基于微生物和代谢组学研究葡萄籽原花青素对鹅肠道健康的影响

本研究基于微生物和代谢组学方法,探讨饲粮添加葡萄籽原花青素(GSPs)对鹅肠道菌群和代谢物的影响。选择体重相近的35日龄四川白鹅144只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复6只。对照组饲喂基础饲粮,3个试验组分别在基础饲粮中添加50、100和150 mg/kg GSPs。预试期7 d,正试期21 d。在63日龄时,每个重复随机选取1只鹅屠宰:取盲肠,测定组织形态指标;取盲肠内容物,测定肠道菌群和代谢物。结果表明:1)与对照组相比,饲粮添加50 mg/kg GSPs显著提高鹅盲肠绒毛高度(P<0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加GSPs显著提高鹅盲肠菌群Chao1指数、可观测物种(observed_species)数和PD_whole_tree值(P<0.05),饲粮添加50和100 mg/kg GSPs显著提高盲肠菌群Shannon指数(P<0.05)。在门水平上,与对照组相比,各GSPs添加组盲肠厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度提高,盲肠拟杆菌门(Bacteroidota)相对丰度降低;100和150 mg/kg GSPs添加组盲肠变形菌门(Proteobacteria)相对丰度降低。在科水平上,与对照组相比,饲粮添加GSPs提高了盲肠瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)、梭菌UCG-014(Clostridia_UCG-014)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)和产粪甾醇真细菌群([Eubacterium]_coprostanoligenes_group)的相对丰度,降低了盲肠颤螺菌科(Oscillospiraceae)、理研菌科(Rikenellaceae)和拟杆菌科(Bacteroidaceae)的相对丰度。在属水平上,与对照组相比,饲粮添加GSPs提高了盲肠梭菌UCG-014相对丰度,降低了拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度;饲粮添加50和100 mg/kg GSPs提高了盲肠产粪甾醇真细菌群和粪杆菌属(Faecalibacterium)的相对丰度。3)50、100和150 mg/kg GSPs添加组与对照组之间的盲肠差异代谢物数量分别为23、18和36种[变量投影重要性(VIP)>1,P<0.05]。与对照组相比,50、100和150 mg/kg GSPs添加组共有差异代谢物亚精胺表达丰度显著下调(P<0.05)。京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路富集分析结果表明,GSPs主要通过β-丙氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢以及丙酸盐代谢等途径发挥作用。4)与对照组相比,饲粮添加GSPs显著提高鹅盲肠乙酸和丙酸含量(P<0.05),饲粮添加50和100 mg/kg GSPs显著提高盲肠丁酸含量(P<0.05)。综上所述,饲粮添加GSPs可提高鹅盲肠菌群多样性和丰富度,促进有益菌增殖,通过调节肠道菌群和代谢物改善鹅肠道健康。

