葛根芩连汤加减联合美沙拉嗪治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎临床效果及其对肠道菌群、免疫功能和炎症水平的调节

目的观察葛根芩连汤加减联合美沙拉嗪治疗大肠湿热型溃疡性结肠炎的临床效果及其对患者肠道菌群、免疫功能和炎症水平的调节作用。方法选择2020年1月—2022年12月在医院消化内科治疗的100例溃疡性结肠炎患者作为研究对象,按照随机数字表法将患者平均分为美沙拉嗪组和葛根芩连组,各组50例,美沙拉嗪组患者单纯口服美沙拉嗪治疗,葛根芩连组患者在美沙拉嗪组基础上联合葛根芩连汤加减治疗。观察两组患者的临床效果和不良反应情况,并比较干预前后血清炎症因子、免疫功能以及肠道菌群变化。结果美沙拉嗪组患者的有效率为80.00%(40/50),葛根芩连组患者的有效率为94.00%(47/50),与美沙拉嗪组比较,葛根芩连组的有效率明显升高(P<0.05)。干预4周后,与美沙拉嗪组比较,葛根芩连组患者的血清白介素(IL)-6、IL-8、γ-干扰素(IFN-γ)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均明显下降(P<0.01);葛根芩连组患者外周血中CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)以及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)水平明显升高,而CD_(8)^(+)水平则明显下降(P<0.01)。且葛根芩连组患者肠道双歧杆菌、乳酸杆菌以及肠球菌水平相较于美沙拉嗪组均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。干预4周后,葛根芩连组患者的IBDQ评分和SF-36评分相较于美沙拉嗪组均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。治疗期间两组患者的主要不良反应有腹胀、消化不良、头晕头痛、乏力、皮疹等,美沙拉嗪组和葛根芩连组的不良反应总发生率分别为10.00%(5/50)、14.00%(7/50),差异无统计学意义(P>0.05)。结论葛根芩连汤加减联合美沙拉嗪能够提高大肠湿热型溃疡性结肠炎患者的临床疗效,抑制血清炎症水平,调节机体免疫功能,其作用机制与调节患者肠道菌群平衡有关。

葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎研究进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性复发性的结肠和直肠的炎症性疾病,其典型表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便和吸收障碍等,属中医“肠澼”“痢疾”“滞下”“泄泻”“脏毒”等范畴。葛根芩连汤出自《伤寒论》,善清胃肠湿热,亦可调和气血,原方由葛根、黄芩、黄连和炙甘草4味中药组成,是治疗UC的经典良方。临床应用方面,主要通过葛根芩连汤加减、联合其他方剂、联合西药、联合灌肠、联合针灸等方式治疗UC患者,其优势体现在改善肠道黏膜屏障功能损伤,减少肠道炎症反应,缓解腹泻、腹痛、脓血便、里急后重、肛门灼热等症状,降低复发率,减少不良反应等,有效提高了UC患者的生活质量。作用机制方面,葛根芩连汤治疗UC主要与调节自身免疫、降低炎性细胞因子、调节T细胞、抗氧化应激、改善肠道菌群失调,调节IL-6/JAK2/STAT3、TLR4/NF-κB、Notch、Nrf2等信号通路有关。葛根芩连汤中单味药有效成分的研究表明,黄芩苷、黄芩多糖、葛根素、小檗碱、甘草酸二铵、甘草次酸等是治疗UC的主要有效成分。文章检索近年来国内外文献,从临床应用研究和实验机制研究两个方面综述葛根芩连汤治疗UC的研究进展,以期为葛根芩连汤治疗UC的遣方用药及后续研究葛根芩连汤治疗UC的作用机制提供参考依据,发挥中医药治疗UC的优势。

