不同酵母发酵葛根酒的抗氧化活性及香气成分分析

为筛选葛根酒酿酒酵母,促进葛根酒产业发展,采用对比试验借助高效液相色谱法(HPLC)、紫外分光光度法、气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)研究安琪、CY3079、K1M、DV10 4种酵母发酵葛根酒的理化指标、总黄酮及总酚含量、体外抗氧化活性和香气成分。结果表明:不同酵母发酵葛根酒的理化指标具有显著性差异,总黄酮含量在46.85~51.60 mg芦丁/100 mL,总酚含量在63.31~69.53 mg GAE/mL,酵母对葛根酒中5种黄酮组分(葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素、染料木苷)无明显影响;与其它果酒相比,葛根酒具有较强的体外抗氧化活性;不同酵母发酵的葛根酒香气成分的种类和含量存在明显差异,其中关键风味化合物、修饰风味化合物和潜在风味化合物数量和贡献度各不相同。经比较,K1M酵母发酵的葛根酒总黄酮、总酚含量最高,体外抗氧化能力最强,检测出的香气种类最多,香气物质浓度较高,酒体带有浓郁葛根清香,酒体协调,品质最佳,是适合葛根酒酿造的优良酵母。

微波辅助制备葛根酒

以湘西野葛根为原料,采用微波技术进行糊化处理,研究微波糊化处理后的α-淀粉酶添加量、糖化酶添加量、酵母添加量以及发酵时间对葛根酒的酒精度、葛根素含量和感官品质的影响,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,以响应面法确立制备工艺。工艺参数为:微波功率600W,微波辐射时间5min,α-淀粉酶添加量140.0u/g、糖化酶添加量160u/g、酵母添加量3.69%和发酵时间为5.44d,获得乙醇体积分数为7.47%、葛根素含量为30.45mg/100g的葛根酒,此葛根酒具野生葛根的自然本味香,有醇香,酒液清凉透明,呈淡黄色。

葛根酒中葛根素含量测定及其抗氧化性能研究

采用SYKAM S501 Series液相色谱仪,Shimadzu Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),甲醇∶水=35∶65为流动相,检测波长为250nm,快速测定葛根酒中葛根素含量,并通过超氧阴离子自由基(O_2^-·)、羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苯基自由基(DPPH·)清除率测定法评价葛根酒体外抗氧化活性。结果表明,葛根酒中葛根素的含量为160.83μg/mL。其对1,1-二苯基-2-苯基自由基的清除率达到53.1%,对羟基自由基的清除率达到35.67%,对超氧阴离子自由基的清除率达到75.36%。这说明葛根酒中含有较多的葛根素,具有较强的体外抗氧化活性,并具有一定的保健作用。

PVA共固定化双菌种发酵葛根酒的研究

采用PVA为载体共固定化酿酒酵母和产香酵母发酵葛根,酿造葛根酒。对游离细胞与固定化细胞的分批发酵和连续发酵的动力学进行了研究并建立了相应的发酵动力学方程。实验结果表明:酿酒酵母和产香酵母二种菌种菌量的最佳配比为3(1,发酵温度20℃,共固定化细胞分批发酵和连续发酵凝胶粒的充填系数分别为0.25和0.5,游离混合细胞的发酵时间为7d,共固定化细胞连续发酵稀释速率0.12/h其发酵时间为0.5d左右。经2000d连续发酵实验,PVA固定化细胞粒子的机械强度良好.

模糊数学结合响应面法优化葛根酒发酵工艺参数及其香气成分分析

为消除主观因素对感官评价的影响,以宜宾葛根为原料,采用模糊数学结合响应面法对葛根酒发酵工艺进行优化。在单因素实验的基础上,选取发酵初始pH、发酵温度、酵母添加量为影响因素,以通过模糊综合评价得到的品质等级值为响应值,运用Box-Behnken中心组合试验设计建立数学模型,进行响应面分析,并采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME/GC-MS)对葛根酒的香气成分进行检测。结果表明:葛根酒最优发酵条件为发酵初始pH5.5、发酵温度30℃、酵母接种量0.5%。在此条件下,感官评价等级值为3.68;葛根酒中共检测出30种香气成分,醇类物质含量为8.414 mg/L,以异戊醇、苯乙醇、异丁醇和异丙醇为主;酯类物质含量为2.229 mg/L,其中乙酸乙酯、乙酸苯乙酯、乙酸异戊酯、辛酸乙酯、己酸乙酯含量较高;此外还检测出酸类、醛类、酮类物质,如乙酸、己酸、辛酸、乙缩醛、3-羟基-2-丁酮等,这些香气物质相互融合协调,构成了葛根酒独特的风味。

