葛根素PEG-PE纳米胶束的制备及降低红细胞溶血的初步研究

目的采集葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate ehydrogenase deficiency,G6PD)缺陷的动物模型血液,评价葛根素PEG-PE纳米胶束降低红细胞溶血的作用。方法 1%乙酰苯肼皮下注射大鼠制备G6PD缺陷的动物模型,取其红细胞制成混悬液,比较评价葛根素和葛根素PEG-PE纳米胶束的溶血作用、红细胞脆性及红细胞膜流动性。结果葛根素出现了明显的红细胞溶血,且随着浓度变化和孵育时间延长具有增加的趋势,溶血率高达38%,而葛根素PEG-PE纳米胶束未见明显溶血;另外,红细胞脆性实验结果表明,葛根素PEG-PE纳米胶束对红细胞膜的作用非常轻微,H50%为(42.1±1.1)%,显著小于葛根素的该数值(53.1±1.2)%,红细胞膜流动性结果表明,葛根素PEG-PE纳米胶束对红细胞膜的流动性影响非常轻微。结论葛根素PEG-PE纳米胶束良好的血液相容性,为该药物的体内研究和进一步新型药物制剂开发奠定基础。

葛根素PEG-PE纳米胶束的制备及在急性心肌缺血模型小鼠体内的组织分布

目的制备葛根素聚乙二醇衍生化磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)纳米胶束,并研究其在急性心肌缺血模型小鼠体内的组织分布特点。方法采用薄膜水化法制备葛根素PEG-PE纳米胶束,昆明小鼠60只,随机分成2组,每组30只,均尾静脉注射给予葛根素PEG-PE纳米胶束,剂量为20 mg·kg^(-1),给药5 min后,一组设为正常小鼠,另一组小鼠结扎冠脉造成急性心肌缺血模型。分别于给药后30、60、90、120、150和180 min处死部分动物,取心、肝、脾、肺、肾、脑等脏器,测定2组小鼠组织中葛根素的浓度。结果葛根素PEG-PE纳米胶束粒径约为25 nm,Zeta电位约为-3 m V,载药量约为(5.8±1.3)%,包封率约为(78.6±5.7)%;葛根素PEG-PE纳米胶束在正常小鼠脏器中AUC大小顺序为肝>肾>心>脾>肺>脑,而在急性心肌缺血模型小鼠中的AUC大小顺序为肝≈心>肾>肺>脾>脑,经计算模型小鼠心脏中的AUC为正常小鼠心脏中的1.9倍,且存在显著性差异(P<0.05)。结论葛根素PEG-PE纳米胶束具有良好的载药性能,其在心肌梗死早期区域具有较好的心脏靶向性,可以将药物蓄积于缺血心肌,为该药的进一步开发研究提供重要的参考依据。

隐丹参酮PEG-PE纳米胶束的制备、细胞摄取及诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,并进行体外评价、细胞摄取及诱导乳腺癌细胞凋亡研究。方法采用薄膜水化法制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,从体外释药、细胞摄取和细胞凋亡等方面对该药物载体进行系统评价。结果隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径为(16.5±1.1)nm,Zeta电势为-(21.6±0.8)mV,包封率为(85.4±4.9)%,载药量为(5.4±0.3)%。TEM电镜可直观显示隐丹参酮PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球形结构;采用芘测定法表明PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)约为6.1μg·mL^-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物细胞摄取量,细胞外残留量减少;MTT肿瘤细胞毒性试验结果显示,隐丹参酮PEG-PE纳米胶束对乳腺癌MDAMB-231细胞的增殖抑制率明显优于隐丹参酮。隐丹参酮PEG-PE纳米胶束可以明显促进肿瘤细胞凋亡,提高促凋亡Caspase 3活性和促凋亡蛋白Bax的表达,减少抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,这些结果与游离隐丹参酮的结果比较,差异具有统计学意义。结论隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径小,释药缓慢,可很大程度地提高隐丹参酮在肿瘤细胞内的摄取量,增强药物的诱导乳腺癌细胞凋亡作用。

葛根素PEG-PLGA纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗急性心肌缺血的研究

PUE@PEG-PLGA纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优良特点。TEM电镜结果表明PUE@PEG-PLGA纳米胶束呈核壳状圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PLGA纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)大约为4.8 mg·L-1;激光共聚焦试验表明,PEG-PLGA纳米胶束可以增强香豆素-6细胞摄取量,且可聚集在线粒体周围,细胞外药物残留量定量结果也可间接证实,PEG-PLGA纳米胶束可以促进药物的细胞摄取。采用结扎冠状动脉制备急性心肌缺血模型大鼠,再随机分为假手术组,模型组,PUE组和PUE@PEG-PLGA高、中、低剂量组,在结扎后5 min各给药组尾iv给药。监测心电图ST段变化,测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙二醛(MDA)水平,并测量心肌梗死面积。PUE和PUE@PEG-PLGA纳米胶束均能降低升高的ST段,降低血清中CK,LDH,AST,MDA水平,减少心肌梗死面积;其中PUE@PEG-PLGA中、高剂量组的药效明显强于PUE组,低剂量组基本与PUE组等效。PUE@PEG-PLGA纳米胶束很大程度上提高PUE心肌细胞摄取量,增强药物抗急性心肌缺血作用,减少给药剂量。

川芎嗪PEG-PE纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗心肌细胞凋亡研究

目的制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并评价该纳米胶束的细胞摄取和抗心肌细胞凋亡效果。方法采用薄膜水化法制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并进行表征。采用体外释药、细胞摄取和细胞凋亡试验对该载药系统进行评价。结果川芎嗪PEG-PE纳米胶束粒径为(15.8±0.9)nm,Zeta电势为-(20.5±0.4)mV,载药量为(5.7±0.3)%,包封率为(87.2±5.4)%。电镜结果表明川芎嗪PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度约为5.3μg·mL-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物的细胞摄取量,细胞外残留量减少;川芎嗪PEG-PE纳米胶束在10%胎牛血清DMEM培养基稳定性良好,采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞凋亡,Hoechst染色提示凋亡心肌细胞出现了大量形态学改变,而川芎嗪PEG-PE纳米胶束可以明显减少凋亡细胞和促凋亡Caspase-3活性、抑制促凋亡蛋白Bax表达,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,均显著优于川芎嗪(P<0.01)。结论川芎嗪PEG-PE纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优势,可很大程度上提高川芎嗪的心肌细胞摄取量,增强药物的抗心肌细胞凋亡作用。