四烯甲萘醌(MK-4)对CCl4诱导的急性肝损伤小鼠模型的保护作用分析

目的 探究四烯甲萘醌(MK-4)通过减轻铁死亡对四氯化碳(CCl_(4))诱导的急性肝损伤(ALI)小鼠的保护作用及其机制。方法 选用8周龄成年ICR雄鼠,适应性饲养后,分为Control组、MK-4组、CCl_(4)模型组(6、12、24 h)、MK-4+CCl_(4)组(6、12、24 h),每组6只。Control组腹腔注射同等剂量玉米油;MK-4组腹腔注射40 mg/kg的MK-4溶液,1 h后腹腔注射同等剂量玉米油;MK-4+CCl_(4)组(6、12、24 h)先腹腔注射40 mg/kg的MK-4溶液,1 h后和CCl_(4)模型组(6、12、24 h)同时腹腔注射0.3 mL/kg CCl_(4)溶液,分别在6、12、24 h进行取材。通过HE染色观察小鼠肝脏的病理变化;普鲁士蓝染色检测肝组织中铁聚集;生化仪检测小鼠血清中AST和ALT水平;试剂盒检测肝匀浆中组织铁含量、氧化应激指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平;RT-PCR检测铁死亡标志基因长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、前列腺素内过氧化物酶2(PTGS2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)以及铁代谢相关基因铁调素调节蛋白(HJV)、转铁蛋白受体1(TFR1)和膜转铁蛋白(FPN)的表达,Western Blot检测GPX4的蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 在时效研究中,与Control组相比,CCl_(4)模型组(12、24 h)的肝质量系数和血清ALT、AST水平明显上升(P值均<0.05),且通过HE染色结果也反映出,肝损伤程度随着时间延长逐渐加重。同时,MK-4+CCl_(4)(6、12、24 h)组和CCl_(4)模型组(6、12、24 h)相比时,MK-4+CCl_(4)(12 h)组的肝质量系数和血清ALT、AST水平下降(P值均<0.05),且肝组织的坏死面积减少,因此在后续研究中采用12 h的小鼠各组织样本进行检测。与Control组相比,CCl_(4)组MDA上升,GSH下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05);与CCl_(4)组相比,MK-4+CCl_(4)组MDA下降,GSH上升,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。铁死亡关键指标ASCL4、PTGS2,与Control组相比,CCl_(4)组显著上升,GPX4则显著下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05);MK-4+CCl_(4)组较CCl_(4)组而言,ASCL4、PTGS2的mRNA水平下降,GPX4的mRNA水平上升,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。蛋白质免疫印迹的结果显示,与Control组相比,CCl_(4)组蛋白表达水平下降,MK-4+CCl_(4)组较CCl_(4)组相比,蛋白表达水平上升,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。普鲁士蓝染色结果显示:与Control组相比,CCl_(4)组铁聚集明显上升,MK-4干预后,MK-4+CCl_(4)组较CCl_(4)组铁聚集点下降。同时在对小鼠肝脏铁代谢基因的检测中发现,与Control组相比,CCl_(4)组铁含量显著上升,FPN、HJV的mRNA水平下降,TFR1的mRNA水平上升,差异均有统计学意义(P值均<0.05);进行MK-4进行保护后,铁含量下降,FPN、HJV的mRNA水平上升,TFR1的mRNA水平下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 MK-4提前干预可减轻CCl_(4)诱导的小鼠ALI,其机制可能主要是通过抑制铁死亡并改善了小鼠肝脏铁代谢相关基因的表达。

四种不同产地核桃青皮中萘醌提取工艺优化

以四种不同产地的核桃青皮为研究对象,以乙醇浓度、超声时间、超声温度和料液比为单因素,采用正交试验优化核桃青皮中萘醌类化合物的提取工艺。结果表明,最佳提取条件为40%乙醇,超声时间90 min、超声温度70℃、料液比1∶70(g/mL),各因素对提取率的影响大小为乙醇浓度>料液比>超声波温度>超声波时间。最优条件下,东北核桃青皮提取率最高,达2.85%。该方法可为核桃青皮中萘醌类化合物的提取工艺优化提供理论依据。

新型磺酰基吲哚萘醌类化合物的合成及其光物理性质

醌类化合物是一类具有独特生物活性和光物理性质的重要化合物。以吲哚萘醌和磺酰基肼为底物,经历碘化亚铜/过氧化叔丁醇介导的氧化自由基历程,简单、高效地以22%~67%的收率获得了8种取代的磺酰基醌类化合物(6a~6h),产物结构经过^(1)H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI)表征。初步探究了化合物6a~6h的光物理性质,结果表明:可以通过不同位置的取代基的变换来调节化合物的最大紫外吸收波长和荧光发射强度。