5种酒曲发酵葛根酒的风味物质分析

目的:探讨5种不同酒曲发酵葛根酒中的挥发性物质。方法:分别用茅台酒曲、高效酒曲、甜酒曲、酵母及曲王5种单一或复合的曲种发酵葛根,发酵前加入果胶酶和葡萄糖供微生物分解利用;采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用仪分析不同酒曲发酵得到的葛根酒中挥发性成分差异。结果:共鉴定出78种成分,其中9个成分是5种酒样共有的;茅台酒曲发酵酒检测出42种成分,高效酒曲发酵酒检测出42种成分,甜酒曲发酵酒检测出33种成分,酵母发酵酒检测出25种成分,曲王发酵酒检测出27种成分;5种酒样的主要挥发性成分都是乙醇、苯乙醇、3-甲基-1-丁醇与2-甲基-1-丙醇,甜酒曲、酵母与曲王发酵酒中含有乙酸等杂味物质。结论:不同酒曲发酵的葛根酒所产生的挥发性气味差异较大,基于醇类、酸类、酯类的比较结果,高效酒曲发酵的葛根酒风味最佳。

超高效液相色谱法测定葛根酒中葛根素含量

采用戴安UltiMate3000超高效液相色谱仪,AcclaimPA2 C18色谱柱(2.2μm,2.1×50 mm),甲醇∶水=25∶75为流动相,检测波长为250 nm,快速测定葛根酒中葛根素含量。结果表明,与传统方法相比,该法的回收率在97.1%～105.3%之间,其平均回收率为100.3%;该方法操作简单,准确度高,精密度好,样品处理方便,为准确、快速测定葛根酒中葛根素提供一种简单的方法。

浓醪发酵葛根酒的工艺研究

为探究浓醪发酵葛根酒最佳发酵条件,在考察了野葛和粉葛基本组成成分的基础上,采用野葛全粉和野葛淀粉配伍进行浓醪发酵葛根酒的研制,以发酵后酒液的酒精度和总黄酮的含量为目标,对野葛全粉和野葛淀粉的配伍比例、料液比、糖化时间进行初步优化,并使用响应面中心组合实验确定料液比和糖化酶的用量。结果表明,野葛全粉和野葛淀粉按1∶1配比,料液比为1∶1.587,糖化酶用量为256.2 U/g,糖化时间为0 min时,酒精度为15.2%vol,葛根总黄酮为25.9 mg/mL,在此条件下,酒精度和总黄酮含量均较高。

人参、葛根配制西藏青稞酒影响小鼠高海拔缺氧耐受力研究

为了探究人参、葛根配制西藏青稞酒提高缺氧耐受力的功能及其机制。以人群推荐日摄入量20.0 mL/60kg BW作为剂量设计依据,采用SPF级昆明种雌性小鼠进行常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒存活及急性脑缺血性缺氧实验。结果表明:以剂量组同时与阴性对照组和溶媒对照组比较P值均小于0.05判断为显著性差异,各剂量组对小鼠体重均无显著性影响;各剂量组能明显延长小鼠常压耐缺氧存活时间、急性脑缺血性缺氧实验小鼠喘气时间和增加血液中氧合蛋白的含量,但不能延长亚硝酸钠中毒后存活时间。结论:人参、葛根配制西藏青稞酒提高缺氧耐受力功能动物试验结果阳性,其机制之一可能是提高血液中氧合蛋白含量来提高缺氧耐受力。

RP-HPLC法测定葛根解酒片中葛根素和二苯乙烯葡萄糖苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定葛根解酒片中葛根素和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(以下简称二苯乙烯苷)的含量。方法采用kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱〔0 min,φ(B)=90%、40 min,φ(B)=85%、60 min,φ(B)=75%〕,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:250 nm(0 min)、320 nm(30 min)。结果葛根素和二苯乙烯苷进样量分别为50.7～676.0 mg.L-1(r=0.999 6)和13.8～184.0 mg.L-1(r=0.999 5)线性关系良好,平均回收率分别为96.7%(RSD=1.7%,n=6)和96.4%(RSD=1.4%,n=6)。结论该方法可同时测定葛根解酒片中葛根素和二苯乙烯苷的含量。