葛根芩连汤治疗2 型糖尿病研究进展

2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)是一种以血糖升高为主要特征的慢性代谢紊乱性疾病,严重威胁着人类的健康与生活质量。近年来,由于人们饮食生活习惯的改变,其发病率逐年增长,且呈低龄化趋势。现今,我国已成为糖尿病人口第一大国,深入开展疾病研究迫在眉睫。此病尚无根治手段,西医多采用单靶点药物治疗,虽能暂时控制血糖,但长期应用易致不良反应。中医具有多层面、多靶点、机制互补、减毒增效的优势,为糖尿病的治疗迎来了新突破。T2DM属中医“消渴”范畴,过食肥甘为其主要发病原因,故湿热蕴结逐渐发展为其基本病机。葛根芩连汤源于《伤寒论》,原方主治湿热下利。后世医家基于“异病同治”的原则,应用其治疗T2DM,疗效确切。经文献梳理发现,该方的降糖机制主要与改善胰岛素抵抗、调节糖脂代谢、抗炎、抗氧化、调节肠道菌群等有关。结合T2DM的发病机制,对葛根芩连汤的临床应用、作用机制等方面进行归纳总结,以期为其临床治疗T2DM提供新思路。

葛根芩连汤基于Wnt/β-catenin信号通路对结肠癌模型大鼠肠道菌群作用机制研究

目的基于Wnt/β-catenin信号通路研究葛根芩连汤对结肠癌模型大鼠肠道菌群的作用机制。方法选取SD健康雄性大鼠,随机分为正常组、结肠癌组、吉西他滨组及葛根芩连汤(GQD)低、中、高剂量组,对各组大鼠进行腹泻、便血、大便性状等肠炎症状评分,采用鲎试剂显色基质法测定血清内毒素脂多糖(LPS)水平,采用酶联免疫吸附实验法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)炎性因子水平,通过肠道内容物中微生物的培养检测大肠埃希菌、肠球菌、乳酸杆菌及双歧杆菌数量,采用Shannons法检测肠道内容物菌群的多样性,采用Western blot法检测Wnt/β-catenin通路蛋白相对表达量。结果与正常组相比,结肠癌组、吉西他滨组及GQD低、中、高剂量组大鼠TNF-α、IL-10、IL-6、LPS水平及腹泻、便血、大便性状症状评分升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与结肠癌组相比,GQD低、中、高剂量组大鼠TNF-α、IL-10、IL-6、LPS水平及腹泻、便血、大便性状症状评分依次降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,结肠癌组、吉西他滨组及GQD低、中、高剂量组大鼠大肠埃希菌、肠球菌数量,肠道菌群多样性分析中S值、E值、H值以及Wnt/β-catenin通路蛋白水平升高,乳酸杆菌及双歧杆菌数量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与结肠癌组相比,GQD低、中、高剂量组大鼠肠道内容物菌群的S值、E值、H值均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论葛根芩连汤能有效改善腹泻、便血、大便性状等症状,减轻LPS及炎症反应,降低大肠埃希菌、肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量及肠道菌群数值,并升高Wnt/β-catenin通路蛋白水平,Wnt/β-catenin通路蛋白可有效减轻肠道反应,起到肠道保护作用。

葛根芩连汤内服联合愈疡灌肠方保留灌肠治疗溃疡性结肠炎疗效及对血清LPO与SCD-1表达的影响

目的 探讨葛根芩连汤内服联合愈疡灌肠方保留灌肠治疗溃疡性结肠炎的疗效及对血清脂质过氧化物(Lipid peroxide, LPO)和硬脂酰辅酶A脱氢酶(Stearoyl-CoA desaturase1,SCD-1)表达的影响。方法 选取160例溃疡性结肠炎患者,随机分为对照组与观察组,每组80例,对照组给予美沙拉嗪肠溶片口服治疗,观察组采用葛根芩连汤内服联合愈疡灌肠方保留灌肠治疗,疗程3个月。检测治疗前后血清LPO与SCD-1水平,高敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平,SCD-1用硬脂酰溶血卵磷脂(硬脂酰-LPC)与油酰溶血卵磷脂(油酰-LPC)比值反映,观察药物不良反应发生情况及评价治疗疗效。结果 两组患者治疗前血清LPO与SCD-1比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后清LPO下降,且观察组治疗后水平低于对照组,治疗后血清SCD-1升高,且观察组治疗后水平高于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前血清hs-CRP、TNF-α、IL-6比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后上述指标水平下降,且观察组治疗后水平低于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);不良反应发生率对照组为12.00%(10/80),观察组为18.75%(15/80),比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗疗效整体优于对照组(P<0.05),观察组治疗总有效率为85.00%(68/80)高于对照组(70.00%,56/80),比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 葛根芩连汤内服联合愈疡灌肠方保留灌肠治疗溃疡性结肠炎疗效肯定,可调节血清LPO与SCD-1的表达,抑制肠道炎症反应,加速肠黏膜愈合,且药物不良反应未明显增加,用药安全。