葡萄籽原花青素提取物对心肌梗死大鼠肾素-血管紧张素系统及AQP2蛋白表达的影响

目的:探讨葡萄籽原花青素提取物(GSPE)对心肌梗死大鼠肾素血管紧张素-系统及水通道蛋白2(AQP2)表达的影响。方法:将55只无特定病原体(SPF)级Sprague-Dawley(SD)大鼠按照随机数字表法分为健康组、模型组、辛伐他汀组、GSPE低剂量组及GSPE高剂量组,每组11只。除健康组外其余大鼠均采用冠状动脉结扎法制备心肌梗死模型,建模成功后,GSPE低剂量组、高剂量组大鼠分别灌胃100 mg/kg、400 mg/kg葡萄籽原花青素溶液,辛伐他汀组灌胃40 mg辛伐他汀溶液。苏木精-伊红(HE)染色后观察心肌组织形态;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端转移酶标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;超声心动图监测心功能;放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血浆肾素活性(PRA)、醛固酮水平;免疫印迹法检测心肌组织中AQP2、B细胞淋巴瘤/白血病2号基因(Bcl-2)及半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白水平。结果:与健康组比较,模型组大鼠左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)升高,左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短分数(LVFS)降低(P<0.05);与模型组比较,GSPE低剂量组、GSPE高剂量组及辛伐他汀组LVEDD、LVESD降低,LVEF、LVFS升高(P<0.05),GSPE低剂量组、GSPE高剂量组间比较差异有统计学意义,而GSPE高剂量组与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与健康组比较,模型组大鼠AngⅡ、PRA、醛固酮升高(P<0.05);与模型组比较,GSPE低剂量组、GSPE高剂量组及辛伐他汀组AngⅡ、PRA、醛固酮降低(P<0.05)。健康组、模型组、GSPE低剂量组、GSPE高剂量组及辛伐他汀组的心肌细胞凋亡率分别为(5.11±0.33)%、(46.22±3.97)%、(28.46±3.77)%、(15.42±2.33)%及(16.34±2.57)%,各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与健康组比较,模型组大鼠心肌组织中AQP2、Caspase-3蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,GSPE低剂量组、GSPE高剂量组、辛代他汀组大鼠心肌组织中AQP2、Caspase-3蛋白水平降低,Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05)。结论:GSPE对心肌梗死有保护作用,可改善心功能水平,减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控AQP2蛋白表达有关。

基于转录组测序分析葡萄籽原花青素对HepG2细胞基因及其相关功能的影响

目的:基于转录组测序分析葡萄籽原花青素对HepG2细胞基因及相关功能的影响,明确原花青素处理HepG2细胞的关键基因及代谢通路。方法:通过转录组测序,筛选差异基因,基因功能注释和KEGG通路的富集分析,进行葡萄籽原花青素处理细胞后的转录组学研究。结果:葡萄籽花青素处理HepG2细胞后主要富集到的生物学过程为细胞过程、代谢过程、生物调控过程、免疫系统过程、繁殖调节、生长调节。细胞凋亡的12个关键差异基因与TNF、p53、MAPK、PI3K-Akt、NF-κB信号通路密切相关。结论:细胞凋亡与TNF信号通路、p53信号传导途径、PI3K/Akt信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路密切相关。

葡萄籽原花青素对不同生长阶段猪生长性能的影响

试验旨在研究饲粮中添加葡萄籽原花青素对不同阶段猪生长性能的影响。试验选取48头体重相近的“杜×长×大”三元杂交猪,随机分为4组,每组3个重复,每个重复4头猪。试验分3个生长阶段进行,对照组始终饲喂基础饲粮,试验组在第Ⅰ阶段(断奶仔猪阶段)的基础饲粮中分别添加50、100、150 mg/kg的GSPs,第Ⅱ阶段(生长猪阶段)分别添加100、150、200 mg/kg的GSPs,第Ⅲ阶段(育肥猪)分别添加150、200、250 mg/kg的GSPs进行饲喂。结果发现,在断奶仔猪阶段,饲料中添加100 mg/kg的GSPs显著提高了ADG和ADFI(P<0.05);在生长猪阶段,饲料中添加150 mg/kg的GSPs显著提高了ADG和ADFI,显著降低了F/G(P<0.05);在育肥猪阶段添加GSPs没有显著的促进作用,添加250 mg/kg的GSPs反而降低了育肥猪的生长性能。试验表明不同生长阶段猪饲料中添加适量的GSPs对断奶仔猪和生长猪的生长性能有一定的促进作用。