元代葛根外传及罗卫、龙牙菩提葛根酒的酿制

元人汪大渊《岛夷志略》中“罗卫”和“龙牙菩提”两地均有葛根酿酒的记载。葛根原产于中国,含有大量葛根素,不仅可消渴解暑,亦对心脑血管疾病、心悸耳鸣等有很好的疗效。古代医学典籍中,葛根使用多表现为碾粉、蒸煮、熬粥等,未见有用之酿酒的记录。随着元代海外贸易的繁荣以及华人的外徙,使得葛根及其用途向外传播成为可能。基于以上因素,位于东南亚的罗卫和龙牙菩提其时创造性地以葛根酿酒,乃使这一产于中国的物种在东南亚获得进一步开发利用,有了新的食法。

HPLC法测定葛根养生酒中葛根素含量的分析研究

建立了养生酒中葛根素的高效液相色谱测定方法。不同葛根素含量的养生酒样品经适当稀释或水浴挥干、定容后,以甲醇-0.1%乙酸水溶液(梯度洗脱)为流动相,JADE-PAKODS-AQ C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离的高效液相色谱法测定葛根素含量。结果显示:该方法在1.0~120 mg/L范围内线性关系良好,相关系数R2为0.9999,线性方程为y=45.849x-6.1179,方法检出限、定量限分别为0.10 mg/kg、0.40 mg/kg;仪器精密度良好,峰面积RSD为0.22%(n=6);养生酒中3个加标水平下的平均回收率范围为90.52%~93.98%(n=6),相对标准偏差为0.57%~2.37%。该方法灵敏度高、分析时间短、稳定性好、准确可靠,是测定葛根养生酒中葛根素含量的有效方法。

葛根解酒软肝胶囊治疗酒精性肝病48例临床观察

[目的]观察葛根解酒软肝胶囊治疗酒精性肝病疗效。[方法]对48例酒精性肝病患者使用葛根解酒软肝胶囊(葛根20g,枳椇子15g,陈皮12g,五味子10g,黄芪50g,山楂30g,甘草5g),研成细末,制成胶囊,6粒/次,3次/d。观测临床症状、肝功能指标、不良反应。连续治疗5疗程,判定疗效。[结果]显效35例,有效10例,无效3例,总有效率为94.00%[结论]中药治疗酒精性肝病方面效果显著,值得推广。

葛根解酒胶囊对小鼠急性酒精中毒的预防及治疗作用

目的:探讨葛根解酒胶囊对急性酒精中毒小鼠的预防及治疗作用。方法:"跳楼试验":选昆明小鼠30只,随机分为三组,每组10只,对照组:给予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃;药物治疗组:给予浓度为12 mg·ml-1的葛根解酒胶囊溶液0.2ml·10g-1灌胃,1h后各只给予50%酒精0.2ml·10g-1灌胃;非药物治疗组:给予生理盐水0.2ml·10g-1灌胃,1h后各只给予50%酒精0.2ml·10g-1灌胃;10min后将小鼠放到单杆上,观察并记录小鼠在单杆上停留的时间。水迷宫试验:经过水迷宫训练的昆明小鼠30只,随机分为3组,对照组:50%的酒精0.2ml·10g-1灌胃,20 min之后投入水迷宫;药物治疗组:50%的酒精0.2ml·10g-1灌胃,10min后浓度为12mg·ml-1葛根解酒胶囊溶液0.2ml·10g-1腹腔注射,再过10min后把小鼠投入水迷宫;非药物治疗组:50%的酒精0.2ml·10g-1灌胃,10min后生理盐水0.2ml·10g-1,腹腔注射,再过10min后把小鼠投入水迷宫,记录小鼠投入水迷宫后能否找到并爬上平台的只数,并记录其平均游泳速度。结果:药物治疗组维持平衡时间(266.9±52.4s)明显长于非药物治疗组(173.5±74.1s)和对照(155.8±54.8s)(P<0.01);葛根解酒胶囊能够促进小鼠找到平台(P<0.05),药物治疗组小鼠的游泳速度(17.2±9.4cm·s-1)比非药物治疗组(8.02±4.8cm·s-1)及对照组(7.01±4.1cm·s-1)快(P<0.05)。结论:葛根解酒胶囊对急性酒精中毒有一定预防及治疗作用。