葛根芩连汤治疗糖尿病性胃肠病变研究进展

糖尿病性胃肠病变(diabetic gastrointestinal diseases,DGID)西医治疗是以控制血糖为主,采取对症下药、支持治疗的方法。针对其临床症状治疗效果较快,可以起到明显改善或缓解的作用,但不良反应较大,易出现胃肠道等不良反应且疗效存在个体差异,长期服用会产生对药依赖性,因此停药后病症再现,对胃肠功能紊乱等问题不能起到根本治疗作用。葛根芩连汤善于清利肠胃湿热,不仅可以使患者血糖和血脂降低,而且能够对患者的肠道有益菌群结构起到明显改善作用并且使数量增加,胰岛β细胞稳定性得到控制,血浆黏蛋白明显降低,同时促进整体微循环并调节代谢紊乱,还兼顾病程发展及其预后。现将葛根芩连汤治疗糖尿病性胃肠病变进行综述。

加味葛根芩连汤对重度湿热型溃疡性结肠炎患者免疫功能及肠黏膜屏障功能的影响

目的 分析加味葛根芩连汤对重度湿热型溃疡性结肠炎患者免疫功能及肠黏膜屏障功能的影响。方法 102例2019年1月—2021年2月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的重度湿热型溃疡性结肠炎患者随机分为对照组(51例)和观察组(51例)。对照组采用美沙拉嗪肠溶片、氢化可的松琥珀酸钠进行治疗,观察组在对照组的基础上采用加味葛根芩连汤进行治疗,两组均治疗4周。比较两组治疗4周后临床疗效,统计两组治疗前及治疗4周后中医症状积分、免疫功能、血清炎性因子、氧化应激指标水平及肠黏膜屏障功能。结果 治疗4周后,观察组总有效率为92.16%(47/51),显著高于对照组[76.47%(39/51),P<0.05]。与治疗前比较,治疗4周后两组里急后重、口干苦、发热、乏力、腹胀、腹痛、纳呆、腹泻、脓血便、肛门灼热评分及外周血CD_(8)^(+)水平、血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、丙二醛(MDA)水平降低,观察组低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,治疗4周后两组外周血CD+3、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)水平及血清超氧化物歧化酶(SOD)水平升高,观察组高于对照组(P<0.05)。结论 加味葛根芩连汤可有效改善重度湿热型溃疡性结肠炎患者中医症状、免疫功能及肠黏膜屏障功能,降低机体炎症反应,具有较好的治疗效果。

葛根芩连汤配伍葛根素在兔体内药动学的研究

目的:测定葛根芩连汤煎剂和葛根单煎剂中葛根素于兔血中的含量,分析配伍对其体内过程的影响。方法:采用高效液相色谱法,测定不同时间点兔血浆葛根素的含量,W inNon lin软件计算药动学参数。结果:葛根芩连汤全方及葛根单煎剂中葛根素在兔体内过程均符合二室开放模型,主要药动学参数分别为,AUC(单)=70.66±3.54 m in.μg/m l,AUC(全)=231.87±17.06m in.μg/m l,Tm ax(单)=23.93±0.32m in,Tm ax(全)=27.789±0.078m in,Cm ax(单)=0.29±0.01μg/m l,Cm ax(全)=0.36±0.08μg/m。l结论:葛根芩连汤配伍能提高葛根素的达峰浓度及生物利用度,具有促进葛根素吸收的作用。

