萋-尼染色导致的总挥发性有机物污染及其控制方法

目的建立一种改良抗酸染色冷染方法,用以控制实验室总挥发性有机物(total volatile organic compound,TVOC)污染。方法采用TVOC检测仪定量测定实验室内空气中的苯系物和TVOC污染程度;以卡介苗(bacillecalmette-guerin,BCG)为染色标本,配制含有1%Triton X-100标本稀释液和初染液,建立不用加温助染的抗酸染色冷染法替代传统抗酸染色法。结果传统萋-尼抗酸染色时,室内TVOC污染在12 min时间点即高达1 014 ppb(约1 mg/m^3),成倍超过国家室内卫生标准(GB50325-2010)规定值(500 ppb,即0.5 mg/m^3);同样条件下,用改良冷染法染色期间,室内TVOC量有所增加,但在试验期间最高值为387 ppb,保持在国家室内卫生标准容许限度以下;利用Triton X-100建立的改良抗酸冷染法具有抗酸染色特性,其对抗酸杆菌的可检测度为3×10^(-6)~6×10^(-5)CFU/mL。结论抗酸染色冷染法可用于替代传统萋-尼抗酸染色,从而控制实验室的TVOC污染问题。

荧光定量基因扩增法与萋-尼抗酸染色法检测结核分枝杆菌的比较

目的对荧光定量基因扩增法(FQ-PCR法)和萋-尼抗酸染色法检测结核分枝杆菌的准确性和阳性率进行比较。方法 88例肺结核患者的痰标本,分别用FQ-PCR法和萋-尼抗酸染色法进行检测。对比两种方法的检测结果。结果 FQ-PCR法有55例阳性,检出率为62.5%,萋-尼抗酸染色法检测有20例阳性,检出率为22.7%,明显低于FQ-PCR法。结论在检测结核分枝杆菌的方法中,FQ-PCR法的检出率明显高于萋-尼抗酸染色法的检出率,所以在临床诊疗工作当中,临床医生应该更多选择FQ-PCR法检测结核分枝杆菌,以便在肺结核的早期诊断和早期治疗中发挥更大的作用。

萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比

目的:比较萋-尼氏抗酸染色法(简称Z-N)和金胺O荧光染色法(简称荧光染色)在痰涂片镜检中对结核分枝杆菌的检测效果差异。方法:纳入580份痰标本,挑取相同部位制成两份涂片,分别使用Z-N和荧光染色进行染色镜检,比较两种方法的阳性检出率、阳性分级标准及读片时间上的差异。将涂片后余下的痰标本采用全自动分枝杆菌检测/药敏系统做液体培养。结果:Z-N法阳性检出率为10.8%,荧光染色法为15.3%,两种方法比较差异有统计学意义(P<0.05)。对两种方法每一级别的结果进行χ~2检验,结果表明两种染色方法在各个分级没有统计学差异(P>0.05)。荧光染色法的读片时间要明显短于Z-N。结论:荧光染色阳性检出率略高于Z-N,证明荧光染色法是一种快速、灵敏的检测方法,对肺结核的临床诊断具有重要意义。

萋-尼抗酸染色冷染法与热染法结果比较分析

目的比较萋-尼抗酸染色(简称Z-N染色)冷染法与热染法查找抗酸杆菌的差异,探讨萋-尼抗酸染色冷染法的应用价值。方法选取2017年1~12月衢州市人民医院确诊为肺结核患者的痰标本355份,每份痰标本涂6张涂片。室温下干燥后于5 s内穿过酒精灯火焰上方4次固定。其中冷染法3张涂片滴加含有1% Triton X-100石碳酸复红染液,置室温5 min、15 min、30 min后分别用流水缓慢冲去染色液;再滴加5%盐酸酒精脱色1~3 min,用水缓慢冲洗;最后用碱性美兰复染1 min,用水缓慢冲洗;干燥后,用油镜观察。热染法3张涂片滴加不含1% Triton X-100石碳酸复红染液,然后加热到微微冒热气,分别放置5 min、15 min、30 min后用流水缓慢冲去染色液;其余步骤操作同冷染法。比较两种方法抗酸杆菌的阳性检出率、褪色速度等方面的差异。结果 355份痰标本冷染法5 min、15 min、30 min阳性率分别为29.57%、32.68%、32.68%,平均阳性率为31.64%;355份痰标本热染法5 min、15 min、30 min阳性率分别为32.96%、32.68%和32.96%,平均阳性率为32.87%;经统计,差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法的阳性片褪色速度结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在萋-尼抗酸染色初染液石碳酸复红中加入表面活性剂Triton X-100,能改变分枝杆菌细胞壁的通透性,促进染料进入分枝杆菌的菌体。抗酸杆菌阳性检出率和阳性片的褪色速度与传统的热染法比较,差异均无统计学意义。与传统热染法比较,操作简单并避免了有害气体污染环境,是一种值得推广的方法。

