巯基葡聚糖凝胶分离富集-萃取-氢化物发生原子荧光法测定染发剂中的砷、铅

目的：建立染发剂中砷、铅在盐酸介质下，氢化物发生原子荧光法测定的方法。方法：采用HNO3-H2O2消解样品，以硫基葡聚糖凝胶分离富集Pb^2＋，以2．0mol／LHCl溶液洗脱，在样品溶液中，以双-（α-乙基已基）-二硫代磷酸癸烷溶液萃取As，然后以NH4OH和（NH4）2SO4反萃取后，酸性介质中，在硫脲和碘化钾、革酸和铁氰化钾存在下，氢化物发生原子荧光法测定其含量。结果：方法的检出限为0．40、0．35μg／L；线性范围为0—100μg／L，0—80μg／L；加标回收率为96．0％-105．0％。结论：本法由于有效地分离了干扰物质，所以具有灵敏度高、结果准确可靠的优点，应用于样品的检测并与其它方法相比较，结果满意。

Microbulbifer sp.FG5琼胶酶的分离纯化及酶学性质研究

琼胶酶是一种糖苷水解酶,能够特异性降解琼胶为琼胶寡糖。本研究从一株琼胶降解菌FG5的培养液中分离纯化得到纯净的琼胶酶并研究其酶学特性。将FG5菌株的发酵液离心后得到粗酶液,再通过超滤浓缩、透析、葡聚糖凝胶柱层析进行酶的分离纯化。收集得到葡聚糖凝胶柱层析紫外检测主峰组份,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带蛋白质,分子量约为54 kD。酶活检测证明该蛋白具有琼脂酶活性,命名为琼胶酶FG5-A。采用单因素试验和正交试验设计对FG5-A的酶解反应条件进行优化分析。FG5-A琼胶酶活性最适条件为:pH 7.3,反应温度51℃,反应底物含量0.351%。探索了FG5-A的纯化流程,经葡聚糖凝胶柱纯化后琼胶酶活性相比发酵液提高了6.95倍,并初步优化了FG5-A琼胶酶的最适酶解条件,为高纯度琼胶酶的工业化生产和应用奠定理论与实践基础。

Vibrio sp.FG1琼胶酶的分离纯化及酶学性质研究

目的:通过对琼胶降解菌FG1发酵液的分离纯化,拟获得较高纯度的琼胶酶,并探究其最适反应条件,为后续琼胶酶的工业化生产提供基础.方法:将FG1菌株的发酵液离心后得到粗酶液,再通过超滤浓缩、透析、葡聚糖凝胶柱层析进行酶的分离纯化.通过DNS法测定酶解反应产物还原糖含量从而计算得出酶活力单位,运用单因素实验和正交试验设计对单一琼胶酶组分的酶解反应条件进行优化.结果:经分离纯化紫外检测得到两个峰值产物且均具有琼胶酶活性,分别命名为FG1-A、FG1-B,酶组分A与酶组分B经PAGE电泳分别显示为两条亮带和一条亮带,酶组分A中两种蛋白质分子量分别为53.45 kD和46.85 kD,酶组分B蛋白质分子量为42.50 kD.对单一酶组分B进行反应条件优化得出其最适反应pH为6.4,最适反应温度为37℃,最适反应底物浓度为0.35%.结论:本研究利用葡聚糖凝胶柱对FG1粗酶液纯化了7.65倍,初步探讨了FG1琼胶酶的酶解条件,为最终得到高纯度的琼胶酶奠定理论与实践基础.

从槐米中提取槲皮素的研究

目的本文从槐米中提取分离槲皮素进行研究。方法采用碱溶酸沉法提取,再进行酸水解得到槲皮素。结果确定了碱溶解酸沉淀法提取槐米中槲皮素的最佳条件及槲皮素的结构鉴定。结论用碱溶解酸沉淀法从槐米中提取槲皮素是很有意义的,可以较好的提取分离出较高纯度的槲皮素。