血清6-磷酸葡萄糖异构酶及抗CCP抗体等联合检测对类风湿关节炎临床诊断应用的研究

目的探讨葡萄糖-6-磷酸-异构酶(GPI)在类风湿关节炎(RA)患者诊断中的意义。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测69例类风湿关节炎(RA)患者,29例其他风湿患者、40例健康对照血清中GPI浓度,同时检测RA患者类风湿因子(RF)、环瓜氨酸肽(CCP)抗体、血沉等血液指标。结果RA患者中GPI浓度为2.41±2.27,其他风湿患者为0.18±0.13,健康对照组为0.11±0.05。GPI浓度在类风湿关节炎患者血清中显著高于其他风湿病组和健康对照组(P<0.05)。结论部分RA患者血清GPI浓度显著增高,GPI可以作为临床诊断RA的指标之一,同时可作为病情活动状况的判断依据。

葡萄糖-6-磷酸异构酶与类风湿性关节炎的研究进展

葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)是糖酵解和糖异生过程中的一种重要酶类,在类风湿性关节炎(RA)患者的血清和关节液中其浓度明显增高,有可能成为RA的一个新的临床实验室诊断指标。同时,研究GPI在类风湿性关节炎中的作用机制,为今后开辟新的针对RA的治疗方法及其对药物开发具有重要意义。

葡萄糖-6-磷酸异构酶对诊断类风湿性关节炎的临床价值分析

类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis，RA）是一种全身炎症性自身免疫疾病，尤以关节滑膜炎症及周围结缔组织异常增生、关节进行性破坏为主要表现，若不及时治疗，可发生不可逆的关节破坏或畸形，其患病率居结缔组织病之首。由于患者体内存在多种自身抗原和自身抗体，因此，寻找早期、特异、灵敏的实验室指标成为当前关注的焦点。最新的研究表明在64％未控制的RA患者的血清、关节液中都检测到高浓度葡萄糖-6-磷酸异构酶（glucose-6-phosphateisomerase，GPI）及抗GPI抗体。本文通过检测GPI观察其在RA患者血清中的表达水平，对RA的发病机制进行初步探讨。

葡萄糖6-磷酸异构酶阳性与活动期RA患者的临床特点分析

目的探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗原阳性的活动期类风湿关节炎(RA)的临床特点。方法选择79例活动期RA患者,于治疗前、治疗4、8周后与对照组同行检测血清中的GPI抗原水平,并分析GPI抗原水平与RA患者临床表现和其他辅助检查结果之间的关系。结果治疗前患者血清GPI抗原为(3.87±1.43)mg·L-1,明显高于健康对照组(P<0.05);治疗4与8周血清GPI抗原水平较治疗前明显降低(P<0.05)。血清GPI抗原水平在治疗前及治疗过程中与年龄、压痛关节数、肿胀关节数、类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)及DAS28等指标呈正相关性(P<0.05)。结论 GPI在RA中的升高程度与关节炎的活动性有关,并随病情缓解下降,可作为类风湿关节炎患者诊断、治疗后病情评估的良好指标。

类风湿关节炎活动期滑液中葡萄糖6-磷酸异构酶水平及与抗环瓜氨酸肽抗体的关系

目的检测葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）在类风湿关节炎（RA）活动期膝关节滑液中的含量，并探讨滑液中GPI与抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体的关系。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）检测22例RA活动期患者和37例骨关节炎活动期患者滑液中GPI和抗CCP抗体的浓度。组间比较采用t检验，相关性分析采用Spearman相关分析。结果RA活动期患者膝关节滑液中的GPI浓度高于骨关节炎活动期患者[（9．6±8_4）和（0．9±1．8）μg／ml]，差异有统计学意义（P〈0．01）；RA活动期患者与骨关节炎活动期患者滑液的抗CCP抗体浓度分别为（14．61±18．64）和（1．42±0．09）U／ml，差异有统计学意义（P〈0．01）；RA活动期患者膝关节滑液中GPI含量和抗CCP抗体浓度呈正相关（r=0．447，P=0．037）。结论GPI在RA活动期患者滑液中高表达，可能与RA发生发展过程中慢性滑膜炎、骨质破坏有关。GPI与抗CCP抗体呈正相关，两者可作为RA实验室诊断的参考指标。