金胺“O”-罗丹明(B)法与萋尼法在抗酸杆菌涂片镜检中的比较

目的比较两种抗酸杆菌染色方法的差异。方法采用金胺“O”-罗丹明(B)(Auramine O Rhodamine B)荧光染色法和萋尼染色法同时对同一病人标本进行检测。结果通过430例病人标本对比实验,荧光染色组77例阳性,其阳性率为17.91%,萋尼染色组43例阳性,其阳性率为10.00%,经统计学处理χ2为29.89,P<0.01,具有显著性差异。结论荧光染色组检出率明显高于萋尼染色组,而且工作效率高,适用于大量样本的检测。

荧光显微术与萋-尼氏染色技术在检查痰抗酸杆菌方面的比较

背景:塞内加尔达喀尔国家结核病参比实验室。目的:比较荧光显微镜和明视野显微镜检查抗酸杆菌的结果。方法:1996年1月至1998年6月期间2630份痰标本被同时制备2种涂片,在1000倍物镜下分别进行萋-尼氏染色和荧光显微术检查,并应用这两种方法同时检查一例标本的68张涂片来确定判断一张涂片为阴性所需的检查时间。结果:诊断和随访检查时两者的符合率分别为96.9％和92.3％。当标本中每100个视野至少10条菌时,两者的检出率相似,但当标本中每100个视野少于10条菌时,荧光显微术的检出率较高。在同倍物镜下,荧光显微术判断一张涂片为阴性所需的检查时间平均为3分34秒,而萋-尼氏染色技术需7分44秒。结论:两者的检查结果非常相似。对于含菌量少的病例,荧光显微镜似比明视野显微镜的检出率更高,而且所需检查时间少一半多。

金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法在肺结核细菌学检验中的准确性

目的:分析金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法在肺结核细菌学检验中的准确性。方法:选取在2018年1月—2022年10月期间预进行肺结核病筛查的痰标本360份,将采集的痰液标本进行镜检涂片,分别采用金胺“O”荧光染色法与萋—尼染色法,以L-J法检测结果为金标准,比较两种染色法检出率,分析两者检验的诊断效能,测定两种染色法检验耗费时间。结果:金胺“O”荧光染色法检测肺结核的敏感度、特异度、准确性、阳性预测值及阴性预测值均高于萋—尼染色法(P<0.05)。金胺“O”荧光染色法对抗酸杆菌阳性检出率高于萋—尼染色法(P<0.05)。金胺“O”荧光染色法检验耗费时间明显短于萋—尼染色法(P<0.05)。结论:与萋—尼染色法相比,金胺“O”荧光染色法可提高肺结核分枝杆菌阳性检出率,操作简单、方便,值得应用。

金胺“O”荧光染色法与萋-尼染色法在肺结核细菌学检验中的应用效果比较

目的:比较金胺“O”荧光染色法与萋-尼染色法在肺结核细菌学检验中的应用效果。方法:选取144例肺结核患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组各72例,两组均取痰液样本行肺结核细菌学检验,对照组采用萋-尼染色法,观察组采用金胺“O”荧光染色法,比较两组结核分枝杆菌阳性检出率和检验时间。结果:观察组阳性检出率为88.9%(64/72),高于对照组的55.6%(40/72),差异有统计学意义(P<0.05);观察组检验所需时间为(31.06±4.51)min,短于对照组的(46.38±5.23)min,差异有统计学意义(t=18.823,P=0.000)。结论:金胺“O”荧光染色法在肺结核细菌学检验中可提高结核分枝杆菌阳性检出率,缩短检验时间,优于萋-尼染色法检验效果。

