双水相体系萃取分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质

采用响应面法对双水相体系分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质条件进行优化。在单因素实验基础上,选取pH、NaCl质量分数、样品加入量和温度为影响因子,利用Box-Behnken中心组合进行四因素三水平的实验设计,以蛋白质萃取率为响应值,进行响应面分析。结果表明,葡萄皮蛋白质的最佳萃取条件:质量分数为22%聚乙二醇(PEG600)-20%(NH4)2SO4体系,萃取pH7.1,NaCl质量分数1.2%,样品加入量2.41mL,萃取温度35.2℃。在此条件下,葡萄皮蛋白质萃取率的理论值为31.66%,实测值为31.08%。

反胶团萃取分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质

采用阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)反胶团萃取葡萄皮中的蛋白质。分别考察水相pH值、表面活性剂浓度、离子强度、蛋白质浓度、有机溶剂与助剂种类和比例、萃取温度对前萃取率的影响,并采用二次正交旋转组合的试验方法,考察前萃取过程中离子强度、表面活性剂浓度、水相pH值对前萃取率的影响。结果表明:32.68 mmol/L CTAB/三氯甲烷-正丁醇(体积比4∶1)的反胶团体系用于前萃取水相pH为6.4,包含0.4 mol/L NaCl的葡萄皮中蛋白质的浸提液,前萃取率可达56.54%。理想的前萃取条件是:pH 6.4、NaCl浓度0.4 mol/L、CTAB浓度32.68 mmol/L、蛋白质浓度1 mg/mL、萃取温度30℃。在该条件下,采用pH 3.8、后萃取温度20℃、0.8 mol/L NaCl水相进行后萃取,后萃取率可达71.29%。