葡萄籽原花青素对高精料育肥绵羊肝脏炎症反应、抗氧化功能的影响及代谢组学分析

本试验旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料育肥绵羊肝脏形态结构、肝脏功能、抗氧化功能及炎症反应的影响,通过非靶向代谢组学分析肝脏代谢变化。试验选取48只日龄、体重[(22.75±1.20)kg]相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每组12只羊。基础饲粮精粗比为70∶30,对照组饲喂基础饲粮,各试验组在饲喂基础饲粮的同时分别再每天补饲10(LGSPs组)、20(MGSPs组)、40 mg/kg BW GSPs(HGSPs组)。试验羊单栏饲养,自由采食、饮水,GSPs于每次晨饲前单独混合于100 g基础饲粮中饲喂。试验期60 d,其中预试期15 d。结果表明:1)对照组绵羊肝细胞肿胀、空泡化严重,各GSPs添加组肝脏组织损伤均有不同程度缓解。2)随着GSPs添加水平的提高,绵羊血清总蛋白和白蛋白含量线性升高(P<0.05),血清天冬氨酸转氨酶和谷丙转氨酶活性线性降低(P<0.05);肝脏组织总抗氧化能力(T-AOC)呈二次曲线变化,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性线性升高,丙二醛(MDA)含量线性降低(P<0.05);肝脏组织中髓过氧化物酶(MPO)活性线性降低,炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量线性降低(P<0.05)。与对照组相比,MGSPs和HGSPs组血清脂多糖(LPS)和脂多糖结合蛋白(LBP)含量显著降低(P<0.05)。3)随着GSPs添加水平的提高,肝脏组织中甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量线性降低(P<0.05)。4)非靶向代谢组学结果表明,MGSPs组与对照组间共有99种差异代谢物,其中67种脂类物质。99种差异代谢产物中71种显著上调,28种显著下调。共有差异代谢物富集在癌症中的胆碱代谢、甘油磷脂代谢、逆行内源性大麻素信号、自噬-其他/动物等潜在靶向通路。综上所述,GSPs可以提高高精料饲粮条件下绵羊肝脏抗氧化功能,降低炎症因子含量,并可能通过调节肝脏脂质代谢、胆碱代谢及肝细胞自噬共同应答肝脏炎性反应和氧化应激,缓解炎性损伤。

葡萄籽原花青素对饲喂高精料绵羊结肠上皮屏障的影响及作用机制研究

【目的】探究葡萄籽原花青素(GSPs)对高精料绵羊结肠上皮屏障的影响及通过Nrf2/ARE通路保护结肠上皮损伤的作用机制。【方法】选取48只120日龄、体重(22.75 kg±1.20 kg)相近的杜寒F1代杂交公羔羊,随机分为4组,每组12只羊。各组试验羔羊基础饲粮中GSPs的添加量分别为0(对照组,CON)、10(10GSPs组)、20(20GSPs组)、40(40GSPs组)mg/kg BW。试验期60 d,其中预试期15 d,正试期45 d。正试期结束次日早晨每组屠宰6只羊,采集结肠组织进行形态学和炎性细胞浸润分析,检测结肠组织白细胞介素2(IL-2)、IL-4、前列腺素E2(PGE2)等炎症因子水平及核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)等相关基因和蛋白表达量。【结果】(1)对照组羔羊结肠黏膜上皮细胞严重缺失,固有层裸露,肠腺排列疏松,间隙增宽,紧密连接蛋白缺失、受损,而20GSPs和40GSPs组羔羊结肠形态结构和紧密连接蛋白分布表达正常;(2)随着GSPs添加量的升高,羔羊结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)酶活性及一氧化氮(NO)、PGE2、IL-2水平线性降低(P<0.05);(3)与对照组相比,20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中Nrf2、OH-1基因和蛋白表达量均显著升高(P<0.05),40GSPs组结肠组织中GPx4基因表达量升高(P<0.05);(4)与对照组相比,20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中Toll-样受体4(TLR4)基因和蛋白表达量均显著降低(P<0.05),40GSPs组结肠组织中核因子κB(NF-κB)P65基因和蛋白表达量均显著降低(P<0.05);20GSPs和40GSPs组羔羊结肠组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因和蛋白及IL-1β蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】GSPs可以通过激活Nrf2通路,抑制NF-κB炎症信号通路活化,降低结肠组织局部炎症,缓解饲喂高精料绵羊结肠上皮组织损伤。