低氧对类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞表达葡萄糖-6-磷酸异构酶及细胞周期的影响

目的 研究将通过对骨性关节炎（OA）和RA患者的关节滑膜成纤维样细胞（FLS）进行正常氧和低氧培养后,观察FLS表达葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）和缺氧诱导因子（HIF）-1α的变化情况及对细胞周期的影响.方法 原代培养OA和RA患者的滑膜成纤维细胞,分别在正常氧和3％氧环境中培养24 h,实时荧光定量PCR检测G6PI、HIF-1α mRNA表达水平,蛋白印迹法检测G6PI、HIF-1α蛋白表达水平.流式细胞仪检测细胞周期.采用t检验、Mann-Whitney U检验进行统计学处理.结果 与正常氧培养相比,经3％氧培养RA FLS G6PI mRNA的升高倍数（2.6±0.4）明显高于OA FLS的升高倍数（1.5±0.4）（t=4.94,P＜0.05）;RA FLS G6PI蛋白表达水平明显高于OA FLS（t=2.81,P＜0.05）.与正常氧培养相比,RA FLS经3％氧培养HIF-1α mRNA的升高倍数（2.9±0.8）明显高于OA FLS的升高倍数（1.4±0.4）（t=4.51,P＜0.05）;RA FLS HIF-1α蛋白表达水平明显高于OA FLS（t=14.54,P＜0.05）.在3％氧低氧培养环境中,与正常氧培养相比,RA FLS G1期显著减少（t=11.31,P＜0.05）,S期（t=-7.62,P＜0.05）、G2期显著增加（t=-9.95,P＜0.05）.结论 在RA低氧环境中,G6PI、HIF-1αmRNA和蛋白水平在FLS中的表达增高,FLS细胞增殖加快.

血清葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原和抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿关节炎诊断及治疗中的意义

目的探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗原和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体在类风湿关节炎(RA)诊治中的意义。方法用酶联免疫吸附试验分别检测41例活动期RA患者口服来氟米特治疗前、治疗12周、24周及健康对照组血清中的GPI抗原和抗CCP抗体水平,并与RA患者临床活动指标进行比较分析。结果 (1)血清GPI抗原和抗CCP抗体对RA诊断的敏感性分别为87.8%和90.2%,两者差异无统计学意义(P=1.000)。(2)治疗前患者血清GPI抗原和抗CCP抗体水平分别为(3.33±1.88)μg/ml和(84.10±36.26)U/ml,明显高于正常对照组(P<0.001);治疗12周及24周血清GPI抗原较治疗前明显降低(P<0.001),而抗CCP抗体无明显改变(P>0.05)。(3)血清GPI抗原水平在治疗前及治疗过程中与年龄、压痛关节数、肿胀关节数、类风湿因子、血沉、C反应蛋白及DAS28等指标呈正相关(P<0.05),抗CCP抗体治疗前与双手X线分期相关。结论 RA患者血清GPI抗原和抗CCP抗体均具有较高的敏感性,GPI抗原与RA的活动性密切相关,可作为评估病情活动的新指标,抗CCP抗体与RA骨侵蚀相关,而与疾病活动无相关。

血清葡萄糖-6-磷酸异构酶测定在类风湿关节炎中的应用价值

目的检测类风湿关节炎（RA）患者血清葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）的水平，探讨其在RA中的诊断价值。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）法分别测定RA患者40例、非RA其它风湿病患者40例以及正常对照组40例血清中的GPI水平，同时检测IgM-RF。分别计算GPI、IgM—RF对RA诊断的评价指标。结果GPI抗原的阳性率在RA中为82．5％，非RA中为7．5％，正常对照全部为阴性。GPI及IgM—RF对RA诊断的灵敏度和特异性分别为82．5％、92．5％，72．15％、82．5％。结论用ELISA法检测血清中GPI简便、结果可靠，对RA诊断具有高度的灵敏度和特异性，可作为RA患者一个新的诊断指标。

葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）构建类风湿性关节炎小鼠模型的实验研究

目的 建立葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）诱导的类风湿性关节炎（RA）小鼠模型,以探讨GPI在RA的作用机制.方法 36只DBA/1小鼠随机分为3组,实验组（注射GPI）、阳性对照组（注射牛Ⅱ型胶原）、阴性对照组（注射生理盐水）,每组12只.观察各组小鼠体质量增长、体质量增长率变化;关节炎性指数评分;小鼠踝关节病理组织学改变及小鼠血清GPI含量测定.结果 实验组小鼠从第35天开始,足趾出现轻微的肿胀,关节红肿、畸形,并伴有活动障碍,体质量的变化及增长率与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.实验组、阳性对照组与阴性对照组小鼠关节炎指数评分比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.实验组小鼠滑膜衬里下层均可见大量渗出的巨噬细胞、成纤维细胞等炎细胞,细胞增多增大.建模成功的小鼠血清GPI含量[（0.39±0.11）μg/ml]明显高于阴性对照组[（0.10±0.06）μg/ml],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 GPI可成功诱导小鼠类风湿性关节炎的发生,为进一步研究GPI在RA的作用机制提供诊断依据。

碳源对manA基因突变大肠杆菌代谢的影响

ManA基因编码的甘露糖-6-磷酸异构酶在大肠杆菌中催化D-甘露糖和D-果糖的异构化,促进大肠杆菌对碳源的代谢吸收。本文通过研究manA基因突变大肠杆菌对碳源的利用和编码糖代谢基因情况,探讨甘露糖-6-磷酸异构酶对大肠杆菌糖代谢的影响。采用Ⅱ型内含子逆转录突变方法构建manA基因突变大肠杆菌,分析manA基因突变大肠杆菌对不同碳源的利用情况和manA基因突变对大肠杆菌糖代谢相关基因表达的影响,结果显示,大肠杆菌BL21(DE3)ΔmanA以甘露糖、果糖为碳源时,菌株生长受到显著抑制;以淀粉为碳源时,BL21(DE3)ΔmanA菌株的生长显著优于野生型大肠杆菌;以葡萄糖为碳源时,manA基因突变对大肠杆菌的生长无显著影响。通过基因表达分析,发现大肠杆菌BL21(DE3)ΔmanA中甘露糖代谢相关基因的表达显著性降低;果糖代谢途径中6-磷酸果糖激酶Ⅰ亚基的编码基因(pfkA)显著下调表达;水解淀粉的α-淀粉酶编码基因(malS)显著性上调表达。ManA基因突变影响大肠杆菌甘露糖、果糖和淀粉代谢途径中相关基因的表达,从而影响大肠杆菌对碳源的利用。

葡萄糖6磷酸异构酶和烯醇化酶1可预测人类精子冷冻复苏后活力

目的 比较葡萄糖6磷酸异构酶（GPI）和烯醇化酶1（ENO1）在人类精子中不同耐冻能力组之间表达的差异,寻找预测人类精子冻融后活力可能的标志物.方法 收集42例合格供精志愿者的新鲜精液样品,依据冻融后精子活力的不同,将符合条件的样品分为耐冻组和不耐冻组,应用蛋白质印迹（Western blot）技术比较两组样品GPI和ENO1蛋白在表达量上的差异,利用免疫荧光技术验证Western blot结果并观察两种蛋白在精子中的分布.结果 在两组样品之间,GPI和ENO1都表现出明显的差异.GPI和ENO1在耐冻组的表达量均高于不耐冻组（分别为P＜0.01,P＜0.05）,而蛋白在精子中的分布未见明显组间差异.结论 GPI和ENO1可以作为标志物在冻存前预测人类精子冷冻复苏后的活力.

类风湿关节炎患者特异性标记物与肺间质病变的关系

目的探讨生物标记物——类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)和葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)与类风湿关节炎患者间质性肺疾病(ILD)的关系。方法选取123例RA患者,根据患者肺部高分辨CT(HRCT)判定有无ILD,将患者分为ILD组(60例)和非ILD组(63例),比较两组患者血清RF、抗CCP抗体、GPI水平间的差异。结果类风湿关节炎ILD组患者血清RF及GPI水平〔(385±645)U/ml与(1.42±1.32)μg/ml〕显著高于非ILD组〔(273±496)U/ml与(1.06±1.23)μg/ml〕,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组患者血清抗CCP抗体水平〔(3.05±2.45)与(3.03±2.36)〕间差异无统计学意义(P>0.05)。RA患者血清RF水平与GPI水平呈正相关(r=0.804,P<0.05)。结论类风湿关节炎患者血清RF与GPI水平异常增高提示发生ILD的可能性大。

