赣产狭叶獐牙菜化学成分和增加细胞葡萄糖消耗的研究

目的 研究江西产的龙胆科獐牙菜属植物狭叶獐牙菜90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分的化学成分。方法选取江西产的狭叶獐牙菜,用90%的乙醇提取后,依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到各部位的萃取物浸膏。对各部位进行体外的HepG2细胞葡萄糖消耗实验筛选出活性部分,对活性部分进行化学成分研究。结果 体外实验显示,乙酸乙酯萃取部分较好。采用各种柱色谱法对乙酸乙酯部分进行化学成分分离,得到化合物15个,全部为已知化合物,其中山酮及其苷12个,四氢山酮苷1个,环烯醚萜2个。通过波谱数据分析(^(1)HNMR,^(13)CNMR)和文献对照鉴定了化合物的结构,其中化合物1~15为首次从狭叶獐牙菜中分离得到。结论 狭叶獐牙菜乙酸乙酯部分增加细胞葡萄糖消耗的作用可能与其富含的山酮及其苷类成分有关。

桑白皮等中药提取物对胰岛素促进离体肝脏葡萄糖消耗的影响

目的利用大鼠离体肝脏灌流技术评价中药提取物在胰岛素存在时对离体肝组织消耗葡萄糖的影响。方法采用离体肝灌流技术,将中药提取物加入灌流液中,观察灌流液中谷丙转氨酶(ALT)及葡萄糖浓度的变化,用以评价中药提取物在胰岛素存在时对离体肝脏消耗葡萄糖的影响与肝脏损伤状况。结果受试的中药提取液在120 m in内对灌流液中谷丙转氨酶没有显著性影响,桑白皮、桑枝、桑寄生提取物能显著降低灌流液中葡萄糖的浓度。结论桑白皮、桑寄生、桑枝提取物在胰岛素存在时能增加离体肝脏葡萄糖的消耗。

蜕皮甾酮对HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

目的 探讨蜕皮甾酮体外降糖的作用特点或机制,即能否通过刺激胰岛素分泌而产生降糖作用。方法 检测HepG2细胞24 h培养液中葡萄糖的消耗量;另外测定βTC3细胞胰岛素的释放量。结果 蜕皮甾酮在1×10^-6～10^-4 mol·L^-1浓度范围内可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加（44%～77%）；蜕皮甾酮的降糖效能随着培养液中葡萄糖浓度的升高而降低；胰岛素对蜕皮甾酮的降糖作用没有明显的影响。蜕皮甾酮没有刺激βTC3细胞胰岛素分泌的作用。结论 蜕皮甾酮可通过肝细胞发挥非胰岛素依赖的降糖作用，但不能刺激胰岛素的分泌。

苦瓜皂苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

采用高浓度的胰岛素诱导HepG2细胞出现葡萄糖代谢异常,从胰岛素的添加量和作用时间角度探讨建立胰岛素抵抗细胞(HepG2/IR)模型的最佳条件;分别设立阴性对照组、胰岛素抵抗模型组、盐酸吡格列酮阳性对照组以及苦瓜皂苷干预组(100、300、500、700μg/mL),利用葡萄糖测定试剂盒检测各组葡萄糖消耗量,同时MTT法评价苦瓜皂苷对HepG2/IR细胞活性的影响。结果表明,30μg/mL胰岛素诱导处理HepG2细胞36h是产生胰岛素抵抗的最适条件。与HepG2/IR模型组相比,300μg/mL的苦瓜皂苷不仅可以显著改善HepG2/IR细胞的葡萄糖消耗量,还能提高其细胞活性。

蜂王浆冻干粉对HepG2细胞葡萄糖消耗作用及对糖尿病小鼠降糖作用的实验研究

目的:研究蜂王浆冻干粉体内外降糖作用。方法:采用与人肝细胞表型相似的HepG2细胞,检测24h后培养液中葡萄糖的消耗量,用MTT法监测细胞增殖的情况;以四氧嘧啶造成小鼠糖尿病模型,观察蜂王浆对糖尿病模型小鼠的降糖作用。结论:蜂王浆冻干粉可使高糖状态下HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加,对胰岛素刺激的HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加有协同作用;能降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖。