葛根芩连加味汤对糖尿病大鼠视网膜病变的防治作用

目的研究葛根芩连加味汤对糖尿病大鼠视网膜病变的防治作用及可能的药理作用。方法实验大鼠随机分为正常对照组、用药糖尿病组和不用药糖尿病3组,分别记录血糖,16周测糖化血红蛋白,观察光镜和电镜下视网膜、视网膜铺片的血管形态及细胞计数。结果两组糖尿病大鼠均在注射佐链尿菌素(STZ)1周后血糖升高。出现了糖尿病的典型症状及白内障,但用药组症状相对较轻。糖尿病大鼠的糖化血红蛋白值比正常组升高,不用药组比用药组升高更显著,差异有统计学意义(P<0·01)。糖尿病组比正常组视网膜血管内皮细胞/周细胞(E/P)值有所上升,不用药组表现较用药组严重,差异有显著性(P<0·01)。电镜观察发现糖尿病不用药组大鼠视网膜血管基底膜增厚、血管闭塞。结论葛根芩连加味汤有改善糖尿病大鼠视网膜早期病变的作用,可能与抑制非酶糖基化终末产物及抑制醛糖还原酶相关。

态靶辨证在2型糖尿病肠道湿热证中的运用——葛根芩连汤加云茯苓、生姜

糖尿病是国际公认最为常见的慢性内科疾病之一,由其所引发的多种急慢性并发症时刻威胁着患病群体的身体健康和生存质量。对于糖尿病的治疗,现代医学主要采取口服、皮下注射药物降糖,效果明确但也不可避免地存在诸多局限。随着中医理论体系的不断完善和现代药理学研究成果的临床回归,中医药降糖之独特优势日益显现。仝小林院士提出“态靶因果”中医处方策略,对糖尿病进行重新分类、分期、分证,将其病程概括为郁、热、虚、损4个阶段,其中肠道湿热证是热阶段最为典型的证候,患者以大便黏稠、舌苔黄腻等为主要表现,治疗上在采用葛根芩连汤调整肠道湿热之偏态的同时,加用云茯苓利湿健脾,生姜辛开苦降,态靶结合,疗效甚佳。

葛根芩连汤化学成分、药理作用及临床应用研究进展

葛根芩连汤源自《伤寒论》,由葛根、黄芩、黄连、甘草4味药材组成,是医圣张仲景治疗表证未解,邪热入里证的经典方剂。目前研究发现,该复方化学成分复杂,包括黄酮类、生物碱类、三萜及其皂苷类、挥发油类、香豆素类、木脂素类、酚酸类等,其中以黄酮类、生物碱类、三萜及其皂苷类为主要药效成分。药理研究证实其具有解热抗菌、抗炎止泻、降糖降脂、解痉等多种功能活性,可广泛用于内、外、妇、儿、皮肤、五官等多科的诸多疾患,对消化、内分泌、循环、神经等多个系统疗效确切。主要对其化学成分、药理作用和临床应用进行系统综述,以期为其深入研发利用提供参考。

小柴胡联合葛根芩连汤加减对2型糖尿病临床预后及胰岛功能的影响分析

目的探讨小柴胡联合葛根芩连汤加减对2型糖尿病患者临床预后及胰岛功能的影响。方法将2017年6月-2019年6月收入医院的156例2型糖尿病患者,随机分为两组,对照组78例,治疗组78例。对照组采用二甲双胍进行治疗,治疗组在对照组的基础上应用小柴胡联合葛根芩连汤加减,持续治疗8周。在经两组治疗之后,比较两组患者在治疗后的临床效果、胰岛功能的相关指标、各种血糖指标水平、中医症候的评分和治疗相关的不良反应发生情况。结果对照组总有效率为78.21%(61/78),治疗组总有效率为91.02%(71/78),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较治疗前降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05),胰岛素分泌指数(HOMA-IS)较治疗前升高(P<0.05),且治疗组高于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2hPG)均显著下降(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);中医症候评分均低于治疗前(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);两组患者均未出现严重不良反应。结论小柴胡联合葛根芩连汤加减治疗2型糖尿病疗效显著,能够改善患者胰岛功能,控制患者血糖水平,安全有效,值得临床推广应用。

葛根芩连汤联合固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎的疗效及对血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平影响