葡萄籽原花青素在心肌梗死中的研究现状

葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)是一种从葡萄籽提取分离的天然化合物,属于多酚物质,具有抑制氧化应激、细胞凋亡、炎症反应等多种作用。心肌梗死(myocardial infarction,MI)是由于冠状动脉病变而引起心肌细胞急性、持续性缺血缺氧而导致的局部心肌组织坏死,对患者的生存及预后造成了极大的威胁。目前,有很多研究指出GSP对多种心血管系统疾病的防治具有着积极的效果,并且在MI的发生发展进程中,给予GSP的干预能发挥出关键性的作用。基于此,本文就GSP在心肌梗死中发挥的作用作以综述。

葡萄籽原花青素对小麦面团流变特性及面条品质的影响

为扩大小麦粉的应用范围和改善面条品质,本研究在小麦粉中添加0.25%、0.50%、0.75%、1.00%(w/w)的葡萄籽原花青素(GSP),测定了面团的流变特性、水分分布、质构特性,以及面条的蒸煮特性、消化特性和感官特性,使用扫描电子显微镜(SEM)观察了添加原花青素后面条的微观结构,分析了原花青素对小麦面筋蛋白结构特性的影响。结果表明,随原花青素添加量(0~0.75%,w/w)的增大,面团的弹性模量(G')和粘性模量(G")(G'>G")、硬度、弹性、粘附性上升,最大拉伸阻力和拉伸距离分别增大了7.22 g和11.16 mm,面团的流变特性和质构特性有所改善;横向弛豫时间T2左移,自由水含量下降,说明面团的持水性增强。面条的耐煮性提高,水解率与血糖生成指数(GI)明显下降,从未添加GSP时的68.45降低到61.73(添加量为1.00%);在GSP添加量为0.75%时面筋蛋白中二硫键含量最高,游离巯基含量最低,感官评分最高,面条具有软弹、劲道、口感爽滑的特点。综上,GSP可以通过改善面筋蛋白网络结构和降低面条的GI值,提高产品食用品质,可作为一种潜在的天然面粉改良剂。

葡萄籽原花青素对樱桃谷肉鸭生长性能、免疫功能和抗氧化能力的影响

文章旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对樱桃谷肉鸭生产性能、免疫功能和抗氧化能力的影响。试验将480只体重相近、健康的1日龄樱桃谷肉鸭随机分成4组,每组6个重复,每个重复20只鸭。空白对照组饲喂基础日粮,其他各组分别在基础日粮中添加50、75和100 mg/kg的葡萄籽原花青素。结果显示,(1)在平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)方面,与对照组相比,75 GSPs组、100 GSPs组樱桃谷肉鸭均显著高于对照组(P<0.05)。(2)与对照组相比,添加75 mg/kg GSPs樱桃谷肉鸭血清中免疫球蛋白G(IgG)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05)。(3)与对照组相比,添加不同含量GSPs各组血清过氧化物酶(CAT)和总抗氧化力(T-AOC)显著提升(P<0.05),75 GSPs组和100 GSPs组的谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和血清超氧化歧化酶(SOD)均显著提高(P<0.05),血清丙二醛(MDA)浓度显著降低(P<0.05)。研究表明,在樱桃谷肉鸭日粮中添加葡萄籽原花青素可提高樱桃谷肉鸭的ADG,增强免疫功能,改善抗氧化能力,日粮中葡萄籽原花青素添加量75 mg/kg效果较好。

