菸花苷对快速上浮脱险致减压病的预防作用

目的研究菸花苷对快速上浮脱险致减压病大鼠的预防作用和大鼠肺组织炎性反应的影响。方法将157只实验大鼠随机分为常压对照组(n=10)、减压病组(n=30)、菸花苷高剂量组(n=40)、菸花苷中剂量组(n=40)和菸花苷低剂量组(n=37),在实验开始前30 min于尾静脉分别注射0.9%氯化钠溶液和菸花苷注射液,除常压对照组外,其余4组模拟快速上浮脱险进行减压病造模。观察5组大鼠的行为学、死亡率、肺组织湿干比、肺组织病理。常压对照组、减压病组和菸花苷高剂量组各随机选取10只大鼠检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-6、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)的含量和mRNA水平变化。结果与减压病组比较,菸花苷高、中、低3个剂量大鼠死亡率下降(P<0.05),肺水肿程度减轻,高、中剂量组大鼠行为学改善,肺组织病理改变明显好转。与减压病模型组比较,菸花苷高剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6和ICAM-1含量显著降低(P<0.05);菸花苷组TNF-α、IL-6和ICAM-1的mRNA水平明显降低(P<0.05)。结论菸花苷对降低快速上浮脱险导致的大鼠减压病具有预防作用,这种作用可能是通过降低肺组织炎性因子水平,减轻内皮细胞损伤,保护肺组织等作用实现的。

维吾尔药睡莲花中烟花苷的含量测定

目的：对维吾尔药睡莲花进行质量标准研究。方法：采用薄层色谱法对睡莲花进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对睡莲花中的烟花苷进行含量测定。结果：烟花苷的线性范围为0．17-0．85μg，r=0．9999，平均回收率为100．2％，RSD=0．83％。结论：鉴别法专属性强，定量方法简便、准确、快速，重现性好，能有效地控制维吾尔药睡莲花的质量。

HPLC测定维药睡莲花中没食子酸和烟花苷含量

目的：建立维药睡莲花中没食子酸和烟花苷含量的高效液相色谱测定方法。方法色谱柱：Wondasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）；流动相：A为甲醇,B为0.1%冰乙酸混合水溶液,梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm；柱温：30℃。结果没食子酸及烟花苷进样量分别在0.065～0.585μg（r＝0.9991）、0.133～1.197μg（r＝0.9995）范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.71%、102.08%,RSD分别为1.97%、0.46%。结论本方法操作简单、准确可靠,可用于维药睡莲花中烟花苷和没食子酸含量的测定。

HPLC法同时测定金钱草药材中芦丁和烟花苷的含量

目的建立同时测定金钱草(Lysimachia christinae)中芦丁和烟花苷含量的HPLC方法。方法Shiseido CAPCELL PAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:以乙腈A-质量分数0.4%磷酸溶液为流动相B,进行A∶B=35∶65等度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:365 nm,柱温:25℃。结果芦丁和烟花苷的线性分别为8.818×10^(-2)~4.409×10^(-1)μg和4.072×10^(-2)~2.036×10^(-1)μg,相关系数r分别为0.999 7和0.999 6,芦丁平均回收率为100.4%,RSD=1.5%,烟花苷平均回收率为99.8%,RSD=1.3%。各组分基线分离,无其他组分峰影响。结论所用方法专属性好,准确、重复性好,可作为金钱草水提工艺的质量控制的方法之一。

雪白睡莲花中烟花苷的提取工艺研究

对烟花苷的提取工艺进行了研究。以烟花苷含量为评价指标,考察乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数对烟花苷提取率的影响。在单因素试验基础之上,设计四因素三水平正交试验,确定提取睡莲花烟花苷的最佳工艺条件为:乙醇浓度70%,料液比1∶30(g/m L),提取时间0.5 h,提取次数3次。在此工艺条件下,睡莲花中烟花苷的平均含量为(3.213±0.029)mg/g。