女贞子中齐墩果酸含量测定及促进葡萄糖消耗体外细胞实验研究

目的:测定10批不同批次女贞子中齐墩果酸含量,并对女贞子醇提物的降血糖作用进行体外细胞实验研究。方法:用10倍量70%乙醇水溶液提取1 h,提取多次,直至最后一次提取液中检测不到齐墩果酸含量,合并多次提取液,浓缩,通过HPLC法测定10批次不同产地女贞子中齐墩果酸的含量;用人肝癌细胞Hep G2细胞来研究女贞子醇提物的降糖作用。结果:不同批次女贞子中齐墩果酸的含量有一定差异,含量不得低于0.50%;不同浓度的女贞子醇提液均有促进细胞消耗葡萄糖的作用,且在一定范围内随浓度升高而增强。结论:女贞子药材的醇提物具有促进葡萄糖消耗的作用,值得进一步研究推广。

蒲黄总黄酮对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗及Src蛋白表达的影响

目的观察蒲黄总黄酮对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗及Src蛋白表达的影响。方法将分化成熟的C2C12骨骼肌细胞予含胰岛素及不同终质量浓度蒲黄总黄酮(0、0.1、0.25、0.5 g/L)分别干预处理8、16、24 h后,葡萄糖氧化酶法检测培养上清液葡萄糖浓度。另外,按处理方法将细胞分为对照组和蒲黄总黄酮组,蒲黄总黄酮干预16 h后,予和不予胰岛素刺激30 min,免疫印迹法检测蛋白表达,免疫共沉淀法检测Src相关信号复合物。结果蒲黄总黄酮呈时间和浓度依赖性显著促进了C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗。蒲黄总黄酮组Src蛋白表达是对照组1.72倍,而蒲黄总黄酮+胰岛素组Src蛋白表达则是胰岛素组1.67倍,差异显著(P<0.01);与胰岛素组比较,蒲黄总黄酮+胰岛素组磷酸化Src蛋白表达水平升高0.54倍,有统计学意义(P<0.01),并且Src相关信号复合物形成也显著提高。结论蒲黄总黄酮提高C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗,可能与其促进Src蛋白表达及其磷酸化水平和Src相关信号复合物形成有密切关系。

蜂王浆冻干粉对离体肝脏葡萄糖消耗的影响

目的评价蜂王浆冻干粉对离体肝组织消耗葡萄糖的影响。方法采用离体肝灌注技术,观察蜂王浆对灌注液中谷丙转氨酶(ALT)及葡萄糖浓度的变化,用以评价蜂王浆对离体肝脏吸收葡萄糖的影响与肝脏损伤状况。结果蜂王浆在180 m in内对灌注液中ALT没有显著性影响,并能降低灌注液中葡萄糖的浓度。结论蜂王浆能增加离体肝脏葡萄糖的消耗。

葡萄糖消耗试验用于体外抗真菌药物敏感性试验

目的 : 评价葡萄糖消耗试验应用于体外抗真菌药物敏感性试验的可行性。方法 : 分析 8种抗真菌药物与 4 0株临床分离菌株在仅含葡萄糖为碳源的酵母氮培养基 (YNBG)上孵育后葡萄糖的浓度变化 ,反映真菌细胞的受抑制程度 ,同时与NCCLSM2 7-A液基微量稀释法对比。结果 : 葡萄糖消耗试验在念珠菌和隐球菌的药敏测定中至少可以节省 2 0小时 ,对须癣毛癣菌则至少可节省 4 0小时 ;除两种方法测得的联苯苄唑MIC符合程度较低外 ,两种方法测得的两性霉素B、特比萘芬、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、氟康唑、环吡酮胺的MIC符合程度均较高。在评价由较低或较高浓度药物诱导的真菌细胞受抑制程度时 ,葡萄糖消耗试验更精确。结论 : 葡萄糖消耗试验具有客观量化、快捷、精确的优点 。

