葛根配方颗粒对小鼠前列腺增生的影响

目的:探讨葛根配方颗粒抑制小鼠前列腺增生的作用机制。方法:将60只4周龄的雄性昆明种小鼠随机分为6组:葛根颗粒10,20,30 mg/kg组、对照组(保列治组)1 mg/kg、造模组及正常组。将除正常组外的小鼠手术去势7 d后,给予丙酸睾酮5 mg(/kg·d)皮下注射,同时分别给予不同剂量的葛根配方颗粒、保列治灌胃3周。后摘取各组小鼠前列腺,称重并计算前列腺指数(PI),免疫组化检测前列腺组织FGF2,Ki67,TGF-β1蛋白的表达,免疫酶联吸附试验(ELISA)检测5-还原酶活性,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况。结果:与造模组比较,各给药组小鼠前列腺质量、PI均显著减小(P<0.05),FGF2,Ki67,TGF-β1抗原表达、5-还原酶活性均显著降低(P<0.05),细胞凋亡指数显著增高(P<0.05);而各项指标在葛根20,30 mg/kg组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:葛根配方颗粒对小鼠前列腺增生有明显抑制作用,其可能的机制是抑制FGF2,Ki67,TGF-β1抗原表达,降低5-还原酶活性,增加细胞凋亡,从而机制鼠前列腺增生。

高效液相色谱法测定葛根配方颗粒中葛根素的含量

目的:采用高效液相法测定葛根配方颗粒中葛根素的含量。方法:以C18化学键合硅胶为固定相,以甲醇∶水(25∶75)为流动相,检测波长250 nm进行测定。结果:平均加样回收率葛根素为99.4%,RSD=0.49(n=9)。葛根素在1.98～24.80μg范围内,进样量与峰面积值呈良好的线性关系。结论:方法简便、快速,结果准确。

丹参葛根配方颗粒治疗糖尿病周围神经病变临床观察

目的:观察丹参葛根配方颗粒治疗糖尿病周围神经病变(DPN)血瘀阻络证的临床疗效。方法:70例DPN患者随机分为两组各35例,在原降糖治疗基础上,治疗组给予丹参葛根配方颗粒,对照组口服弥可保。疗程2个月。观察两组治疗前后临床症状及神经传导速度的变化。结果:治疗组总有效率91.4%,对照组总有效率65.7%,两组比较有显著性差异(P<0.05)。两组治疗后神经传导速度均改善显著(P<0.05),且治疗组改善优于对照组(P<0.05)。结论:丹参葛根配方颗粒治疗糖尿病周围神经病变疗效满意,具有进一步的推广和良好的应用前景。

基于特征图谱对葛根配方颗粒过程控制的质量分析

[目的]通过特征图谱分析葛根饮片、标准汤剂、配方颗粒之间的相关性,以实现葛根配方颗粒过程控制的质量分析。[方法]采用UPLC建立特征图谱,测定葛根饮片、标准汤剂、配方颗粒中葛根素含量,同时以UPLC特征图谱为对照,建立三者特征峰共有模式,进行相关性评价。[结果] 24批葛根饮片、标准汤剂、配方颗粒中葛根素平均含量分别为5.8%、10.3%、7.8%,其特征图谱中均呈现8个共有特征峰,特征图谱相似度均大于0.90,表明这三者之间的物质成分一致。[结论]经方法学考察,建立的特征图谱方法稳定、含量测定准确度高,既可用于对葛根配方颗粒和葛根临床汤剂一致性评价,又可对葛根配方颗粒过程控制质量分析提供依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析葛根配方颗粒的化学成分

目的:建立一种快速识别葛根配方颗粒中化学成分的检测方法,明确葛根配方颗粒的物质基础。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)在正、负离子模式下对葛根配方颗粒提取液进行检测,检测条件为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~4 min,5%~10%B;4~10 min,10%~15%B;10~20 min,15%~16%B;20~27 min,16%~31%B;27~33 min,31%~59%B;33~42 min,59%~95%B;42~42.1 min,95%~5%B;42.1~45 min,5%B),流速0.35 mL·min^(-1),柱温40°C,进样量5μL,选择电喷雾离子源(ESI)。利用PeakView 1.2软件和PubChem、ChemicalBook、ChemSpider等数据库,对比对照品图谱并结合文献信息,对葛根配方颗粒中的化学成分进行全面分析。结果:从葛根配方颗粒中共鉴定出128个化合物。包括黄酮类化合物60个,有机酸类化合物26个,糖苷类化合物7个,香豆素类化合物6个,核苷类类化合物3个,其他类化合物26个。通过重点分析黄酮类、有机酸类、糖苷类、香豆素类、核苷类等化合物的裂解规律,从葛根配方颗粒中鉴定出了12个在葛根种属中尚未报道的化合物。结论:建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS分析技术能系统、快速地对葛根配方颗粒中的化学成分进行识别,明确了葛根配方颗粒的物质组成以黄酮类和有机酸类化合物为主,为葛根配方颗粒的物质基础、作用机制和临床应用研究奠定基础。