目的探讨葛根芩连汤联合固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎的疗效及对血清白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平影响。方法选取来医院接受治疗的96例溃疡性结肠炎患者,随机分为两组各48例。对照组患者给予固肠止泻丸,试验组在对照组基础上给予葛根芩连汤,两组患者均持续治疗4周。对比两组患者的临床疗效、腹痛、腹泻、脓血便等症状好转时间及临床症状评分、DAI评分和Baron内镜评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及免疫功能指标水平变化。结果治疗后,试验组总有效率较高(P<0.05);试验组患者腹痛、腹泻、脓血便等症状好转时间显著低于对照组(P<0.05);两组患者治疗前临床症状评分差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后腹痛、腹泻、脓血便等症状评分显著降低(P<0.05);并且试验组降低较多(P<0.05);两组患者治疗前DAI评分和Baron内镜评分差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者DAI评分和Baron内镜评分显著降低(P<0.05);并且试验组降低较多(P<0.05);两组患者治疗前血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05);两组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05);并且试验组降低较明显(P<0.05);两组患者治疗前外周血CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)和NK细胞水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组患者外周血CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)和NK细胞水平显著升高(P<0.05);并且试验组升高较明显(P<0.05)。结论采用葛根芩连汤联合固肠止泻丸治疗溃疡性结肠炎具有较好的治疗效果,能够降低血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,值得在临床上推广应用。

葛根芩连汤加味结合针刺治疗急性胃肠炎疗效及对便轮状病毒转阴情况、炎症因子的变化

目的对葛根芩连汤加味结合针刺对急性胃肠炎患者的疗效及患者便轮状病毒转阴情况、炎症因子的变化进行探讨。方法收集医院在2017年6月—2019年12月期间收治的急性胃肠炎患者136例为研究对象,依据治疗方法的不同分为研究组与对照组。其中对照组68例采用常规的治疗方法,研究组68例则在对照组基础上采用葛根芩连汤加味结合针刺的治疗方法,对两组患者治疗后临床疗效进行比较分析。结果经过治疗后,研究组总有效率、粪便镜检白细胞复常率[分别为92.65%(63/68),100.00%(68/68)]均高于对照组[分别为80.88%(55/68),94.12%(64/68)],差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗3、5 d时便轮状病毒转阴率分别为83.82%(57/68),100.00%(68/68),对照组分别为70.59%(48/68),88.23%(60/68)。研究组治疗3 d、5 d时便轮状病毒转阴率高于对照组(P<0.05)。两组治疗前内毒素、超敏-C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-2(IL-2)水平组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗后IL-2水平高于对照组,内毒素、hs-CRP、PCT水平低于对照组(P<0.05)。结论葛根芩连汤加味结合针刺治疗急性胃肠炎可减轻机体炎症反应,提高便轮状病毒转阴率和粪便镜检白细胞复常率,且安全性高。

葛根芩连汤对肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗伴缺氧大鼠肾组织HIF-2α、EPO及GILUT4表达的影响

目的:研究葛根芩连汤对肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗伴缺氧大鼠肾组织缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、促红细胞生成素(EPO)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响。方法:SD大鼠72只随机分为正常对照组、高脂造模组。高脂造模组以高脂饲料喂养13 w,建立肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗伴缺氧模型。将造模成功大鼠随机分为模型对照组、罗格列酮5 mg/kg组、葛根芩连汤1.65、14.85 g/kg组,连续给药16 w,1次/d,记录体质量、体长、lee’s指数;放射免疫法检测空腹胰岛素水平(FINS);全自动生化分析仪检测空腹血糖(FBG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)含量;ELISA法检测HIF-2α、EPO含量;HE染色观察肾组织形态改变;实时荧光定量PCR和Western blot法检测肾脏组织Hif2a、Epo、Glut4 mRNA及蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量、lee’s指数显著增加(P<0.01),空腹血糖(FBG)、胰岛素水平(FINS)显著升高、胰岛素抵抗指数(HOMAIR)显著增加(P<0.01),肾脏组织Hif2a、Epo mRNA及蛋白表达明显上调、Glut4 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,葛根芩连汤1.65、14.85 g/kg组大鼠体质量、lee’s指数明显降低(P<0.05),FBG、FINS、HOMA-IR水平明显降低(P<0.05或P<0.01),肾脏组织Hif2a、Epo mRNA及蛋白表达明显下调、Glut4 mRNA及蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:葛根芩连汤可降低肥胖2型糖尿病前期胰岛素抵抗伴缺氧模型大鼠HIF-2α、EPO的表达,上调GLUT4表达,明显改善模型大鼠胰岛素抵抗及肾脏缺氧,延缓糖尿病肾病的发生发展。

