后对人胃癌SGC7901细胞均有显著的增殖抑制作用,并具有剂量和时间依赖性;与对照组相比,蜂斗菜素作用48 h后G_1/G0期细胞比率增加,S期及G_2/M期细胞比率下降,细胞凋亡率升高;和对照组相比,蜂斗菜素作用48 h后,细胞中p53蛋白表达显著增加增加,ERK1/2磷酸化水平则显著降低。结论蜂斗菜素对人胃癌SGC7901细胞具有增殖抑制、细胞周期阻滞及诱导凋亡作用,其机制可能与增加p53蛋白表达和降低ERK1/2磷酸化水平有关。

蜂斗菜素诱导骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡及其机制

目的观察蜂斗菜素对骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用锥虫蓝拒染法检测蜂斗菜素对RPMI 8226细胞的增殖抑制作用,TUNEL法检测蜂斗菜素诱导的RPMIS226细胞凋亡,Hochest33258荧光染色法观察细胞核的变化,Western blot技术检测Caspase-3、8、9蛋白表达和MEK/ERK、p38MAPK蛋白磷酸化水平。结果蜂斗菜素作用24、48、72h后对骨髓瘤RPMI 8226细胞均有显著的增殖抑制作用(P均<0.01);蜂斗菜素呈时间和浓度依赖地诱导骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡(P<0.05,P<0.05),Caspase抑制剂预处理可明显抑制细胞凋亡;蜂斗菜素作用72h后,Caspase-3、8、9蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.05),ERK1/2及MEK蛋白磷酸化水平显著下降(P<0.01,P<0.05),p38MAPK蛋白磷酸化水平显著上升(P<0.01)。结论蜂斗菜素能够抑制骨髓瘤RPMI 8226细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Caspase-3、8、9蛋白激活,ERK/MEK及p38MAPK蛋白磷酸化改变有关。

川东獐牙菜素A保护溶血性磷脂酰胆碱诱导的内皮细胞损伤

目的 观察川东獐牙菜素A对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导的血管内皮细胞损伤的保护。方法 ①检测Cu2+诱导的低密度脂蛋白(LDL)氧化和二苯代苦味肼基自由基(DPPH)反应。②在大鼠离体胸主动脉环,检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应。③培养内皮细胞,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)浓度及细胞内二甲精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)活性。结果①川东獐牙菜素A能显著抑制Cu2+诱导的LDL氧化和清除DPPH。②川东獐牙菜素A(10或30μmol·L-1)能改善LPC(5 mg·L-1)所致血管内皮依赖性舒张功能损伤。⑧川东獐牙菜素A(1、3或10μmol·L-1)能抑制LPC(5 mg·L-1)诱导的培养液中LDH和MDA浓度的降低以及NO浓度的增加;川东獐牙菜素A(3或10 μmol·L-1)能显著抑制LPC诱导的ADMA水平升高;川东獐牙菜素A(10μmol·L-1)能显著增加DDAH活性。结论 川东獐牙菜素A对LPC所致的血管内皮细胞损伤有保护作用,其作用与增加DDAH活性和降低AD-MA浓度有关。

内折香茶菜素的化学结构

从河南省嵩县产内折香茶菜(Rabdosia infiexus(Thunb.)Kudo)叶中分离到两种对映-贝壳杉烯型二萜化合物,根据各种光谱数据推断一个为新化合物,其化学结构为:对映-1β,6,11β,15α-四乙酰氧基-6,7-螺断内酯-16-贝壳杉烯(1),命名为内折香茶菜素(inflexusin);另一个为已知化合物kamebacetal A。