杂多酸催化合成2-甲萘醌的研究

2-甲萘醌可应用于止血剂、饲料添加剂等,用途广泛。本实验以2-甲基萘为原料,30 wt.%过氧化氢水溶液为氧化剂,磷钨杂多酸作为催化剂,冰乙酸为溶剂,合成的2-甲萘醌最高收率为82.3%。考察了催化剂用量、氧化剂用量、反应温度、氧化剂滴加时间和反应时间对产品收率的影响,得到最佳的实验条件;同时对过氧化氢浓度、溶剂用量、重结晶溶剂的种类和用量、搅拌速度等其他影响产品纯度和收率的因素做了说明。红外光谱表征了产品结构。

UV法测定紫草中羟基萘醌总色素含量的不确定度评定及应用

对采用紫外-可见分光光度(UV)法测定紫草中羟基萘醌总色素含量全过程进行分析,建立数学模型,确定影响总色素测定不确定度的因素并对其进行评估。结果表明,总色素含量测定的扩展不确定度为0.06%,测定结果表示为(1.69±0.06)%(k=2),能力验证结果为满意。

白鹤灵芝总萘醌对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的作用研究

为评价白鹤灵芝总萘醌(Rhinacanthins-rich extract from Rhinacanthus nasutus,RRE)的降血脂及保护肝脏作用,采用高脂饲料诱导建立的非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)小鼠模型,通过测定小鼠血清中总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(High Density Lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL-C)及肝脏及谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)的水平,以及肝脏组织进行病理学观察。动物实验结果表明,RRE干预后有效改善了NAFLD小鼠肝脏病理病变进程,缓解炎性损伤,减少肝脏脂肪颗粒堆积;高、中剂量均能显著降低NAFLD小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平(P<0.05),极显著升高HDL-C水平(P<0.01),显著降低NAFLD小鼠血清中AST、ALT、AKP活力(P<0.05或P<0.01);其指标水平均优于熊果酸组;RRE低剂量组可显著降低NAFLD小鼠血清中TG、LDL-C、AST、水平(P<0.05),可降低TC、ALT、AKP水平,但无显著性差异(P>0.05);通过网络药理学对白鹤灵芝与NAFLD疾病相关作用靶点进行交集,结合分子对接技术对RRE的有效活性物质及作用机制进行预测,结果表明白鹤灵芝素-C(rhinacanthin-C)与交集靶点具有良好的结合潜力。研究表明RRE有显著的降血脂、改善脂质沉积和炎性损伤、保护肝脏的作用,其作用机制可能是rhinacanthin-C经由AMPK-SREBP1c-SIRT1信号调节脂质代谢紊乱发挥作用,为壮药白鹤灵芝开发为降血脂、改善脂肪肝的民族药物提供实验依据。

白鹤灵芝总萘醌对非酒精性脂肪肝小鼠及其肠道菌群的影响

目的探讨白鹤灵芝总萘醌对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠的影响及对肠道菌群的相关性研究。方法小鼠随机分为空白组、模型组、白鹤灵芝总萘醌组(300 mg/kg),高脂饲料喂养6周诱导建立NAFLD模型,造模成功后连续灌胃给药6周,取小鼠血清、肝组织和肠内粪便,HE和油红O染色观察肝组织病理学,采用试剂盒检测血清GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、AST、ALT水平,16S rRNA测序法分析小鼠粪便肠道菌群组成结构,并进行相关性分析。结果肝组织病理学观察表明高脂饮食喂饲可诱导NAFLD模型,与模型组比较,白鹤灵芝总萘醌组可有效减轻小鼠肝脏病理病变,减少炎症损伤及脂肪堆积,降低小鼠体质量、肝脏系数、血清GLU、TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平(P<0.01),升高HDL-C水平升高(P<0.01)。与模型组比较,白鹤灵芝总萘醌组小鼠粪便样品Alpha分析Chao、Shannon和Simpson指数升高(P<0.05),肠道微生物组成的丰富度和多样性改变。与空白组比较,模型组拟杆菌门丰度增加,厚壁菌门、变形菌门、弯曲杆菌门丰度降低;与模型组比较,白鹤灵芝总萘醌组拟杆菌门丰度降低,厚壁菌门丰度升高。相关性分析表明,拟杆菌门丰度与TG、GLU水平呈正相关,与HDL-C水平呈负相关;厚壁菌门丰度与HDL-C水平呈正相关,与TG水平呈负相关。结论白鹤灵芝总萘醌有降血脂、改善脂质沉积和保护肝脏的作用,其机制可能是通过改善肠道菌群紊乱,调节肝脏脂质代谢发挥降脂护肝的作用。