葛根芩连配方颗粒标志性成分含量分析及指纹图谱研究

采用反相高效液栩色谱法-二极管阵列检测器，以甲醇-水（内含1％三乙胺、1％乙酸，用磷酸调pH至3）为流动相，对中药复方制剂葛根芩连配方颗粒中3种主要标志性成分的含量同时分析测定，并采用相同的流动相对其指纹图谱进行研究。实验结果显示，3种主要标志性成分葛根素、黄芩苷和小檗碱在含量分析测定条件下，各组分分离良好，相关系数均为0．9999，线性范围分别为0．042～1．05、0．13～3．25和0．060～1．50μg，加样回收率在95％～106％之间；在指纹图谱研究中，以黄芩苷为参照物峰，标定了32个共有峰，分析的11批葛根芩连配方颗粒与共有模式之间具有良好的相似性，相似度均在0．9以上。建立的含量测定及指纹图谱分析方法灵敏度高、专属性强，可用于葛根芩连配方颗粒的质量控制。

不同提取方法制备的葛根芩连配方颗粒抑菌药效研究

目的比较不同提取方法制备的葛根芩连配方颗粒的体外抑菌药效作用。方法采用平皿法对葛根芩连配方颗粒进行体外抗菌实验研究。用两种不同提取方法制备的葛根芩连配方颗粒,一种方法是四味中药材合煎;另一种是黄连单煎,余三味合煎。结果葛根芩连配方颗粒对绿脓杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌均有不同程度的抑制作用,对大肠杆菌抑制作用较弱。葛根芩连配方颗粒分煎剂对以上4种菌株的最低抑菌质量浓度分别为0.250 00g/mL、0.062 50 g/mL、0.031 25 g/mL、0.015 63 g/mL,葛根芩连合煎剂的最低抑菌质量浓度分别为0.500 00 g/mL、0.125 00 g/mL、0.250 00 g/mL、0.015 63 g/mL。结论葛根芩连配方颗粒分煎剂抑菌作用强于合煎剂。

葛根芩连汤配方颗粒联合基础治疗对2型糖尿病气阴两虚证患者糖代谢指标和胰岛功能的影响

目的:探讨葛根芩连汤配方颗粒联合基础治疗对2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)气阴两虚证患者糖代谢指标和胰岛功能的影响。方法:选取唐山市中医医院2017年5月-2018年5月就诊的T2DM气阴两虚型患者160例,随机分为对照组和实验组,每组80人。在服用二甲双胍的基础上,对照组给予葛根芩连汤传统中药汤剂,实验组给予葛根芩连汤配方颗粒治疗,两个月为一个疗程。检测治疗前和疗程结束后实验组和对照组空腹血糖(Glucose,GLU)、餐后2h血糖(Postprandial 2h Blood Glucose,2hGLU)、糖化红蛋白(HbA1c)、胰岛素分泌指数(Insulin Secretion Index,HOMA-IS)、空腹胰岛素(Fasting Insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(Insulin Resistance Index,HOMA-IR)、血清一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、血清白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和C反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP)指标的改变。结果:葛根芩连配方颗粒中8种主要有效成分高于传统汤剂,且差异具有显著统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组总有效率分别为91.25%、75.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,实验组和对照组GLU、2hPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、CRP、ET-1、IL-6比较差异无统计学意义。治疗后,两组前述各项指标均降低,且实验组降低水平大于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组HOMA-IS、NO指标在治疗前无统计学差异(P>0.05),治疗后两组HOMA-IS、NO值升高,且实验组升高水平大于对照组(P<0.05)。结论:葛根芩连配方颗粒比传统汤剂有效成分含量更高,降糖效果显著,同时可以改善胰岛功能。