女贞子中8个化合物对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

目的探讨女贞子中乙酰齐墩果酸、齐墩果酸、19α-羟基-3-乙酰乌索酸、槲皮素、GI3、女贞苷、对羟基苯乙醇-O--βD-葡萄糖苷、芹菜素-6″-O乙酰-7-O-β-D-葡萄糖苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。方法采用高浓度胰岛素诱导培养HepG2细胞,建立胰岛素抵抗细胞模型,培养液中加入各化合物共同孵育,采用葡萄糖试剂盒检测培养液中的葡萄糖含量,探讨其对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果齐墩果酸、19α-羟基-3-乙酰乌索酸、GI3、对羟基苯乙醇-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-6″-O-乙酰-7-O-β-D-葡萄糖苷在不含胰岛素条件下可使胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加11.62%、17.21%、10.54%、12.08%、11.85%,加入生理浓度胰岛素后,上述化合物可使细胞葡萄糖消耗量增加12.95%、13.83%、10.84%、14.26%、17.41%。槲皮素、女贞苷在不含胰岛素条件下不增加细胞的葡萄糖消耗量,加入生理浓度胰岛素后,可使细胞葡萄糖消耗量增加15.70%、17.04%,其中槲皮素促进细胞增殖。结论齐墩果酸、芹菜素-6″-O-乙酰-7-O--βD-葡萄糖苷等增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量呈非胰岛素依赖性,其中芹菜素-6-″O-乙酰-7-O--βD-葡萄糖苷与生理浓度胰岛素有协同增强作用;女贞苷、槲皮素增加细胞葡萄糖消耗量呈胰岛素依赖性,槲皮素能显著促进细胞增殖。

桑寄生对培养的人HepG2细胞葡萄糖消耗作用的影响

目的:研究桑寄生对培养人HepG2细胞的葡萄糖消耗作用,初步探讨桑寄生的降糖作用机理。方法:采用人的培养的HepG2细胞,检测24h后培养液中葡萄糖的消耗量,用MTT法监测细胞增殖的情况。结果:桑寄生在高糖状态下可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加,对胰岛素刺激的HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加有协同作用。结论:促进外周组织的葡萄糖代谢、提高肝细胞对胰岛素的敏感性可能是桑寄生防治2型糖尿病的作用机理之一。

天麻素在L6肌管中促进葡萄糖消耗的作用和机制研究

目的研究天麻素(GSTD)在L6肌管中促进葡萄糖消耗的作用和可能机制。方法体外培养大鼠L6骨骼肌细胞并诱导分化成肌管,血清饥饿后以GSTD单独处理或与浓度为0.05 nmol/L的胰岛素联合处理24 h,以二甲双胍(Met)为阳性对照药。部分实验中L6肌管先以浓度为100 nmol/L的胰岛素处理24 h以诱导胰岛素抵抗,再进行药物处理。以试剂盒测定细胞糖消耗、L-乳酸释放和ATP产生,以Western blot和实时荧光定量反转录PCR检测目标蛋白和基因的表达水平。结果 GSTD浓度依赖性地促进L6肌管的基础糖消耗[与对照细胞比较,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)],并且显著增加胰岛素刺激的糖消耗[与单用胰岛素或GSTD处理的细胞比较,差异有统计学意义(P <0.05)]。在胰岛素抵抗状态下,浓度为500μmol/L的GSTD仍能有效促进细胞糖消耗(P <0.05)。Met处理后显著增加细胞的L-乳酸释放并抑制ATP产生[与对照细胞比较,差异有高度统计学意义(P <0.01)],但GSTD没有作用。GSTD显著上调L6肌管GLUT4蛋白和m RNA的表达,并且激活AMPK和Akt通路,表现为处理后p-AMPKα和p-Akt的水平显著增加[与对照细胞比较,差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)]。结论 GSTD作用于L6肌管显著增加其糖消耗并能克服胰岛素抵抗,其机制可能与GLUT4的上调以及AMPK和Akt通路的激活有关。