2-甲基-1,4-萘醌的合成方法综述

维生素K3作为一类抗出血药物,主要应用于医药及饲料添加剂,具有广阔的市场前景。不同于天然维生素K1和K2,维生素K3需要人工合成,其主体形式是2-甲基-1,4-萘醌或者2-甲基-1,4-萘醌与亚硫酸氢钠的加成物,因此2-甲基-1,4-萘醌的合成方法一直备受关注。本文对2-甲基-1,4-萘醌的合成路线进行综述及初步分析,并展望未来合成工艺的改进方向。

2-羟基-1,4-萘醌衍生物诱导肺癌A549细胞凋亡的机制研究

本文设计合成了一系列2-羟基-1,4-萘醌衍生物,所有化合物均经过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、HRMS进行结构确认,通过细胞增殖实验筛选得到化合物5d对A549细胞表现出较高的抗肿瘤活性,IC_(50)值为4.91μmol·L^(-1),进一步通过细胞周期实验、蛋白质免疫印迹技术、分子对接等方法,研究了化合物5d诱导A549细胞凋亡的机制。结果发现,5d可以破坏线粒体膜功能、升高活性氧水平,并通过下调Akt和p-STAT3蛋白表达水平促进A549细胞的凋亡,具有潜在的药物开发及应用价值。

维生素K2的生物合成及其甲萘醌基团合成酶的功能分析

维生素K2(VK2)作为2-甲基-1,4-萘醌(简称甲萘醌)家族的衍生物,在预防骨质疏松和心血管钙化方面发挥着重要作用,随着其市场需求的日益增加,实现VK2产业化并降低生产成本成为大家关注的焦点。首先概述了VK2传统发酵工艺现状及面临的问题,之后详细分析了VK2生物合成途径及其基因工程改造策略,可以将枯草芽孢杆菌产量提高至1549.6 mg·L^(-1),产量是传统发酵菌株的7倍以上。此外,还围绕合成途径中经典甲萘醌骨架合成酶的功能及其蛋白结构进行汇总分析,通过对酶的蛋白结构、催化特异性和机理进行分析,揭示各个功能酶在VK2合成途径中发挥的作用及其内在关系。最后从合成生物学技术发展角度对VK2途径设计、构建与应用进行了展望,为提升VK2工业化产量提供理论参考。

加味归脾汤联合四烯甲萘醌软胶囊治疗脾胃虚弱型老年性骨质疏松症临床观察

目的观察加味归脾汤联合四烯甲萘醌软胶囊治疗脾胃虚弱型老年性骨质疏松症的疗效。方法将92例脾胃虚弱型老年性骨质疏松症患者随机分为2组,每组46例。对照组予碳酸钙D3片、四烯甲萘醌软胶囊治疗,观察组在此方案上予加味归脾汤治疗。持续治疗6个月,对比2组的临床疗效、骨钙素(BGP)等。结果观察组在临床疗效、降低疼痛视觉模拟(VAS)评分、改善BGP及骨密度水平等方面表现更佳,优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组不良反应情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论运用加味归脾汤联合四烯甲萘醌软胶囊治疗脾胃虚弱型老年性骨质疏松症疗效更佳,能更好地改善患者生活质量,减轻临床症状,改善骨密度及骨钙素水平,有待临床进一步推广。

2-羟基-1,4-萘醌石墨烯复合电极材料的制备及性能

通过非共价功能化策略,以还原氧化石墨烯(rGO)为导电基底,选择可逆电化学活性有机分子2-羟基-1,4-萘醌(HNQ)与rGO发生非共价π-π作用,设计制备了HNQ非共价功能化石墨烯复合电极材料(HNQ-rGO),并研究其实际储能性能.SEM,TEM,FT-IR,XRD和Raman光谱分析结果表明,通过氧化石墨(GO)的还原和rGO上HNQ分子的非共价修饰成功制备了HNQ-rGO.电流密度为1 A·g^(-1)时其比电容为321 F·g^(-1),并且在电流密度为5 A·g^(-1)时充放电循环10000次后,电容保持率仍为初始值的85.7%.另外,以2-羟基蒽醌还原氧化石墨烯(HAQ-rGO)为负极材料,HNQ-rGO为正极材料,设计的非对称超级电容器(HAQ-rGO//HNQ-rGO,ASC)在1.6 V池电压下,其功率密度、能量密度分别为0.8 k W·kg^(-1)和21.8 Wh·kg^(-1),说明该电容器储能性能优异.