HPLC法同时测定葛根配方颗粒中9种异黄酮类成分的含量

建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定葛根配方颗粒中9种异黄酮类成分,包括3-羟基葛根素、葛根素、3-甲氧基葛根素、葛根素-6"-O-木糖苷、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、染料木苷、刺芒柄花苷、大豆苷元的含量,为其多成分质量控制提供依据。方法 采用HPLC法,色谱柱采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150 mm, 5 μm),以乙腈(A) - 0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速:1.00 mL·min-1,柱温:30℃,检测波长:250 nm,进样量:10 μL。结果 9种异黄酮类成分建立的标准曲线在检测范围内均呈良好线性关系(r>0.999 2),平均回收率为97.39%~102.32%,RSD值为1.02%~2.5%,日内精密度RSD值为0.37%~1.53%,日间精密度RSD值为0.43%~2.31%,稳定性RSD值为1.01%~2.23%,重复性RSD值为1.27%~2.29%。采用该方法测定了3批不同来源的葛根配方颗粒中9种异黄酮成分的含量。结论 本文建立葛根配方颗粒中9种异黄酮类成分同时定量的方法,快速、准确,可为葛根配方颗粒的多成分质量控制提供实验依据。

葛根芩连汤配方颗粒与传统汤剂治疗2型糖尿病疗效比较

目的:探讨葛根芩连汤配方颗粒与传统汤剂治疗2型糖尿病的疗效.方法:选取2017年3月~2018年3月我院2型糖尿病患者100例(实施奇偶数法分组模式),对照组的50例进行葛根芩连汤治疗,观察组的50例进行葛根芩连汤配方颗粒治疗.结果:观察组总有效率(94.00%)、HOMA-IR(1.52±0.62)、GA(27.96±2.53)%、HbAIc(6.74±0.51)%、FINS(14.89±1.52)mIU/L、FPG(5.19±0.36)mmol/L均优于对照组(P<0.05).结论:对2型糖尿病实施葛根芩连汤配方颗粒治疗效果显著.

葛根芩连配方颗粒在大鼠体内的药物代谢产物研究

目的:研究葛根芩连配方颗粒在大鼠尿液中的代谢产物化学结构。方法:采用HPLC-DAD-MS技术,选用Lichrospher C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相0.1%甲酸水(A)-乙腈∶甲醇(6∶4)(B),检测波长272 nm;ESI离子源,正、负离子模式。结果:从灌胃葛根芩连配方颗粒的大鼠尿液中,发现并鉴定了11个主要代谢产物的化学结构,其中有5个来自葛根药材,分别为葛根素、3'-甲氧基葛根素、7-木糖苷葛根素、葛根素-葡萄糖苷、大豆苷元-4'-O-硫酸酯;有4个来自黄芩药材,分别为野黄芩素-6-O-葡萄糖苷、汉黄芩素、千层纸素A;有2个来自甘草药材,分别为异甘草素、甘草素。结论:葛根芩连配方颗粒在大鼠尿液中代谢产物主要以苷元或以葡萄糖醛酸、硫酸的结合物排泄,一些成分如葛根素主要以原形排泄。

葛根芩连配方颗粒提取工艺研究

目的:研究葛根芩连配方颗粒提取的优化工艺。方法:分别以葛根、黄芩及黄连的有效成分葛根素、黄芩苷及盐酸小檗碱为指标,用正交试验设计法对葛根芩连配方颗粒的提取工艺进行优化。结果:葛根芩连配方颗粒的最佳工艺为:葛根、黄芩和甘草3药合煎,黄连单煎;葛根、黄芩和甘草3药合煎的提取工艺为加水量第1煎10倍,第2煎8倍;提取1.5 h;提取2次。黄连单煎的提取工艺为加水量第1煎12倍,第2煎10倍;提取1.5 h;提取2次。结论:葛根、黄芩和甘草3药合煎,黄连单煎后各成分的提取率较高,保证了葛根芩连配方颗粒的质量。

葛根芩连配方颗粒在大肠湿热证模型大鼠尿液中代谢产物研究

目的研究葛根芩连配方颗粒(简称葛根芩连颗粒)在大肠湿热证模型大鼠尿液中的代谢产物。方法采用综合因素(高糖和高脂饮食+高温和高湿环境+肠产毒性大肠杆菌致病因子)制备大肠湿热证大鼠模型;利用HPLC-DAD-MS技术对大鼠ig葛根芩连颗粒后尿液中代谢产物进行分析,检测波长272 nm;流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈-甲醇(6∶4),梯度洗脱。结果从给予葛根芩连颗粒的大鼠尿液中发现并鉴定了5种主要代谢产物,分别为葛根素、异甘草素、甘草素、汉黄芩素、千层纸素A,其中葛根素来自葛根,汉黄芩素与千层纸素A来自黄芩,异甘草素与甘草素来自甘草。结论在大肠湿热证模型大鼠尿液中,葛根芩连颗粒中黄芩与甘草的代谢产物主要以苷元为主,葛根中的葛根素主要以原形排出。