胡萝卜提取液清除亚硝酸盐的效果研究

本文采用对氨基苯磺酸-盐酸萘乙二胺分光光度法,研究胡萝卜提取液清除亚硝酸盐的效果。以单因素试验和正交试验为基础,研究浸提温度、浸提液用量和反应温度对亚硝酸盐清除率的影响。正交试验表明,胡萝卜提取液清除亚硝酸盐的最佳条件是提取温度为60℃,提取液用量为12 m L,反应温度为60℃。

基于愈创木酚荧光减量准确测定过氧化物酶活性的新方法

利用H2O2/过氧化物酶（POD）/愈创木酚（GA）反应体系的产物（470 nm）吸光度去定量POD活性是目前常用方法之一,但产物不稳定且对比色皿有吸附现象是该反应的主要缺点之一。为了解决此问题,本研究利用GA的荧光特性建立了一种能准确测定POD活性的方法。用辣根过氧化物酶（ HRP）作为测试样品得到了以下优化条件：0.5 mmol/L GA,0.5 mmol/L H2O2,0.05 mol/L PBS缓冲液（pH 6.0）,反应温度20℃,样品耗量20μL；本方法的线性范围为500-60000 U/L（r=0.9993）,RSD≤2.4%（n=11）,检出限为385 U/L。在优化条件下,用白萝卜提取液作为测试样品,用本方法（（9714依132） U/L）与比色法（（9926依352） U/L）和循环催化流动分析法（（9608依456） U/L）进行了对比,结果表明,3种方法相互一致性很好。

基于流动注射光度法的吸光度/留存时间比自动测定过氧化物酶活性方法

本研究给出了流动注射分光光度系统（FI-SP）测定酶活性浓度（Ec）的通用公式Ec=kΔA/Δt;Δt是在酶促反应线性响应区域内试样塞的平均留存时间;ΔA为平均留存时间处对应的吸光度;k=n V/（εv L）,V为样品注入点到流通池入口之间的管路总容积,n为酶底物与产物的反应摩尔比,ε为产物的摩尔吸收系数,v为注入的酶液体积,L为流通池光程;FI-SP系统确定后k为常数。在此基础上,将H2O2/过氧化物酶（POD）/愈创木酚（GA）反应体系导入FI-SP系统,建立了一种无需标准曲线的POD活性快速准确测定的新方法。此方法优化后的条件：载流磷酸盐缓冲液浓度为0.05 mol/L（p H 5.5）,进样体积为40μL,反应盘管长度200 cm,1.5 mmol/L H2O2,3.5 mmol/L GA,0.4 mol/L HCl（清洗液）,检测波长470 nm,产物的摩尔吸光系数为0.0125 L（μmol·cm）。本方法的重现性RSD〈0.38%（n=11）,分析速度为40样/h,测定范围为450~7260 U/L,检出限为89 U/L。在优化条件及60℃下,用本方法测定了多种白萝卜中POD活性,结果与动力学曲线法完全相同。