葡萄籽原花青素调控Nrf2/HO-1通路减弱多柔比星诱导的心脏毒性

目的:观察葡萄籽原花青素对多柔比星(DOX)诱导的心脏毒性以及核因子E2相关基因(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路的作用。方法:通过DOX构建小鼠急性心脏毒性模型,本实验分为对照组(正常小鼠)、葡萄籽原花青素组、DOX组、DOX+葡萄籽原花青素组、DOX+葡萄籽原花青素+ML385组。超声心动图检查小鼠心功能;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠心肌病理改变;原位末端标记测定法(TUNEL)检测小鼠心肌细胞凋亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平;试剂盒检测心肌组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)测定Nrf2/HO-1通路蛋白表达水平。结果:与对照组比较,DOX组小鼠心肌损伤加重,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD),血清CK-MB、IL-6、IL-1β水平及心肌组织ROS、MDA及心肌细胞凋亡率升高(P<0.05),射血分数(EF)、短轴缩短分数(FS)、心肌组织SOD、Nrf2、HO-1蛋白水平降低(P<0.05);葡萄籽原花青素组小鼠心肌损伤,LVESD、LVEDD、EF、FS水平,血清CK-MB、IL-6、IL-1β水平,心肌组织ROS、MDA、SOD、Nrf2、HO-1蛋白,心肌细胞凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05)。与DOX组比较,DOX+葡萄籽原花青组小鼠心肌损伤减轻,LVESD、LVEDD降低,血清CK-MB、IL-6、IL-1β水平降低,心肌组织ROS、MDA、心肌细胞凋亡率降低(P<0.05),EF、FS及心肌组织SOD、Nrf2、HO-1蛋白水平升高(P<0.05);与DOX+葡萄籽原花青素组比较,DOX+葡萄籽原花青素+ML385组小鼠心肌损伤加重,LVESD、LVEDD及血清CK-MB、IL-6、IL-1β水平、心肌组织ROS、MDA、心肌细胞凋亡率升高(P<0.05),EF、FS、心肌组织SOD、Nrf2、HO-1蛋白水平降低(P<0.05)。结论:葡萄籽原花青素可能通过激活Nrf2/HO-1通路,对DOX诱导的心脏毒性小鼠发挥保护作用。

葡萄籽原花青素-糯米淀粉复合物性质的结构基础

为改善糯米淀粉的性质,以糯米淀粉为原料,添加不同比例的葡萄籽原花青素,制备成葡萄籽原花青素-糯米淀粉复合物,并对其性质和结构进行分析。结果表明,随着葡萄籽原花青素比例的递增(2%、4%、6%、8%、10%),复合物的溶解度增加了12.68%,膨胀度提高了20.11%;透明度逐渐降低;析水率降低了27.24%;X射线衍射显示出复合物经糊化后晶体结构被破坏;傅里叶红外光谱显示3 500-3 100 cm-1峰宽增加和约1 700 cm-1羟基弯曲振动波数发生位移;葡萄籽原花青素的添加改善了糯米的性质和结构特征。

自噬在葡萄籽原花青素改善氟致SH-SY5Y细胞毒性中的作用

目的探究自噬过程在葡萄籽原花青素提取物(GSPE)缓解氟致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞毒性中的作用。方法用氟化钠(60 mg/L)处理SH-SY5Y细胞24 h构建氟染毒细胞模型,随机分为对照组、氟化钠组、氟化钠+低剂量GSPE组、氟化钠+中剂量GSPE组、氟化钠+高剂量GSPE组;采用细胞计数试剂-8法(CCK-8法)检测各组细胞活力值变化;采用Hoechst33342染色分析各组细胞凋亡水平变化;采用免疫荧光方法分析各组细胞LC3表达情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cleaved-caspase 3、cleaved-PARP、LC3、p62等蛋白表达情况。随后纳入雷帕霉素重新分组,检测各组cleaved-PARP、LC3、p62等蛋白表达情况,并采用Hoechst33342染色分析各组细胞凋亡水平变化。结果与对照组比较,氟化钠组SH-SY5Y细胞凋亡水平显著提高(P<0.05),经GSPE干预后细胞活力上升且细胞自噬水平上升(P<0.05)。与氟化钠组比较,雷帕霉素干预可以有效抑制细胞凋亡,且雷帕霉素与原花青素联合后细胞自噬水平进一步提升(P<0.05)。结论GSPE能够抑制氟化钠诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其作用可能与激活自噬有关。