睡莲花烟花苷对半乳糖胺致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究睡莲花烟花苷对D-半乳糖胺(D-Gal)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将60只昆明小鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照联苯双酯组,烟花苷(25、50和100 mg/kg)给药组,共6组,每组10只。阳性对照联苯双酯组和烟花苷给药组按10 m L/kg每日灌胃给药1次,正常组和模型组每日灌胃等体积蒸馏水,连续灌胃7 d,末次给药1 h后,正常组小鼠腹腔注射生理盐水0.02 m L/g,其他各组腹腔注射D-Gal(800 mg/kg,按0.02 m L/g)造模。造模8 h后摘眼球取血,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白细胞介素IL-1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)水平。颈椎脱臼处死小鼠,摘取肝脏、脾脏称取质量,计算脏器系数,取0.3 g肝组织制备匀浆,检测肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)及一氧化氮(NO)含量。并取肝左叶距边缘0.5 cm处小块组织,进行肝组织病理学检查。结果:与模型组比较,烟花苷在(50、100 mg/kg)剂量时,小鼠血清ALT和AST水平均显著降低(P均<0.01),血清中促炎因子IL-1、IL-6、TNF-α和INF-γ水平降低(P<0.05);肝脏、脾脏系数降低(P<0.05),肝匀浆中SOD和GSH活力均显著升高(P均<0.05),MDA和NO含量均显著降低(P均<0.05);肝病理检查结果显示与模型组比较,烟花苷各剂量组肝细胞损伤程度明显减轻,炎性细胞浸润显著减少,其中烟花苷50和100 mg/kg组较25 mg/kg组受损程度较轻、修复情况较好。结论:烟花苷对D-Gal致小鼠急性肝损伤具有保护作用,其作用与促进抗氧化酶、抑制促炎因子的表达有关。

菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用

目的:观察菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用。方法:建立双侧椎动脉和双侧颈动脉四动脉夹闭法致大鼠全脑缺血再灌注模型;在全脑缺血前1min尾静脉注射给药;记录大鼠的脑电图及翻正反射恢复时间,检测脑组织含水量、脑血管通透性(伊文思蓝渗透法)以及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果:菸花苷(2.5~10mg/kg)能显著延长全脑缺血再灌注大鼠缺血后脑电图消失时间,明显缩短再灌注后脑电图恢复时间和翻正反射恢复时间(P<0.01),明显改善脑水肿情况(P<0.05),伊文思蓝渗入量降低,脑血管通透性降低(P<0.01),并且菸花苷10mg/kg使缺血/再灌注大鼠脑组织中MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.05)。结论:菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠具有明显保护作用,这些作用可能是通过降低脑血管通透性及抗氧化作用实现的。

烟花苷对刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探究烟花苷对刀豆蛋白A(Con A)致小鼠急性免疫性肝损伤的保护作用。方法选取48只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯阳性对照(150 mg/kg体质量)组和烟花苷低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg体质量)组。烟花苷低、中、高剂量和联苯双酯阳性对照组连续给药10 d,末次给药1 h后,模型组、联苯双酯阳性对照组和烟花苷低、中、高剂量尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)20 mg/kg体质量造模,正常组小鼠尾静脉注射相同体积PBS溶液。造模8 h后采血,处死小鼠,剖腹取肝脏,制备肝匀浆。检测小鼠肝脏血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性;检测肝脏组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量;并通过HE染色观察肝脏组织的病理学变化。结果与模型组比较,烟花苷中、高剂量组小鼠血清AST水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),低、中、高剂量组小鼠血清ALT水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);烟花苷中、高剂量组能降低小鼠血清MDA和NO水平,差异有统计学意义(P<0.05),低、中、高剂量组SOD和GSH水平明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);烟花苷低、中、高剂量组小鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组小鼠血清IFN-γ水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);肝脏病理学检测显示烟花苷能明显减轻Con A对肝脏组织的病理损伤。结论烟花苷对Con A致小鼠急性免疫性肝损伤有明显的保护作用,其机制与其抗氧化、抑制促炎因子的表达密切相关。