枸杞-粉葛酒与枸杞-野葛酒组分及抗氧化性的比较

分别以粉葛、野葛为原料,酶水解为糖浆后加入枸杞浆液,研制出枸杞-粉葛酒、枸杞-野葛酒,并对二者的理化指标、风味特征以及抗氧化性进行比较分析。结果表明,枸杞-野葛酒的干浸出物、葛根素、总酚含量分别达到37.3 g/L、(7.11±0.12)mg/L、(1 685.3±3.3)mg/L,均高于枸杞-粉葛酒。两种酒中分别鉴定出56种、57种挥发性组分,主要包括醇类、酯类、酸类、醛类、酮类、酚类、呋喃类等,其中酯类、酸类、呋喃类组分含量差异显著(P<0.05)。枸杞-野葛酒中,脂肪酸乙酯含量高(815.72 g/L),己酸(287.84 g/L)、辛酸(2 492.86 g/L)、正癸酸(1 223.46 g/L)、十二烷酸(35.02 g/L)、2-乙酰基吡咯(5.59 g/L)含量较高,赋予枸杞-野葛酒木质芳香,酒香浓郁。枸杞-野葛酒对DPPH、ABTS清除率分别为(64.5±0.3)%、(85.9±1.0)%,其抗氧化性高于枸杞-粉葛酒。

葛根袋泡茶的水浸出率及薄层层析法研究

介绍了葛根解酒袋泡茶的水浸出率及薄层层析实验研究。

葛根保健酒中葛根素的鉴别和含量测定

研究了葛根保健酒中葛根素的鉴别和含量测定方法。结果表明,红外光谱法不适用于葛根保健酒中葛根素的鉴别。薄层色谱法斑点清晰,重现性好,专属性强,可作为葛根保健酒中葛根素的鉴别。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,紫外检测波长为250 nm,以甲醇-0.2%的磷酸水溶液（体积比20︰80）为流动相,葛根保健酒中的葛根素在6.268-125.360μg/m L质量浓度范围内线性关系良好（R2=0.999 9）,平均回收率为100.56%,RSD=0.48%,所建立的高效液相色谱法精密度、稳定性、重复性和准确度均良好,可用于葛根保健酒中葛根素的含量测定。

Prevention and Cure of Acute Alcohol Intoxication in Mice by Administration of Compound of Japanese Raisintree Fruit, Lobed Kudzuvine Flower Bud and Lightyellow Sophora Root

[Objective] We aimed to investigate the preventive and therapeutical effect of compound of traditional Chinese drugs （Japanese raisintree fruit, lobed kudzuvine flower bud and lightyel ow sophora root） on acute alcohol intoxication in mice. [Method] Acute alcohol intoxication was induced by administering alcohol to mice. Three different doses （low, middle and high） of compound of traditional Chinese drugs were administered to mice before and after administering alcohol respectively to investigate the preventive and therapeutical effect of drugs on acute alcohol intox-ication through doing statistical analysis about drunk mice and their sleeping time. The concentration of malondialdehyde （MDA）, reduced glutathione （GSH） and triglyc-erides （TG） in liver was also determined to investigate the protective effect of drugs on liver. [Result] The efficacy of compound of traditional Chinese drugs on acute al-cohol intoxication was dose-dependent. High-dose administration decreased the number of drunk mice significantly compared with control group; middle- and high-dose administration reduced the sleeping time of drunk mice and the concentration of MDA and TG in liver tissue; three doses al increased the concentration of GSH. [Conclusion] The compound of Japanese raisintree fruit, lobed kudzuvine flower bud and lightyel ow sophora root had preventive and therapeutical effect on hangover, and it also had certain preventive and therapeutical effect on liver damage caused by alcohol.

层次分析法多指标正交实验优选葛根解酒方的提取工艺

目的:优选葛根解酒方的最佳提取工艺。方法:采用正交实验法,以葛根素和大豆苷为指标,通过层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)确定权重,多指标综合评分优选葛根解酒方的工艺参数。结果:处方药材加10倍量水,提取3次,每次1.5 h。结论:运用AHP法确定权重系数,优选得到的工艺稳定可行,可用于工业化生产。