日粮添加葡萄籽原花青素对育肥猪生长性能的影响

以“杜×长×大”三元杂交育肥猪为研究对象,研究在育肥猪基础日粮中添加葡萄籽原花青素对其生长性能产生的影响。随机选择60头初体重相近的“杜×长×大”三元杂交育肥猪,在饲喂基础日粮的条件下,设置3个处理,分别在日粮中添加150、200和250mg/kg葡萄籽原花青素,每个处理4个重复,每个重复5头,比较日粮添加葡萄籽原花青素对育肥猪生长性能,试验期90 d。各处理间料重比和日均采食量比较无显著差异(P>0.05);日粮中添加200mg/kg葡萄籽原花青素时,育肥猪末重、日均增重显著高于150 mg/kg和250 mg/kg两个处理(P <0.05),葡萄籽原花青素添加量为150 mg/kg和250 mg/kg时,末重、日均增重无显著差异(P>0.05)。在育肥猪基础日粮中添加葡萄籽原花青素对其生长性能有显著影响,本试验条件下,以添加量200 mg/kg为最佳,育肥猪生长性能最理想。

葡萄籽原花青素的生物学功能及其在畜禽养殖中的应用研究进展

葡萄籽原花青素(GSP)是从葡萄籽中提取的多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗应激、调节免疫力、调节肠道菌群等生物学功能,目前在畜禽养殖中也有一定的应用。本文通过对GSP的生物学功能及其在畜禽生产中的应用研究现状进行综述,以期为GSP在畜禽养殖中进一步研究和开发提供理论参考。

葡萄籽原花青素对育肥猪生长性能、养分消化及粪便菌群的影响

试验旨在研究葡萄籽原花青素(Grape Seed Procyanidins,GSPs)对育肥猪生长性能、养分消化以及粪便菌群的影响。选取96头平均体重为70.16 kg的杜×长×大三元杂交猪按照单因素完全随机设计分为4个组,每组6个重复栏,每栏4头猪。对照组饲喂基础日粮,GSPs组在基础日粮中分别添加100、150、200 mg/kg GSPs。预试期5 d,试验期28 d。结果表明:日粮中添加不同浓度的GSPs对育肥猪生长性能无显著影响,但降低了粗蛋白质的表观消化率(P<0.001);150、200 mg/kg GSPs组有机物的表观消化率低于对照组(P<0.001);随着GSPs添加量的增加,猪粪便中厚壁菌门的相对丰度降低(P<0.05),拟杆菌门升高(P<0.05),变形菌门降低(P<0.05);添加GSPs后乳杆菌科、梭菌科、瘤胃菌科的UCG-005、UCG-002、UCG-014菌属的相对丰度降低,而普雷沃氏菌科_NK3B31_group、普雷沃氏菌科_UCG-001、拟普雷沃氏菌属、产粪甾醇真细菌的相对丰度增加。由此可见,育肥猪日粮中添加GSPs虽然降低了养分的消化率,但是提高了一些有益菌的丰度,降低了一些病原菌的丰度,改善了菌群组成,因而促进了肠道健康,对育肥猪的生长性能未产生显著影响。