烟花苷对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

目的探讨雪白睡莲有效成分烟花苷对H2O2致损伤LO2细胞的保护作用。方法取对数生长期的细胞,分为正常组和烟花苷干预组,对于不同质量浓度的烟花苷培养液,采用H2O2(0.6 mmol/L)体外诱导LO2细胞损伤肝细胞,采用四氮唑(MTT)比色法测定并计算细胞活力。检测细胞上清液中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量,评价烟花苷对肝细胞损伤的保护作用。结果给药24,48,72 h后,烟花苷质量浓度在6.25~100μg/m L范围内对正常人肝细胞LO2无毒性作用,且细胞的存活率大于90%;0.6 mmol/L H2O2可改变LO2细胞的形态结构,并抑制其活性;可提高细胞AST和ALT水平,以及MDA和NO含量,降低SOD活性;睡莲花烟花苷可拮抗H2O2对LO2细胞的损伤,并显著降低H2O2致急性损伤肝细胞的ALT和AST的释放量及MDA和NO的含量(P<0.05),提高SOD活力(P<0.05)。结论雪白睡莲烟花苷对H2O2致LO2细胞损伤有保护作用。

HPLC 法测定睡莲花中烟花苷和紫云英苷的含量

目的：建立睡莲花中烟花苷和紫云英苷的含量测定方法，为该药材质量标准制定提供依据。方法：采用HPLC 法测定，色谱柱：Phenomenex GeminiC18（250mm ×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈－0.2％磷酸水溶液梯度洗脱；流速：1.0mL／min；柱温：30℃；检测波长：350nm。结果：烟花苷和紫云英苷的线性范围分别为2.56～76.80μg （r2＝9999）、2.0～60.0μg （r2＝9999）；平均回收率（n ＝6）分别为100.06％、99.07％。结论：该方法操作简单、重复性好，可用于控制维吾尔药睡莲花的质量。

LC-MS/MS测定大鼠血浆中烟花苷浓度及其药代动力学和生物利用度

目的:采用LC-MS/MS测定大鼠血浆中烟花苷的浓度变化,并计算其生物利用度。方法:通过灌胃和尾静脉注射2种给药方式给予大鼠烟花苷,DAS软件计算烟花苷的药代动力学参数。结果:大鼠经灌胃与尾静脉注射2种方式分别给予烟花苷50、5 mg·kg-1后,测得的主要药代动力学参数如下:灌胃给药组中烟花苷的C max为(309.47±58.38)ng·mL-1,t 1/2为(19.78±11.01)h,AUC 0~24 h为(4214.58±198.24)ng·h-1·mL-1;静脉注射给药组中烟花苷的C max为(63227.46±6993.18)ng·mL-1,t 1/2为(5.17±3.31)h,AUC 0~24 h为(24601.86±3833.42)ng·h-1·mL-1。烟花苷的口服生物利按照《中华人民共和国药典》指导原则计算归一化后的基质效应用度为1.7%。结论:烟花苷的绝对生物利用度较低。

菸花苷对缺血性脑卒中大鼠的长期保护作用

目的探讨菸花苷对缺血性脑卒中大鼠的长期保护作用。方法建立大鼠脑缺血模型,观察菸花苷对于大鼠长期生存率、神经系统功能、体重及脑神经元的影响。结果菸花苷可以显著提高脑缺血大鼠的长期生存率,促进大鼠体重增加,减轻脑组织病理损伤,维持脑神经元形态及神经系统功能。结论菸花苷具有明显的对缺血性脑卒中大鼠的长期保护作用,其作用机制可能与保护脑神经元结构和功能有关。

烟花苷与Cu、Zn金属离子相互作用的理论研究

文章采用Gaussian09,在B3LYP/6-311++g(d,p)的水平上计算了铜、锌离子和烟花苷(5-hydroxyl-4-hydroxy methyl-r-butyrolactone)的相互作用,得到几何结构、紫外光谱图、偶极矩以及电荷分布等数据,并在该水平上计算了它们的结合能.结果表明烟花苷降糖中药分子与金属离子有一定的相互作用,它们之间的相互作用能较大,两种金属离子对分子构型的影响较大,络合体系稳定.