多指标联合检测对类风湿关节炎的临床诊断价值

目的探讨类风湿因子(RF)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)、抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体(抗MCV)和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体(抗CCP)联合检测对类风湿关节炎(RA)的临床诊断价值。方法以108例RA患者(RA组)及86例非RA患者(非RA组)为研究对象,检测RF、GPI、抗MCV和抗CCP血清浓度。结果 4个指标检测结果在RA组和非RA组间的差异有统计学意义(P<0.05);任意2项及其以上指标联合诊断RA的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、诊断效率、Youden指数、受试者工作特征曲线下面积分别为97.2、100.0、100.0、100.0、98.8、0.97和0.984。结论上述4个指标的联合检测有助于提高诊断RA的灵敏度和特异性,可弥补单指标检测的不足,从而有效避免漏诊和误诊。

GPI抗原在类风湿关节炎临床诊断中的价值

目的检测类风湿关节炎（RA）病人血清中葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原（GPI抗原）的水平,探讨GPI抗原在RA临床诊断中的价值。方法选择RA病人60例,其他自身免疫性疾病病人（非RA组）42例,健康体检者45例（对照组）。采用ELISA法测定各组血清中GPI抗原和抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）的水平,采用免疫散射比浊法测定各种血清中类风湿因子（RF）的水平。结果 RA组病人血清中GPI抗原、抗CCP抗体和RF水平及阳性率明显高于对照组及非RA组（F=3.67~4.32,q=3.58~4.48;χ^2=4.46~52.20;P〈0.05）。RA组GPI抗原、抗CCP抗体及RF单一指标诊断RA的灵敏度差异无显著性（P〉0.05）;但GPI与抗CCP抗体诊断RA的特异度明显高于RF（χ^2=8.47、7.46,P〈0.01）。GPI抗原、抗CCP抗体以及RF联合诊断RA灵敏度有所下降,与单项指标比较差异有显著性（χ^2=4.43~9.41,P〈0.05）,但是联合诊断RA的特异度和阳性预测值明显高于RF单项指标（χ^2=9.70、7.43,P〈0.05）。结论 GPI抗原在RA诊断中具有较高的特异度,与抗CCP抗体及RF联合检测,可以提高RA诊断的特异度及阳性预测值。

葡萄糖磷酸异构酶缺乏症发病机制及诊疗的研究现状

葡萄糖磷酸异构酶(GPI)缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传病, GPI突变造成的酶结构异常及活性缺乏是其主要的致病原因。该病的临床表现包括新生儿高胆红素血症、先天性非球形红细胞溶血性贫血等, 在感染等诱因下可发生急性溶血危象, 部分病例伴有神经系统症状。GPI缺乏症的实验室检查方法主要包括GPI活性测定和GPI基因检测。笔者拟就GPI缺乏症的发病机制、临床特征、实验室检查、治疗及预后的研究现状进行总结, 旨在为该病的临床诊疗提供参考。

6638例风湿病患者五种类风湿关节炎血清标志物检测结果分析

目的 探讨抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、抗角蛋白抗体（AKA）、抗RA33抗体、磷酸6葡萄糖异构酶（GPI）、类风湿因子（RF）等类风湿关节炎特异性血清标志物在不同风湿病中的分布,评价其对类风湿关节炎（RA）诊断的应用价值和意义.方法 对2011年1月至2014年10月本院门诊及住院6 638例接受五种血清标志物检测的风湿病患者临床资料、诊断、检查结果进行回顾性研究,计数资料比较应用x2检验.结果 6 638例确诊风湿病患者RF、抗CCP抗体、抗RA33抗体、AKA、GPI的阳性率分别为：55.30％（3 671/6 638）、39.71％ （2 636/6 638）、14.49％（962/6 638）、12.34％（819/6 638）、41.29％（2 741/6 638）,其中RA组患者阳性率分别为：88.39％（3 289/3 721）、68.63％（2 554/3 721）、16.52％ （615/3 721）、21.50％（800/3 721）、62.13％（2 312/3 721）,除抗RA33抗体,余均显著高于其他疾病组（P＜0.01）.结论 RF、抗CCP抗体、抗RA33抗体、AKA、GPI对RA有重要的诊断价值及意义,但是上述标志物也可出现在其他风湿病中,因此在临床诊疗过程需综合分析,避免片面根据血清学检查结果所致误诊.