旱生香茶菜素G对S180细胞抗肿瘤活性

目的研究旱生香茶菜素G对S180细胞体内外抗肿瘤活性及其作用机制。方法采用改良噻唑蓝(MTT)法测定旱生香茶菜素G对S180细胞株增殖的影响;以荷S180肉瘤小鼠为模型,检测旱生香茶菜素G对荷瘤小鼠肉瘤质量、体质量及其主要脏器的影响;通过流式细胞术检测旱生香茶菜素G对S180细胞株和S180肉瘤组织细胞周期的影响;采用脾脏淋巴细胞转化实验法测定旱生香茶菜素G对荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖活性;采用酶联免疫吸附试验双抗夹心法检测旱生香茶菜素G对荷瘤小鼠血清中白细胞介素(IL)-2含量的影响。结果旱生香茶菜素G对S180细胞株半数抑制浓度(IC50值)为19.80μg·m L^(-1)。小鼠经腹腔注射旱生香茶菜素G的LD50为121.11 mg·kg^(-1)。在剂量为3,6 mg·kg^(-1)时,对荷S180肉瘤小鼠抑瘤率分别为32.11%,41.60%,差异有统计学意义(P<0.05),小鼠胸腺、肾脏和心脏指数均有一定程度的降低。旱生香茶菜素G使S180细胞株和S180肉瘤组织细胞G0/G1期所占比例增多,对荷瘤小鼠脾脏T、B淋巴细胞具有一定的增殖促进作用(P<0.05)。小、中剂量组血清中IL-2含量分别较对照组减少约90.9%和77.1%(P<0.05)。结论旱生香茶菜素G具有一定的抗肿瘤活性,抑瘤作用可能是通过对肿瘤细胞G0/G1期阻滞,及其促进荷瘤小鼠脾脏T、B淋巴细胞增殖,增强机体免疫功能有关,而与IL-2的表达关系不密切。

内折香茶菜素D抗肿瘤作用的研究

目的:研究内折香茶菜素D(以下简称内折素D)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法:以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA),肉瘤S180,肝癌(HCA),Lewis肺癌为模型,以5_Fu为阳性对照组,以生理盐水为阴性对照组,观察12.5 mg/kg和25 mg/kg内折素D的抗肿瘤作用,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折素D对机体免疫状态的影响。结果:内折素D与阴性对照组相比在体外对ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力,在体内对S180实体型和腹水型肿瘤,HCA实体型和腹水型肿瘤以及Lewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑制作用,与阳性对照组相比,对机体免疫状态无明显影响。结论:内折素D具有较强的抗肿瘤作用,且对机体免疫状态无明显影响。

蜂斗菜素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机制研究

目的:评价蜂斗菜素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用并探讨其作用机制。方法:将60只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组,尼尔雌醇组,蜂斗菜素高(40 mg/kg)、中(20 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量组,每组10只。灌胃给药,每日1次,连续14周。酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)法检测外周血中骨钙素(bone glaprotein,BGP)、降钙素(calcitonin,CT)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)的表达水平,骨密度仪检测腰椎及股骨的骨矿物密度(bone mineral density,BMD),三点弯曲法测定胫骨生物力学指标,免疫印迹(Western blot,WB)检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated extracellularregulated kinase1/2,P-ERK1/2)、磷酸化蛋白38(phosphorylated protein-38,P-P38)、OPG和RANKL蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清中CT与OPG含量均显著降低(P<0.01),而BGP和RANKL水平均显著升高(P<0.01),腰椎和股骨的骨密度BMD值以及胫骨的最大载荷及最大应力均显著降低(P<0.05),P-ERK1/2、P-P38和OPG蛋白表达均显著降低(P<0.01),RANKL蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组相比,蜂斗菜素组CT和OPG水平明显著升高,BGP和RANKL水平明显降低,腰椎和股骨BMD值显著升高,胫骨的最大载荷及最大应力均显著增高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。蜂斗菜素各组P-ERK1/2、P-P38和OPG蛋白表达均呈剂量依赖性升高(P<0.05),同时蜂斗菜素显著抑制RANKL蛋白的表达(P<0.05)。其中以蜂斗菜素高剂量组效果最强。结论:蜂斗菜素对去卵巢大鼠骨质疏松症有显著的治疗作用,其机制可能与其调节MAPKs-OPG-RANKL信号通路有关。