葡萄籽提取物原花青素通过LncRNA NBR2/miR-650调节EMT抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的探讨葡萄籽提取物原花青素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)NBR2/微小RNA(miR)-650并调节上皮间充质转化(EMT)来影响肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移和侵袭。方法将肝癌细胞Hep3B分为NC组(未处理),低、中、高剂量组(给予25、50、100μg/ml葡萄籽提取物原花青素),si-NC组,si-LncRNA NBR2组,si-NC+高剂量组、si-LncRNA NBR2+高剂量组,anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,anti-miR-650+si-LncRNA NBR2+高剂量组。采用Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、EMT过程E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达,细胞计数试剂盒(CCK)-8、Transwell法和定量RT-PCR(qRT-PCR)分析细胞增殖、迁移、侵袭与LncRNA NBR2、miR-650的表达。双荧光素酶活性检测LncRNA NBR2和miR-650的靶向结合。结果低、中、高剂量组葡萄籽提取物原花青素作用的肝癌细胞Hep3B CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量、增殖能力、迁移数量、侵袭数量、miR-650表达量均低于NC组,LncRNA NBR2表达量高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组葡萄籽提取物原花青素作用的肝癌细胞Hep3B细胞中E-Cadherin蛋白表达量高于NC组,N-Cadherin、Vimentin蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-LncRNA NBR2组的肝癌细胞Hep3B细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量、增殖能力、迁移和侵袭数量均比si-NC组高,差异有统计学意义(P<0.05)。si-LncRNA NBR2+高剂量组肝癌细胞Hep3B细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达量、增殖能力、迁移和侵袭数量均高于si-NC+高剂量组,E-Cadherin蛋白表达量低于si-NC+高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA NBR2靶向调控miR-650的表达。anti-miR-650+si-LncRNA NBR2+高剂量组肝癌细胞Hep3B CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin、Vimentin蛋白、LncRNA NBR2表达量及增殖能力、迁移和侵袭数量均低于anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,E-Cadherin蛋白表达量高于anti-miR-NC+si-LncRNA NBR2+高剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄籽提取物原花青素通过上调LncRNANBR2靶向下调miR-650并调节EMT,来抑制肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移和侵袭。

低共熔溶剂温浸提取葡萄皮籽渣中原花青素的工艺优化研究

目的采用低共熔溶剂温浸提取葡萄皮籽渣中原花青素,优化主要影响因素,建立绿色高效的提取工艺。方法联合单因素考察与中心组合实验设计,以葡萄皮籽渣中原花青素提取含量为评价指标,逐步优选提取溶剂、提取方法以及低共熔溶剂含水量、料液比、提取温度、提取时间等工艺参数。结果提取工艺是以含水量16.47%的氯化胆碱-乳酸(1∶2)为提取溶剂,料液比为1∶10.63,在50℃、磁力搅拌提取40 min条件下原花青素提取含量达143.53 mg·g^(-1),是传统的乙醇回流提取工艺的2.3倍;实验结果与响应面模型预测值接近。结论相较于传统乙醇回流浸提法,低共熔溶剂温浸法提取葡萄皮籽渣中原花青素的效率明显提高。该方法具有简便、高效特点,可为低共熔溶剂提取天然活性产物提供参考。

葡萄籽原花青素提取物预灌胃对造影剂诱导糖尿病大鼠急性肾损伤的预防作用观察

目的观察葡萄籽原花青素提取物预灌胃对造影剂诱导糖尿病大鼠急性肾损伤的预防作用,并探讨可能作用机制。方法50只SD肥胖大鼠,腹腔注射1%链脲佐菌素(40 mg/kg),41只成功建成糖尿病大鼠模型,随机分为DM组8只、CM组9只、葡萄籽原花青素提取物低剂量组8只、中剂量组8只、高剂量组8只,另取10只肥胖大鼠为空白对照组(NC组),1 mL/kg腹腔注射柠檬酸缓冲液;低、中、高剂量组大鼠每日分别用50、250、500 mg/kg的葡萄籽原花青素提取物灌胃1次,连续3天,第3天灌胃24 h时尾静脉注射碘海醇(1.8 g I/kg);NC组、DM组、CM组大鼠每日用10 mL/kg生理盐水灌胃1次,第3天灌胃24 h时,NC组、DM组尾静脉注射5 ml/kg生理盐水;CM组尾静脉注射碘海醇(1.8 g I/kg)。末次给药48 h时各组大鼠断尾采血,检测血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN),采血后处死各组大鼠,取肾组织检测肾组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),采用原位缺口末端标记法测算各组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数,采用Western Blotting法检测各组大鼠肾组织核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)通路相关醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素单加氧酶-1(HO-1)、Nrf2、Keap1蛋白。结果与NC组比较,CM组及低剂量组血清SCr、BUN水平高(P均<0.05)。与CM组比较,NC组、DM组、低中高剂量组血清SCr、BUN水平低(P均<0.05);与低剂量组比较,中、高剂量组大鼠血清SCr、BUN水平低(P均<0.05)。与NC组比较,DM组、CM组、低中剂量组肾组织匀浆SOD水平低,DM组、CM组及低剂量组肾组织匀浆MDA水平高(P均<0.05)。与CM组比较,DM组、低中高剂量组肾组织匀浆组SOD水平高、MDA水平低(P均<0.05)。与CM组比较,中、高剂量组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数小(P均<0.05)。与NC组比较,CM组大鼠肾组织Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量低,中高剂量组大鼠肾组织Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量高(P均<0.05);与CM组比较,低中高剂量组大鼠肾组织Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量高(P均<0.05);与中剂量组比较,低剂量组大鼠肾组织Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论葡萄籽原花青素提取物可改善尾静脉注射造影剂糖尿病大鼠的肾损伤程度,且500 mg/kg时效果最好。葡萄籽原花青素提取物可能通过激活Nrf2—Keap1信号通路,预防造影剂诱导的糖尿病大鼠的急性肾损伤。