维吾尔药睡莲花基原及质量控制研究

目的通过分析睡莲花样品的基原及特征性成分烟花苷和紫云英苷含量,为睡莲花的基原确认和质量控制提供依据。方法以核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)为主体条形码序列进行基原鉴定。采用HPLC测定烟花苷和紫云英苷含量,Agilent ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为乙腈、B为0.2%磷酸溶液(含1.0%四氢呋喃),梯度洗脱(0~65 min,15%→11%A;65~75 min,11%→25%A;75~80 min,25%→15%A;80~90 min,15%A),流速1.0 mL/min,检测波长350 nm,柱温30℃。结果ITS2序列可将睡莲花与其近源物种很好区分。特征性成分烟花苷和紫云英苷分离度良好,供试品溶液在24 h内稳定;烟花苷回归方程为Y=31.09X-12.142(r=0.9999),紫云英苷回归方程为Y=13.304X-11.25(r=0.9995),均具有良好的线性关系;重复性试验RSD<2.0%;烟花苷和紫云英苷平均回收率分别为99.44%和98.88%。结论DNA条形码可准确鉴定维吾尔药睡莲花的基原,结合特征性成分烟花苷和紫云英苷含量测定,可较全面控制睡莲花的质量。

黄花油点草药材的质量标准研究

目的:建立黄花油点草药材的质量标准。方法:参照2015年版《中国药典》方法对药材样品的性状、显微结构进行鉴别,对其水分、灰分及浸出物进行检查;采用薄层色谱法(TLC)对药材样品中槲皮素、烟花苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定药材样品中葛根素、对羟基苯甲酸、烟花苷、阿魏酸、槲皮素、山柰酚的含量。结果:性状、显微鉴别具有专属性;槲皮素、烟花苷的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;10批药材样品水分含量范围为0.61%～1.89%,总灰分含量范围为6.28%～8.88%,酸不溶性灰分含量范围为0.76%～1.79%,醇溶性浸出物含量范围为1.31%～2.00%,水溶性浸出物含量范围为9.39%～14.27%。葛根素、对羟基苯甲酸、烟花苷、阿魏酸、槲皮素、山柰酚检测进样量线性范围分别为0.031 92～0.111 7μg(r=0.999 6)、0.085 3～0.298 5μg(r=0.999 5)、0.010 76～0.037 66μg(r=0.999 8)、0.070 08～0.245 3μg(r=0.999 8)、0.058 56～0.205 0μg(r=0.999 4)、0.009 860～0.033 88μg(r=0.999 4);定量限分别为1.06、0.47、0.75、1.40、1.20、0.74 ng,检测限分别为0.36、0.12、0.30、0.53、0.60、0.31 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;平均加样回收率分别为101.54%、102.10%、101.46%、103.35%、99.36%、96.85%,RSD分别为1.76%、1.68%、1.56%、1.26%、0.91%、1.96%(n=6);样品含量分别为0.017～0.047、0.042～0.140、0.003 8～0.015 0、0.049～0.180、0.024～0.091、0.003 9～0.011 0 mg/g。结论:所建质量标准可用于黄花油点草的质量控制。

金银花黄酮苷类化学成分研究

目的研究金银花(忍冬Lonicerajaponica的干燥花蕾)的黄酮苷类成分。方法采用溶剂提取法,结合硅胶、ODS、Sephadex LH-20等柱色谱和半制备高效液相法进行分离和纯化,并通过显色及NMR等波谱学方法进行鉴定。结果从金银花中分离到了9个黄酮苷类化合物,分别鉴定为3,5-二羟基-3′-甲氧基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(1)、槲皮素-3-O-葡萄糖苷(2)、3,5,3′-三羟基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(3)、棉花苷(4)、烟花苷(5)、水仙苷(6)、芦丁(7)、槲皮素-5-O-葡萄糖苷(8)、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷(9)。结论化合物1和3为新化合物,分别命名为金银花黄酮F和金银花黄酮E;化合物2、4~6、8、9为首次从该属植物中分离得到。化合物1对人肝癌HuH7细胞的生长具有显著的抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibitory concentration,IC_(50))为(43.4±1.1)μmol/L。