温度对萋尔-尼尔氏染色镜检找抗酸杆菌方法的影响

目的:了解温度对萋-尼氏抗酸杆菌的方法的影响。方法:选择已知阴阳性涂片结果的100例标本进行涂片,一份标本涂5张痰膜片,分别放置25、40、60、80、100℃下予以干燥,并且阴阳性片子间隔排列,干燥后进行萋-尼氏染色、镜检。结果:25、40、60、100℃干燥的痰膜片阳性率为50%、80℃干燥的痰膜片阳性率为48%,各温度干燥处理的阳性率没有统计学意义(P>0.05)。各温度阳性的分级报告稍不同。各温度阴阳性间隔的阴性片子镜检结果全部与25℃自然干燥镜检结果相符,没有产生标本间交叉污染,也没有产生痰膜脱落的后果。结论:25℃～100℃干燥痰膜片对萋-尼氏染色找抗酸杆菌的方法影响不大,只要控制好干燥的时间可提高工作效率,减轻工作量。

萋-尼氏抗酸和金胺O荧光染色法在结核菌痰涂片检测的对比

对比萋-尼氏抗酸和金胺O荧光染色法在结核菌痰涂片检测中的检测效果。方法:2015年1月-2021年2月,选取本院管理的162名结核病患者(上级结防反馈)痰液标本以及80名健康人群痰液标本,共计242份痰液标本开展研究,所有痰液标本均涂片两张并等分为两份,其中一份为研究1组,应用萋-尼氏抗酸检测法检测,另一份为研究2组,应用金胺O荧光染色法检测。结果:研究2组阳性分级为2+、3+和4+痰液涂片占比与研究1组对比无统计学差异(P>0.05),但研究2组≤1+和阳性率对比均显著高于研究1组,具有统计学差异(P<0.05);研究2组和研究1组特异性对比无统计学差异(P>0.05),但研究2组灵敏度和诊断符合率显著高于研究1组,具有统计学差异(P<0.05);研究2组读片时间短于研究1组,具有统计学差异(P<0.05)。结论:与萋-尼抗酸染色法相比,金胺O荧光染色法在结核杆菌涂片检测中具有更高的阳性检出率,更高的灵敏度,也具有更高的准确率,并且此方法染色操作更加方便,读片时间更短,同时此方法能够配套图像采集系统使用,从而让检测更加便捷,对此在结核菌痰涂片检测时在条件允许情况下有限选用金胺O荧光染色法进行检测。

两种抗酸染色法对麻风分枝杆菌和结核分枝杆菌染色结果分析

目的比较Ziehl-Neelsen加热抗酸染色法和快速抗酸染色法(TAAS)在麻风分枝杆菌和结核分枝杆菌染色的应用结果。方法用加热抗酸染色法和TAAS法同时检测17例现症多菌型(MB)麻风病患者和157例肺结核初诊阳性患者标本,对检测结果进行分析。结果两种染色方法在结核病痰检中符合率为100%;加热法和TAAS法在麻风分枝杆菌中阳性率分别为100%和71.36%,加热法阳性率高于TAAS法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种染色方法在结核病痰检中符合率一致;加热法在麻风分枝杆菌中阳性率高于TAAS法。