抗CCP抗体联合抗AKA抗体、GPI和RF检测对类风湿关节炎的诊断意义

目的探讨环瓜氨酸肽抗体（CCP）联合抗角蛋白抗体（AKA）、葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）和类风湿因子（RF）检测对类风湿关节炎（RA）的诊断意义。方法对74例RA及112例非RA患者分别用ELISA检测CCP、GPI，免疫比浊法测定RF，间接免疫荧光法检测AKA。结果（1）ROC特征工作曲线分析，CCP、RF最佳诊断浓度为28．2RU／ml、19．7IU／ml，特异性与敏感性分别为96．43％和93．24％、83．04％和86．49％；X^2检验显示GPI、AKA特异性与敏感性分别为92．86％和50．00％、93．75％和66．22％；（2）四项指标任意一项阳性的诊断特异性和敏感性分别是71．42％和100％，而当四项以上阳性时，特异性可达100％，诊断敏感性为32．43％。结论抗CCP抗体联合检测抗AKA抗体、GPI和RF可明显提高RA的诊断特异性和敏感性，从而防止临床表现不典型的早期RA患者漏诊。

自拟独活寄生汤治疗风寒湿痹型膝骨关节炎效果

目的研究自拟独活寄生汤结合体外冲击波(ESW)治疗对风寒湿痹型膝骨关节炎患者关节功能恢复及血清葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、转化生长因子β(TGF-β)的影响。方法纳入标准:符合风寒湿痹症诊断标准;在加入此次研究前3个月内没有相关治疗;无用药禁忌证;对冲击波耐受;单侧膝盖患病;依从性佳,可以随访;知情同意。排除标准:外伤导致损伤半月板、神经血管;合并系统重大疾病;处于妊娠期或者哺乳期;合并膝关节肿瘤者;关节骨性强直。根据标准选取159例2019年6月至2020年6月期间在首都医科大学附属北京康复医院就诊的风寒湿痹型膝骨关节炎患者。抓阄法将患者分3组:对照组(塞来昔布)、ESW治疗组(塞来昔布+ESW)和中药联合组(自拟独活寄生汤+ESW),每组53例。3组均连续治疗4周。记录治疗后中医症状积分,治疗前后Lysholm功能评分、视觉模拟评分(VAS)、GPI、TGF-β等。采用t检验、卡方检验、单因素方差分析比较3组临床疗效。结果治疗后在乏力、关节僵硬、腰背酸痛等中医症状方面中药联合组得分最低(F=108.1、22.73、32.30、45.02、45.92,均为P<0.05);与对照组、ESW组相比差异有统计学意义(均为P<0.05),对照组、ESW组之间得分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3组患者在Lysholm功能评分均较治疗前增加(t=2.48、2.41、3.43,均为P<0.05),且3组间差异有统计学意义(F=27.15,P<0.05);组间两两比较,中药联合组评分优于对照组、ESW组(均为P<0.05)。治疗后,3组患者的VAS评分比治疗前均明显下降(t=4.98、5.11、7.91,均为P<0.05),且3组间差异有统计学意义(F=19.92,P<0.05);组间两两比较,中药联合组VAS评分低于对照组、ESW组(均为P<0.05)。对照组、ESW组患者优良率分别为64.2%、62.3%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.04,P>0.05),中药联合组患者优良率为84.9%,明显高于对照组和ESW组(χ^(2)=6.01、6.99,均为P<0.05)。治疗后,中药联合组血清GPI与治疗前比较降低(t=3.14,P<0.05),TGF-β比治疗前升高(t=2.03,P<0.05);组间两两比较,中药联合组血清GPI低于对照组和ESW组,中药联合组血清TGF-β高于对照组和ESW组(均为P<0.05)。结论对风寒湿痹型膝骨关节炎患者采取自拟独活寄生汤、ESW联合治疗,促进患者缓解功能恢复,降低血清GPI水平,提高血清TGF-β水平;与传统塞来昔布或塞来昔布联合ESW的疗效更佳。