葛根素对高胰岛素环境下大鼠肝细胞葡萄糖消耗的影响

目的通过观察葛根素对高胰岛素环境下正常大鼠肝细胞株BRL的保护作用和其对葡萄糖消耗的影响,从细胞水平上初步探讨葛根素对肝细胞胰岛素敏感性的作用。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,用高胰岛素诱导其形成胰岛素抵抗细胞模型,并利用此细胞模型观察葛根素对高胰岛素环境下大鼠肝细胞葡萄糖消耗的影响。结果IR模型组的MTT值较正常对照组有所下降,而葛根素大、中剂量治疗组的MTT值更接近于正常对照组。同时IR细胞模型组对葡萄糖的消耗量显著降低(P<0.05),葛根素大、中剂量治疗组细胞的葡萄糖消耗量较IR模型组显著升高(P<0.05)。用MTT值校正后结果与校正前基本一致。结论高浓度胰岛素对BRL肝细胞株具有一定的毒性,而葛根素对此种损伤具有一定的保护作用。同时葛根素可增强肝细胞对葡萄糖的转化消耗,缓解代谢综合征。

尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗的影响

目的:研究尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞糖消耗的影响。方法:采用CCK-8法评价H4ⅡE细胞活性;高浓度胰岛素(10-6mol/L)诱导培养H4ⅡE细胞36 h,建立新的胰岛素抵抗细胞模型。葡萄糖氧化酶法检测尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞糖消耗的影响。结果:尖叶假龙胆不同提取部位浓度大于150μg/m L时,对H4ⅡE细胞活性均有明显的抑制作用。尖叶假龙胆不同提取部位中乙酸乙酯提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗影响显著,大孔树脂95%提取部位与大孔树脂70%提取部位也不同程度地影响胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗,大孔树脂30%提取部位效果不明显。结论:尖叶假龙胆乙酸乙酯提取部位改善胰岛素抵抗效果最佳,大孔树脂95%提取部位与大孔树脂70%提取部位也可不同程度地改善胰岛素抵抗作用。

香莲外洗液对念珠菌葡萄糖消耗的影响分析

目的观察香莲外洗液对念珠菌葡萄糖消耗的影响，探讨香莲外洗液对念珠菌生长的抑制情况。方法应用微量肉汤稀释法测定不同药液浓度香莲外洗液和氟康唑对3种念珠菌标准菌株ATCC22019、ATCC6258和耐药SC5314的葡萄糖消耗，以确定香莲外洗液对念珠菌生长的抑制作用。结果香莲外洗液在药浓度≥0．98mg／ml时能大大降低这3种菌株对葡萄糖的消耗，作用效能较为一致；氟康唑药浓度分别在4μg／ml、32μg／ml时ATCC22019和ATCC6258对葡萄糖消耗明显降低，而氟康唑药浓度在128μg／ml时SC5314葡萄糖消耗不降低。结论香莲外洗液在药浓度≥0．98mg／ml时念珠菌的葡萄糖消耗大大降低，并对对氟康唑天然耐药的ATCC6258和耐药SC5314念珠菌生长都有良好的抑制作用，有助于对临床难治念珠菌病的治疗。

酵母菌产酒精能力的葡萄糖消耗检测法

研究了1种检测酵母菌产酒精能力的新方法。利用酒精发酵液体培养基在厌氧条件下对产酒精酵母菌株YE-1、YE-2、YE-3进行酒精发酵培养,同时利用菌体发酵培养基在有氧条件下进行菌体培养实验作为对照。通过分光光度法检测培养基中葡萄糖的消耗量,根据所消耗的葡萄糖中用于酒精发酵的量,推算出3株酵母菌菌株在酒精发酵培养基中酒精含量分别为4.03 mg/mL、3.50 mg/mL和3.77 mg/mL,进而比较出各菌株产酒精能力的大小。

葡萄糖消耗定量分析法在粪便肠道菌群总数检测中的应用

目的建立一种以葡萄糖消耗为定量依据的肠道菌群总数分析方法。方法观察肠道菌群在生长、繁殖过程中的葡萄糖消耗规律,确定能够反映细菌生长状况的葡萄糖测定时间。通过测定已知大肠杆菌含量样本在规定培养时间内的葡萄糖剩余量,建立细菌含量和葡萄糖消耗量的关系。结果肠道菌群37℃培养5h,培养基葡萄糖含量变化明显,能较好地反映细菌生长情况。样本细菌含量与葡萄糖消耗呈正相关,Y=82.475X+2.1492,r2=0.9325,可以通过葡萄糖消耗量,计算样本细菌含量。结论该方法结果准确,操作简便。