高效液相色谱法同时测定葛根芩连汤煮散及汤剂中6种指标性成分的含量

目的测定葛根芩连汤煮散与汤剂中6种指标性成分的含量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定葛根芩连汤煮散和汤剂中葛根素、大豆苷、黄连碱、黄芩苷、盐酸小檗碱和汉黄芩苷的含量,色谱柱为Phenomenex Gemini C18(250.0 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸(B)溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果葛根素、大豆苷、黄连碱、黄芩苷、盐酸小檗碱和汉黄芩苷在各自的线性范围内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性均符合试验要求,平均加样回收率分别为99.03%,97.98%,98.77%,99.03%,99.02%,98.71%,RSD分别为0.13%,0.90%,0.94%,0.19%,0.24%,0.28%,且煮散中各指标性成分含量均高于汤剂。结论本研究建立的含量测定方法简便、稳定、可行,可为煮散的质量控制、制备工艺及质量标准的制定提供参考。

葛根芩连汤对2型糖尿病模型大鼠胰岛细胞IRS-2/PI3K-Akt通路的影响

目的探讨葛根芩连汤保护2型糖尿病大鼠胰岛细胞的可能作用机制。方法 24只雄性ZDF(fa/fa)大鼠给予高脂饲料诱导2型糖尿病模型,造模成功后随机分为葛根芩连汤组、二甲双胍组、模型组,每组8只。8只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常组。模型组、正常组给予生理盐水10 ml/kg灌胃,葛根芩连汤组给予葛根芩连汤13.8g/kg灌胃,二甲双胍组给予盐酸二甲双胍肠溶片300 mg/kg灌胃。给药8周后检测空腹血糖(FPG),采用蛋白免疫印迹法检测胰腺胰岛素受体底物2(IRS-2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)p85、蛋白激酶B(Akt2)、磷酸化胰岛素受体底物2(p-IRS2)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(pPI3K)p85、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt2)的蛋白表达。实时荧光定量PCR法检测胰腺IRS-2、PI3K p85与Akt2 mRNA表达。ELISA法测定空腹胰岛素(FINS)含量,免疫抑制比浊法测定糖化血红蛋白(Hb A1c)的百分含量。结果与模型组比较,葛根芩连汤组FPG、FINS水平及Hb A1c下降,IRS-2、PI3K p85、Akt2、p-IRS2、p-PI3K p85、p-Akt2蛋白表达上升,IRS-2、PI3K p85和Akt2 mRNA表达上升(P<0.05或P<0.01)。结论葛根芩连汤可能是通过提高IRS-2/PI3K-Akt信号转导通路的活性起到保护胰岛β细胞的作用。