免疫磁珠荧光染色法在痰液结核分枝杆菌检测中的应用

目的建立免疫磁珠(immunomagnetic beads,IMB)荧光染色法并评估其在临床痰液标本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)检测的应用价值。方法利用IMB富集纯化结核分枝杆菌,利用自动染色机和自动显微镜智能软件扫描系统进行荧光染色及结果分析,建立结核分枝杆菌IMB荧光染色法。用实验室培养的标准菌株评估该方法的检测灵敏度和特异度。同时选取2021年5月~2022年2月在山东省第二人民医院就诊的145例疑似肺结核患者作为临床研究对象,取每例患者的痰液标本,选用萋-尼氏(Ziehl-Neelsen,Z-N)抗酸染色法、IMB荧光染色法和BACTEC 960系统培养法检测结核分枝杆菌感染情况,比较三种方法的阳性检出率、灵敏度、特异度和准确率,验证IMB荧光染色法在诊断结核分枝杆菌感染中的优势和临床应用价值。结果IMB荧光染色法的最低结核分枝杆菌检测量是30 CFU/ml,在标本含菌量≥30 CFU/ml时,该方法学的敏感度为100%;而在10 CFU/ml时则降到56%,该方法检测的特异度为100%。在利用临床标本检测中,IMB荧光染色法、Z-N抗酸染色法和培养法对于结核分枝杆菌的阳性检出率分别为73.10%,40.69%和78.62%;IMB荧光染色法的阳性率明显高于传统Z-N抗酸染色法的阳性率,差异具有统计学意义(χ^(2)=31.0599,P<0.05);略低于培养法,差异无统计学意义(χ^(2)=1.2052,P>0.05)。IMB荧光染色法在临床标本检测中的灵敏度、特异度和准确率分别为92.98%,100.00%和94.48%,明显高于Z-N抗酸染色法的灵敏度、特异度和准确率(47.37%,83.87%和55.17%),差异具有统计学意义(χ^(2)=56.6647,5.4386,P<0.05;59.4792,均P<0.05)。结论研究建立的IMB荧光染色法优于目前应用的其他染色法,可为结核病早期诊断提供新方法。

荧光染色法与萋-尼氏抗酸染色法检测痰液中抗酸杆菌的对比观察

目的:评价荧光染色法在痰涂片抗酸杆菌镜检中的临床价值。方法:收集330例结核病门诊就诊病人的痰液,用荧光染色法与萋-尼氏抗酸染色法检测痰液中抗酸杆菌,比较两种方法的阳性检出率及阳性分级标准差异。结果:荧光染色法阳性检出率为21.3%,萋-尼氏抗酸染色法阳性检出率为21.6%,结果无统计学意义(P>0.05)。阳性标本量化级别在1-9条/50个视野(荧光染色)和1-8条/300个视野(萋-尼氏抗酸染色)时,其阳性样本百分比分别为2.2%和9.6%,差异有统计学意义(P<0.05);在其他分级标准下,两种方法阳性百分比差异不大(P>0.05)。结论:痰涂片荧光染色法更适合临床推广。

显微镜扫描技术与人工镜检在分枝杆菌检测的效果比较

目的评价显微镜扫描技术与传统人工镜检在分枝杆菌检测中的效果差异。方法选取2021年7月至12月衢州市人民医院就诊的疑似肺结核患者936例,共计痰标本2789份。采用萋-尼(Z-N)抗酸染色,先后进行显微镜扫描系统FS50扫描和人工镜检,以MGIT320快速培养仪的液体培养结果为金标准,比较两种方法的诊断效能及检出时间。结果FS50和人工镜检阳性检出率分别为8.71%、8.28%,两者差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法低阳性级别(实际条数)检出率、平均读片时间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论显微镜扫描系统与人工镜检检测分枝杆菌的阳性检出率相当,均有良好的诊断效能,但阳性分级存在差异。扫描系统自动化程度高,可缩短阅片时间,缓解人工镜检的工作强度,在临床检测分枝杆菌方面应用前景良好。

发光二极管荧光显微镜实验室诊断效果评价

目的评估发光二极管荧光显微镜实验室诊断结核分枝杆菌的能力。方法收集409份痰标本，以固体罗氏培养为金标准，比较发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜在敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及检出时间上的差异，并比较技术人员对几种方法的评价。结果罗氏培养阳性的175份痰标本中，普通光学显微镜法112份为阳性，普通荧光显微镜法121份为阳性，发光二极管荧光显微镜法130份为阳性，敏感性分别为64．0％、69．1％、74．3％；罗氏培养阴性的234份痰标本中，普通光学显微镜法233份为阴性，荧光显微镜法227份为阴性，发光二极管荧光显微镜法227份为阴性，特异性分别为99．6％、97．0％，97．0％。χ^2检验统计结果表明，发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜、普通荧光显微镜检测结果差异显著（P〈0．001）。普通光学显微镜、普通荧光显微镜和发光二极管荧光显微镜读片所用的平均时间分别为186．7秒、75．1秒、72，2秒，发光二极管荧光显微镜与普通光学显微镜在读片时间上显著差异，与普通荧光显微镜差异不明显（P〈0．05）。参与研究的技术员评价发光二极管荧光显微镜较其他两种方法易接受。结论发光二极管荧光显微镜法较普通光学显微镜法及普通荧光显微镜在检查效果及检出时间上存在明显优势，对技术人员的亲和性最好，具有推广使用的价值。