日粮中添加葡萄籽原花青素对育肥猪生长性能及血液生化指标的影响

文章旨在研究日粮中添加葡萄籽原花青素(Gsp-s)对生长育肥猪血液生化指标的调节作用及对生长性能的影响,试验将128头育肥猪随机分为4组,每组4个重复,每个重复8头猪,对照组饲喂基础日粮,P1、P2、P3组分别在基础日粮中添加10g、200、300 mg/kg Gsp-s,试验为期45 d。结果显示,各组料重比无显著差异(P>0.05);P1、P2组平均日采食量(ADFI)、日平均增重(ADG)、末重(FW)均显著高于对照组、P3组(P<0.05);P1组、P2组血清尿素氮(UN)含量显著低于对照组、P3组(P<0.05);与P1组、P3组和对照组相比,P2组血清球蛋白(GLB)、白蛋白(ALB)含量显著提高(P<0.05),低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)水平显著降低(P<0.05)。从本试验所得结果可以看出,育肥猪日粮中添加葡萄籽原花青素后,对生长性能指标及血液生化指标变化有明显影响,其中以200 mg/kg的添加效果最佳。

葡萄籽原花青素对肉鸡生长性能和肉品质风味的影响

文章旨在研究葡萄籽原花青素(GSPs)对肉鸡生长性能和肉品质风味的影响。试验将480只1日龄健康状况良好的白羽肉鸡随机分为4组,每组8个重复,每个重复15只。分别向基础饲料中添加0、40、80、160mg/kg的GSPs作为试验日粮。试验持续42d。试验结果表明,日粮添加80和160mg/kg的GSPs可显著提高肉鸡42日龄体重和平均日增重(P<0.05);日粮添加GSPs对肉鸡平均日采食量无显著影响(P>0.05);日粮添加160mg/kgGSPs显著降低肉鸡料重比(P<0.05)。日粮中添加80和160mg/kgGSPs显著提高肉鸡胸肌pH24h(P<0.05);日粮添加80mg/kgGSPs显著降低肉鸡胸肌的L^(*)值(P<0.05);日粮添加160mg/kgGSPs显著提高肉鸡胸肌的a^(*)值(P<0.05);日粮添加GSPs对肉鸡胸肌pH45min、b^(*)、滴水损失和蒸煮损失无显著影响(P>0.05)。日粮添加160mg/kgGSPs显著提高肉鸡胸肌风味氨基酸谷氨酸和甘氨酸含量(P<0.05);日粮添加80mg/kgGSPs显著增加肉鸡胸肌中肌苷酸的含量(P<0.05);日粮添加80和160mg/kgGSPs显著增加风味氨基酸含量(P<0.05);日粮添加GSPs对肉鸡胸肌天门冬氨酸、丙氨酸和其他必需氨基酸含量无显著影响(P>0.05)。综上所述,日粮添加GSPs对肉鸡生长性能和肉品质有一定积极作用,本试验条件下,肉鸡日粮GSPs最适添加量为160mg/kg。