新疆紫草中萘醌类成分提取工艺的优选和抗炎研究

通过优化提取工艺提高新疆紫草中萘醌类成分的提取率,并研究其抗炎活性。采用L_(9)(3^(4))正交设计,以左旋紫草素含量作为指标,考察药材的粒径、料液比、提取时间的影响,采用高效液相色谱法测定样品中左旋紫草素含量。以脂多糖诱导细胞炎症和二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型考察提取物的药理作用;采用SYBYL-X软件将左旋紫草素与相关炎症蛋白进行分子对接,以初步探讨其作用机制。优选的提取工艺为:采用最粗粉第1次以1∶8的料液比提取2 h,第2次以1∶6的料液比提取1 h;细胞和动物实验结果显示其具有一定的抗炎作用,且具有剂量依赖性;分子对接结果发现左旋紫草素与环氧化酶-2具有良好的亲和能力,显示其抗炎机制可能与抑制环氧化酶-2活性有关。

七烯甲萘醌合成过程中关键蛋白的定位分析

七烯甲萘醌作为维生素K 2的重要亚型,在细胞中主要存在于细胞膜上,在氧化磷酸化的过程中起到电子载体的作用。作为七烯甲萘醌合成过程中的关键酶,1,4-二羟基-2-萘甲酸异戊二烯基转移酶(1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid prenyltransferase,MenA)和甲基转移酶(methyltransferase,MenH)目前研究较少,其在细胞中的分布还未被研究,这也限制了七烯甲萘醌产量的进一步提高。该研究重点关注MenA和MenH在细胞内的分布问题,首先构建MenA、MenH和eGFP的融合蛋白,利用荧光定位的方法确定MenA和MenH在细胞中的定位。然后,使用表面活性剂Triton-100破坏细胞膜的结构,发现随着表面活性剂浓度的增加,七烯甲萘醌的合成受到明显抑制。该研究表明细胞膜结构的完整性是七烯甲萘醌合成的前提条件,并且揭示了七烯甲萘醌是在细胞膜上直接被合成,不是被转运到细胞膜中。研究结果为深入探索七烯甲萘醌合成机制提供了方向。

重氮萘醌衍生物在光刻胶和药物载体领域的研究进展

重氮萘醌(DNQ)及其衍生物的结构中具有重氮基团和羰基等多个光敏活性官能团,经光照后其重氮基团发生Wolff重排,转化为亲水性茚羧酸。在光刻胶领域,茚羧酸可促进正性光刻胶树脂的分解和溶解性能,有利于提高图案的分辨率;DNQ结构中有非极性的苯环可用于封装疏水性纳米药物,当其发生光敏反应时,通过其结构极性转变,能实现纳米药物的定量、定时和定位输送。本文总结了DNQ及其衍生物在光刻胶和纳米药物控制释放领域的应用和研究进展,介绍了其作为光致产酸剂的作用机理研究;展望了其在化学和生物医疗等领域的应用前景。

紫草总萘醌的提取工艺研究

以紫草为研究对象,采用单因素实验考察了提取温度、料液比、乙醇体积分数对紫草总萘醌提取量的影响;在单因素实验的基础上,采用正交实验优化了紫草总萘醌的加热回流提取工艺。结果表明:在提取时间为2 h、提取温度为90℃、料液比为1∶50(g∶mL)、乙醇体积分数为90%的最优条件下,紫草总萘醌提取量可以达到30.03 mg·g^(-1)。该研究为紫草药用植物资源的开发利用提供了参考。

亚硫酸氢钠甲萘醌合成工艺改进

传统亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB)合成原料2-甲基-1,4-萘醌(2-MNQ)中含有6-甲基-1,4-萘醌(6-MNQ),致使产品含量较低。为提高产品质量,对原料中的6-MNQ进行了分离去除,在正己烷溶剂中和NaHSO_3反应合成MSB。考察了原料配比、反应温度、反应时间等因素对合成MSB的收率和纯度的影响,最佳工艺条件为:n(2-MNQ)与n(NaHSO_3)=1∶1.45,反应温度40℃,反应时间4 h。改进工艺后MSB的收率提高到81%,质量分数大于98%。

由2-羟基-1,4-萘醌合成2-乙氧基-1,4-萘醌

通过加热回流的方法以2-羟基-1,4-萘醌(HNQ)、无水乙醇为主要原料以65%硝酸为催化剂合成了2-乙氧基-1,4-萘醌。通过改变反应时间和催化剂的用量来确定最佳反应条件。采用UV-V is、IR1、H NMR、元素分析、GC-MS等测试技术分析产物。对合成条件进行了优化,得到的产品为黄色粉末状固体,产率为29.60%。实验表明,此合成路线简单易行。

β-甲萘醌合成技术和新进展

综述了 β 甲萘醌 (维生素 K3 )的各种合成技术路线 ,并结合国内原料和 β

工作曲线法测定2-重氮-1-萘醌-5-磺酰氯的含量

采用光度分析的工作曲线准确测定2-重氮-1-萘醌-5-磺酰氯的含量。于丙酮和无水乙醇的混合溶剂中，波长为380nm，该物质在4～30μLg/ml内与吸光度成直线关系。相关系数为0．9999，平均回收率100.24％，相对标准偏差为0.53%。