改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的价值

目的探讨改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的应用价值。方法选择2012年8月至2014年8月在武汉市第十一医院门诊确诊的120例活动性肺结核患者,分别采用荧光定量聚合酶链反应法(PCR)、MTB-L抗酸染色法、萋-尼抗酸染色法(Ziehl-Nelsen,Z-N)、改良IK抗酸染色法检测MTB-L的阳性感染率,以荧光定量PCR法作为金标准,评价各种检测方法对MTB-L结核病的诊断价值。结果荧光定量PCR法MTB-L阳性检出率为30.0%(36/120),Z-N法阳性检出率为14.2%(17/120),改良IK抗酸染色法阳性检出率为25.8%(27/120),MTB-L抗酸染色法阳性检出率为28.3%(34/120)。以荧光定量PCR法作为金标准,MTB-L抗酸染色法检测特异度为96.4%,灵敏度为86.1%,准确度为93.3%;与荧光定量PCR法结果比较,Z-N法检测Kappa值为0.509,改良IK抗酸染色法Kappa值为0.731,MTB-L抗酸染色法Kappa值为0.839,MTB-L抗酸染色法与荧光定量PCR法一致性最好。结论 MTB-L抗酸染色法检测MTB-L的特异度、准确度较高,与荧光定量PCR法一致性最好,且操作简单,对MTB-L早期诊断具有重要的参考价值。

一例肉牛副结核分枝杆菌感染的诊断

2018年6月份,齐齐哈尔市某规模肉牛场1头肉牛发生以腹泻为主要症状的疾病,采用抗菌药物消炎治疗后病情好转,但腹泻反复发作,为了对该病例进行确诊,试验通过直肠采集病牛腹泻粪便,采用萋-尼氏染色及PCR方法进行诊断。结果表明:该腹泻病例为副结核分枝杆菌感染引起的牛副结核病。说明该肉牛场已存在牛副结核分枝杆菌,该肉牛场针对该病进行了排查,对检测为副结核分枝杆菌阳性牛进行了隔离、淘汰。

1030例支气管刷检痰片查找抗酸杆菌结果报告

目的：了解1030例支气管刷痰查找抗酸杆菌结果。方法：由临床医务人员制作好刷检痰片用本室自备的萋尼氏染液进行染色并镜检。结果：1030例刷检痰片中39例镜检阳性，占3．79％，其中临床上诊断为肺癌患者无一例阳性；疑似肺癌患者、AIDS患者及肺结核患者阳性率分别为2．23、10．41及4．13％。结论：刷检痰片查找抗酸杆菌对结核病的诊断提供很重要依据，对临床治疗有重要的参考价值。

结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的应用价值。方法选取2018年1月至2021年10月医院收治的105例初诊疑似结核病患者,复诊接受外周血T-SPOT.TB、萋-尼抗酸染色(AFB)、皮肤结核菌素试验(PPD),以穿刺活检诊断结果为金标准,对比分析3种诊断方法在结核病诊断中的临床价值。结果T-SPOT.TB诊断的灵敏度、特异度、准确度均高于AFB与PDD,差异有统计学意义(P<0.05)。结论T-SPOT.TB在结核病(包括肺结核、肺外结核病)诊断中具有较高的灵敏度、特异度、准确度,可显著降低漏诊、误诊风险,对提升结核病诊断的准确率具有重要意义。

2种染色方法查找痰中结核杆菌的比较

目的评价发光二极管荧光染色法(简称LED法)与萋-尼氏抗酸染色法(简称Z-N法)查找痰中结核杆菌的差异。方法对1 168份痰标本分别进行萋-尼氏抗酸染色和荧光染色检测,比较2种方法检查结核杆菌的阳性检出率、读片时间、褪色速度等方面的差异。结果 LED法检测结果与Z-N法检测结果的符合率为99.1%,二者差异无统计学意义(P>0.05),另有11份用Z-N法染色检测为阴性的标本其荧光染色检测为阳性,表明荧光染色检测方法具有更高的灵敏度,LED法的读片时间明显短于Z-N法。结论 LED法具有读片时间短、灵敏度较高、操作步骤简单等特点,在基层痰检室对肺结核患者的发现具有一定优势,适合在临床推广。