分光光度法测定原料中透明质酸钠的含量

建立了基于分光光度法测定原料中透明质酸钠的方法。用硼砂作催化剂对透明质酸钠用硫酸进行酸解,在100℃水浴震荡20min,通过酸解可以把葡萄糖醛酸分解出来,再加入咔唑在100℃水浴震荡20min进行衍生,衍生液在分光光度计上分析。当透明质酸钠的添加量在4.5g/100g~210.0g/100g时,加标回收率为95.3%~104.5%,相对标准偏差小于3.0%,定量检出限为10.0g/100g。该方法具有快速、准确、稳定性好、灵敏度高等优点,可用于原料中透明质酸钠含量的检测。

HPLC-MS/MS分析黄连碱在大鼠体内外的代谢产物

目的:探讨黄连碱的体内外代谢产物及其代谢途径。方法:体内代谢采用单次灌胃大鼠黄连碱(剂量25 mg·kg^-1),收集给药后0~48 h的尿液和粪便,0~24 h的胆汁以及给药0.25,1,2 h后的血浆和脑组织样品;体外代谢采用大鼠肝微粒体及肠道菌群孵育的方法;运用高分辨HPLC-MS/MS技术对生物样品中的药物原型及代谢物进行鉴定。选用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温25℃。质谱使用电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测模式,扫描范围m/z 50~1200。对各色谱峰质谱图进行分析,根据准分子离子峰判断相对分子质量,进一步根据各色谱峰的主要碎片离子、保留时间等信息,与文献数据进行比较,推测化合物的结构。结果:在大鼠尿液、粪便、胆汁、血浆、脑组织、肝微粒体温孵和肠道菌群温孵样品中发现了黄连碱的17个代谢产物,Ⅰ相代谢产物11个,Ⅱ相代谢产物6个。这17个代谢产物是黄连碱在大鼠体内羟基化、去甲基化和脱氢作用、硫酸酯化、葡糖糖醛酸化后产生的。结论:黄连碱可在大鼠体内发生Ⅰ相和Ⅱ相代谢反应,代谢物主要存在于尿液中,主要代谢部位为肝脏;黄连碱胃肠道吸收较差,代谢少,大部分经粪便以原型排泄,为黄连碱的药效学和药理学研究提供了一定的物质基础。