黑花生衣色素的提取及调节C2C12肌管细胞葡萄糖消耗的作用研究

从花生加工中的副产物黑花生衣中提取纯化黑花生衣色素(BPSP),并初步探究其相关细胞生物学活性。首先,采用紫外可见(UV-vis)全光谱扫描及分光光度法对BPSP的检测条件、对温度和pH稳定性以及最佳提取条件进行了探究,发现BPSP在pH2~3、520nm可见波长时有最佳特征吸收峰,其在水溶液中比在乙醇溶液中更为稳定,BPSP水溶液在温度不高于50℃、pH为2.0的条件下稳定性最好;此外,BPSP的最佳提取条件为:70℃、pH2.0的酸性水溶液浸提15min,此条件下BPSP的提取率为7.95mg/g干黑花生衣重。进一步采用乙酸乙酯(EtOAc)萃取结合大孔树脂柱层析的方法对BPSP花色苷进行纯化,BPSP总花色苷纯度从粗提液的5.2%提高至25.4%,提高了近5倍。最后,选用纯化后的BPSP干预分化成熟的C2C12肌管细胞,发现5μg/mL剂量的BPSP能够显著增加C2C12肌管细胞对葡萄糖的消耗量(P<0.05),并且在1~5μg/mL的范围内呈现出剂量依赖关系。

D-手性肌醇对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

目的建立HepG2胰岛素抵抗细胞（IR-HepG2）模型,探讨D-手性肌醇（DCI）对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响。方法采用细胞增殖与毒性检测（CCK-8）法,观察DCI、高糖对HepG2细胞活力的影响;通过高糖持续作用、胰岛素刺激诱导HepG2细胞建立IR-HepG2模型,葡萄糖氧化酶法鉴定模型是否制备成功并检测正常HepG2细胞葡萄糖消耗量的变化和DCI对IR-HepG2葡萄糖消耗量的影响。结果 0-0.5 mmol/L浓度的DCI对HepG2细胞活性没有影响,1.0-32.0mmol/L浓度的DCI对HepG2细胞活性产生抑制作用,差异有显著性（F=36.47,P〈0.01）。35-55 mmol/L的葡萄糖对HepG2细胞活性没有影响,而65 mmol/L的葡萄糖对HepG2细胞活性产生抑制作用,差异有显著性（F=18.88,P〈0.01）。DCI在不影响细胞活性浓度范围内可明显促进IR-HepG2的葡萄糖消耗量,差异有显著性（F=172.67,P〈0.01）。结论 DCI可明显增加IR-HepG2模型葡萄糖的消耗量,对IR-HepG2模型胰岛素抵抗有显著的改善作用。

二氢三嗪类化合物的设计、合成及其促葡萄糖消耗活性研究

以芳香醛和乙酸乙烯酯为原料,经Aldol羟醛缩合反应得到中间体,再与盐酸二甲双胍反应合成一系列新型结构的标题化合物。其结构经1HNMR、13CNMR和HRMS确证。在HepG2细胞模型中对目标化合物进行了促葡萄糖消耗活性测试,结果显示大部分化合物具有一定的促葡萄糖消耗活性。其中,化合物4-氨基-3,6-二氢-2-二甲氨基-6-苯乙烯基-1,3,5-三嗪、4-氨基-3,6-二氢-2-二甲氨基-6-(2,3-二甲氧基)苯乙烯基-1,3,5-三嗪、4-氨基-3,6-二氢-2-二甲氨基-6-(3,4-二甲氧基)苯乙烯基-1,3,5-三嗪、4-氨基-3,6-二氢-2-二甲氨基-6-(2,5-二甲氧基)苯乙烯基-1,3,5-三嗪和4-氨基-3,6-二氢-2-二甲氨基-6-胡椒苯乙烯基-1,3,5-三嗪的促葡萄糖消耗活性较阳性对照药二甲双胍略强或相当,它们具有进一步开发的价值。