基于HPLC指纹图谱及化学模式识别对比研究曲花紫堇及同属药材

目的建立曲花紫堇Corydalis curviflora的HPLC指纹图谱,并通过所建立的指纹图谱方法对紫堇属其他14种药材进行对比研究。方法HPLC-DAD指纹图谱条件:Agilent ZORBAX Extend C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长289 nm;柱温30℃。结合聚类分析(combine cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least square discriminant analysis,OPLS-DA)区分与其极易混淆的暗绿紫堇。结果首次建立了曲花紫堇HPLC指纹图谱,相似度为0.853~0.996,标定18个共有峰,通过对照品比对指认出新绿原酸、绿原酸、原阿片碱、紫堇灵、乙酰紫堇灵、芦丁、紫云英苷、烟花苷、槲皮素、山柰酚10个共有峰;14种同属药材与曲花紫堇对照指纹图谱相似度在0.078~0.686。通过化学模式识别可区分曲花紫堇和暗绿紫堇,二者有6个差异性标志物。结论建立的指纹图谱方法合理、准确,结合化学计量学方法,能有效地鉴别曲花紫堇及同属药材,寻找不同紫堇质量差异成分,为紫堇属不同药材的质量控制和品质评价提供科学依据和参考。

黄毛耳草总黄酮的提取工艺优化及有效成分的含量测定

目的优化黄毛耳草总黄酮的提取工艺,测定黄毛耳草药材中黄酮类成分芦丁、烟花苷的含量。方法考察乙醇浓度、提取时间、液料比3个因素,采用Box-Behnken响应面法设计黄毛耳草总黄酮提取条件并优化提取工艺。采用HPLC法测定黄毛耳草药材中芦丁、烟花苷的含量,以甲醇-0.5%甲酸溶液为流动相,检测波长为360 nm,流速1.0 mL/min,柱温为30℃。结果黄毛耳草总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇浓度70%、超声时间47 min、液料比12.5∶1,此条件下黄毛耳草总黄酮得率为12.62%,与预测值12.59%差异无统计学意义。黄毛耳草中芦丁的含量为0.74 mg/g,烟花苷的含量为0.058 mg/g。结论利用Box-Behnken响应面设计法优化的黄毛耳草总黄酮提取工艺方法稳定,预测性较好,可为黄毛耳草总黄酮的提取工艺提供参考。建立的高效液相色谱法操作简便、结果准确,可用于同时测定黄毛耳草中芦丁和烟花苷的含量。

HPLC法测定陕西产黄花油点草中烟花苷的含量

目的：建立陕西产黄花油点草中烟花苷含量测定的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo Hypersil GOLD,流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速为1 ml/min,柱温为20℃,检测波长为360 nm。结果：烟花苷的进样量在5.9~35.3μg范围内与其峰面积呈良好线性关系（r=0.999 5）;精密度、重复性、稳定性试验的RSD〈2%;平均加样回收率为98.9%,RSD为1.6%（n=6）。结论：该方法稳定、可行,可用于陕西产黄花油点草水提取物及总黄酮部位中烟花苷的含量测定。

复方天山堇菜颗粒化学对照品的研究

目的:提供复方天山堇菜颗粒研究用的化学对照品。方法:分别对干燥的天山堇菜和睡莲化用70%乙醇提取,提取浓缩液得2个提取物Ⅰ a和Ⅱ b,然后分别用水混悬,先后用乙酸乙酯和正丁醇萃取,浓缩正丁醇液部分,得正丁醇提取物Ⅰ b和Ⅱ b,Ⅰb再经聚酰胺层析.乙醇-水(4:6)洗脱得七叶内酯,Ⅱb再经硅胶和C18柱层析,得到烟花苷。结果:2个化合物的UV、IR、1H—NMR和13C—NMR数据符合文献值。结论:提取得到的七叶内酯和烟花苷作为化学对照品是可行的。