基于网络药理学和生物信息学探讨葛根芩连方治疗非酒精性脂肪性肝病的作用机制

目的基于网络药理学及生物信息学探讨葛根芩连方治疗非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。方法首先从GEO数据库中下载NAFLD的GSE89632和GSE63067的微阵列数据集,通过数据清洗后及以识别健康个体和NASH患者样本之间的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其次在GeneCards数据库中下载NAFLD蛋白质编码的表型基因。利用TCMSP数据库和相关文献筛选葛根芩连方主要活性成分及靶点,通过Uniprot蛋白平台匹配靶点对应的靶基因,然后将数据库数据集及GeneCards差异表达基因与葛根芩连方有效活性成分靶点进行交集,绘制韦恩图,上传至STRING平台,进行蛋白质互作分析(protein-protein interaction,PPI),通过Cytoscape不同算法挖掘核心基因,并通过Cytoscape 3.9.1软件构建核心基因蛋白互作网络及“葛根芩连方—活性成分—交集靶点基因”网络图;并对交集靶点基因进行免疫浸润、免疫细胞差异分析及核心基因免疫细胞差异性分析。利用R软件对靶点进行基因功能(gene ontology,GO)富集与通路(kyoto encydopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。并通过TargetScan数据库预测调控核心基因的上游miRNA,利用AutoDock软件进行小分子药物配体与miRNA受体的分子对接,利用Pymol进行可视化处理。结果GEO等数据库筛选差异表达基因8467个,葛根芩连方有效活性成分146个,药物活性成分靶点基因与数据库差异表达基因交集47个,核心基因10个,趋化因子-2(chemokines-2,CCL2)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等10个基因被鉴定为NAFLD有前途的诊断生物标志物。GO富集分析涉及对氧化应激、脂质代谢、泛素蛋白连接酶结合、细胞坏死及凋亡、miRNA转录调控等的反应,KEGG富集分析在磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、非酒精性脂肪性肝病、核因子激活的B细胞的K-轻链增强子通路、肿瘤抑制因子信号通路。药物与疾病靶点交集基因免疫浸润分析得到活化树突状细胞,自然杀伤T细胞,自然杀伤细胞,滤泡辅助性T细胞(follicularhelper T cell,Tfh),辅助性T细胞2(T help 2 cell,Th2),细胞毒性T细胞(cytotoxic T cell,CD8+T)是浸润NAFLD的主要免疫细胞,免疫细胞差异分析及核心基因免疫相关性分析,得到Tfh细胞、树突状细胞与Th2等与RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、信号转导与转录激活因子等核心基因的相关性较高。通过分子对接方法验证汉黄芩素、山柰酚、槲皮素等8个药物有效成分与调控核心基因的miRNA分子对接结合能力强。结论研究确定了10个核心基因及miRNA作为诊断NAFLD的潜在生物标志物。通过分子对接验证,提示药物小分子与miRNA结合能力强,因此miRNA可能是影响NAFLD发展的潜在调控途径。葛根芩连方药物有效活性成分通过调控miRNA影响核心靶点的转录为治疗NAFLD的分子机制提供新线索。同时免疫细胞Tfh细胞、树突状细胞与Th2等可能与核心基因协同影响NAFLD疾病的进程。

葛根芩连汤与其有效部位群对代谢综合征大鼠作用的比较

目的:比较葛根芩连汤与其有效部位群对实验性代谢综合征(MS)作用的差异。方法:10%果糖水喂饲建立大鼠MS模型、通过检测血清胰岛素(INS)浓度、葡萄糖输注率、血糖、内脏脂肪、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、和游离脂肪酸(FFA),比较葛根芩连汤与其有效部位群作用的差异。结果:10%果糖水喂饲6周后,模型组大鼠体重显著增加;葛根芩连汤有效部位群高、中、低剂量显著提高模型组大鼠葡萄糖耐量(P<0.05),降低血糖(P<0.05);中、低剂量降低INS(P<0.01)、FFA(P<0.05)水平,中高剂量提高HDL-C(P<0.01)、总胆固醇(P<0.05)水平;低剂量组显著降低TG(P<0.05)水平;中剂量组显著降低体重(P<0.05);高剂量组显著降低LDL-C(P<0.01)水平。葛根芩连汤组降低FFA浓度(P<0.05)。葛根芩连有效部位群高、中、低剂量组及葛根芩连汤组提高模型大鼠葡萄糖输注率(P<0.05),降低腹腔内脂肪重量与体重比值降低腹腔内脂肪重量与体重比值(P<0.05)。结论:葛根芩连汤与其有效部位群均能改善MS,但后者作用优于前者。

基于代谢物组学的葛根芩连汤对STZ诱导糖尿病大鼠量效关系研究

目的：采用代谢物组整体效应,考察不同剂量葛根芩连汤对链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型大鼠治疗作用的量效关系。方法：血浆预处理以后,UHPLC/Q-TOF采集血浆样品数据,建立数据矩阵,使用PCA等化学计量学的方法分析数据矩阵,提取能够反映病症与疗效的代谢物组,考察代谢物组随剂量的变化趋势,以代谢物组的葛根芩连汤整方的量效关系。结果：在主成分得分图中,剂量组随着剂量的增大,其样本点逐渐远离模型组向空白组回归;以剂量组主成分得分值拟合量效曲线图,得到S型曲线;量效参数为：量效关系剂量范围[D]0.2-[D]0.8=9.41-11.8g/kg,中位剂量：[D]0.5=10.55 g/kg,阈剂量：[D]0.2=9.41g/kg。结论：代谢物组可作为中药复方整体效应评价指标,为研究中药复方量效关系提供一种新的思路。