显脉香茶菜素和毛叶香茶菜二萜的抗癌活性半经验MNDO研究

目的解释显脉香茶菜素和毛叶香茶菜二萜的抗癌活性差别。方法用MNDO的计算方法对显脉香茶菜素和毛叶香茶菜二萜的结构进行优化和处理 ,计算结构参数和电子参数。结果计算表明 ,显脉香茶菜素存在一个抗癌活性区 ,此区的活性明显高于毛叶香茶二萜的相应结构区。结论量化计算较好地解释了显脉香茶菜素具有抗癌活性 。

显脉香茶菜素和Jeunicin的电子结构与抗癌活性

用 MNDO方法在 VAX835 0计算机上对显脉香茶菜素和 Jeunicin进行了量子化学计算研究 .给出了分子轨道及其能级、电荷密度、键级 ,并对其电子结构与抗癌活性的关系进行了讨论 .

毛叶香茶菜素的结构订正

Known diterpenoid maoyerabdosin was isolated from the leaves of Rabdosia macrocalyx (Dunn) Hara.Based on elemental analyses and spectra of MS,NMR,COSY and NOESY,the structure of maoyerabdosin was revised as ent 7β 20 epoxy 1α,7α,15α,16α tetrahydro xy kaurene 6α,17 diacetate.

蜂斗菜素抑制人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖作用机制研究

目的:探讨蜂斗菜素(petasin)对人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖抑制作用的机制。方法:采用罗丹明B(SRB)法检测蜂斗菜素对肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察蜂斗菜素对SK-N-SH细胞周期和凋亡的影响;采用Hoechst 33258染色法观察蜂斗菜素对SK-N-SH凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(WesternBlotting)检测蜂斗菜素对SK-N-SH细胞ERK1/2蛋白磷酸化的影响。结果:蜂斗菜素对SK-N-SH,SGC7901,SPC-A-1,SMMC 7721,Ec9706,SK-N-BE(2)和U251细胞有不同程度的抑制作用。蜂斗菜素使SK-N-SH细胞的周期阻滞于G0/G1期,但不诱导其凋亡,且下调ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结论:蜂斗菜素是一种潜在的抗肿瘤天然化合物,其机制为抑制细胞增殖,但不诱导其凋亡。其分子机制可能包括下调ERK1/2蛋白的磷酸化水平。

新香茶菜素的晶体结构和电子结构研究

新香茶菜素是从中草药显脉叶香茶菜中提取出来的一种天然有机二萜化合物．由 Ｘ 射线衍射测定结果可知，其晶体属单斜晶系，空间群为 Ｐ２１ ，α＝ ０ ．６７７６（２） ，ｂ ＝ １ ．４６４０（８） ，ｃ ＝ １ ．１４１２（５）ｎ ｍ ，β＝ ９５ ．７１°（３） ， Ｚ＝ ２ ．晶体结构表明，分子中含有一个α－ 亚甲基环戊基乙酸酯和一个四氢γ－ 吡喃酮结构，这两种结构中与环直接键连的双键部分具有一定的内应力，是反应活性区．由量子化学计算结果可知，该分子的 Ｈ Ｏ Ｍ Ｏ 主要是由α－ 亚甲基环戊基乙酸酯的 Ｃ＝ Ｃ 双键原子所组成， Ｌ Ｕ Ｍ Ｏ 主要是由四氢γ－ 吡喃酮的 Ｃ＝ Ｏ 双键原子所组成， Ｌ Ｕ Ｍ Ｏ 是一个π Ｍ Ｏ．

香茶菜素治疗病毒性疣类皮肤病临床观察

以香茶素治疗疣类皮肤病７１例，注射用水为对照组治疗３５例．经平均２１天治疗，其总有效率分别为９５．７１％及１９．１４％．经统计学处理，治疗组疗效显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）．

蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的研究蜂斗菜素对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及潜在机制。方法以蜂斗菜素0μmol/L为对照,用5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞在24、48和72 h的增殖活性,蛋白质印迹法(Westernblotting)检测SiHa细胞中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cleaved-caspase-9)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)和磷酸化的丝/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;然后用AKT信号通路激活剂IGF-1处理细胞,检测其对蜂斗菜素处理后的SiHa细胞的影响。结果与对照相比,5、15、45μmol/L的蜂斗菜素处理宫颈癌SiHa细胞后,在24、48和72 h细胞OD值均显著降低,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05),细胞中cyclin D1、CDK2、p-PI3K和p-AKT表达量均降低(P<0.05),Cleavedcaspase-3和Cleavedcaspase-9蛋白表达升高,细胞凋亡率升高,G_(0)~G_(1)期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05),说明蜂斗菜素可使SiHa细胞滞留在G_(0)~G_(1)期,抑制AKT信号通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡;AKT信号通路激活剂IGF-1部分逆转了蜂斗菜素对SiHa细胞增殖、凋亡、细胞周期和AKT信号通路的影响。结论蜂斗菜素可能通过AKT信号通路调控宫颈癌细胞增殖、细胞周期和凋亡。蜂斗菜素对宫颈癌具有潜在抑制作用。

芹菜素对高脂高盐所致高血压大鼠降压及心脏保护作用

目的:研究芹菜素对高脂高盐所致高血压大鼠降压及心脏的保护作用。方法:通过高脂高盐饲料加5%盐水连续喂养8周制备高血压模型大鼠,选取60只并按照血压水平随机分为5组:高血压模型组、芹菜素(20、40和80 mg/kg)治疗组和卡托普利(25mg/kg)对照组,每组12只,另取12同龄正常饲养大鼠作为正常对照组;灌胃给药4周,高血压模型组和正常组均给予等体积的生理盐水。给药前及给药治疗4周后测定各组大鼠收缩压(SBP)和舒张压(DBP);治疗4周后,分别测定各组大鼠血清中血管紧张素II(Ang II)水平,心肌增值系数(MPI)及心脏系数(CWI);测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平,测定血清中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果:与高血压模型组比,芹菜素(40和80mg/kg)治疗组大鼠血清中Ang II水平显著降低,SBP均显著降低,芹菜素80mg/kg治疗组DBP显著降低;芹菜素(40和80mg/kg)治疗组大鼠血清中TC、TG含量水平显著降低,AST、CPK、LDH活性显著降低;心肌组织中SOD、CAT活性显著升高、MDA含量显著降低。芹菜素80mg/kg治疗组大鼠MPI和CWI显著降低;血清中LDL-C水平显著降低、HDL-C水平显著升高;心肌组织中GSH-Px活性显著升高。结论:芹菜素降低高脂高盐所致高血压大鼠血压并有保护心脏的作用,其作用机制可能与芹菜素能够有效降低高脂高盐所致高血压大鼠Ang II水平、降低血脂、改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤有关。

银杏酮酯联合芹菜素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨银杏酮酯(ginkgo biloba extract 50,GBE50)联合芹菜素(apigenin)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,选用Sprague-Dawley(SD)大鼠50只随机分为正常组、模型组、银杏酮酯组、芹菜素组、银杏酮酯联合芹菜素组,均按照100 mg/kg灌胃。检测血浆丙二醛(MDA)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(c Tn T)、肌酸激酶(CK)和心脏组织超氧化物歧化酶(SOD)和白介素-6(IL-6)变化。同时,取心脏组织HE染色,观察心肌组织的病理变化。结果:与模型组相比,银杏酮酯组100mg/kg、芹菜素组100mg/kg能降低MDA、CK-MB、c Tn T、CK、IL-6水平和升高SOD水平;与银杏酮酯组100mg/kg、芹菜素组100mg/kg相比,银杏酮酯联合芹菜素组100mg/kg能显著降低MDA、CK-MB、c Tn T、CK、IL-6水平和升高SOD水平;与模型组相比,银杏酮酯组100mg/kg、芹菜素组100mg/kg能减轻心肌组织损伤的病理学变化;与银杏酮酯组100mg/kg、芹菜素组100mg/kg相比,银杏酮酯联合芹菜素组100mg/kg能显著减轻心肌组织损伤的病理学变化。结论:与银杏酮酯100mg/kg、芹菜素100mg/kg相比,银杏酮酯联合芹菜素100mg/kg对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,这可能与提高心脏组织中SOD水平和降低心脏组织中IL-6水平有关。