葡萄糖调节蛋白94和转化生长因子-β1与房颤患者预后的相关性

目的探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。方法选择因房颤行射频消融术的住院患者共202例,统一归于房颤组,再依据房颤发生及持续的时间进一步分为阵发性房颤组(n=132)和持续性房颤组(n=70);另选择窦性心律且既往无房颤心律的健康体检者作为对照组(n=55)。通过酶联免疫吸附试验测定患者的血清GRP94及TGF-β1水平,并收集基线资料。出院后以门诊或电话形式对房颤患者进行随访,利用受试者工作特征曲线和Kaplan-Meier生存分析评估血清GRP94、TGF-β1水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。结果在对照组、阵发性房颤组、持续性房颤组中,血清GRP94及TGF-β1水平依次升高。二元Logistic回归分析提示,血清TGF-β1、GRP94和体重指数是房颤发生的独立危险因素。Spearman相关性分析显示,在房颤患者血清中GRP94和TGF-β1水平呈正相关。复发组的TGF-β1高于非复发组,GRP94低于非复发组。二元Logistic回归分析表明,TGF-β1是房颤术后复发的独立危险因素,GRP94是房颤复发的独立保护因素。Kaplan-Meier曲线分析显示,GRP94高水平、TGF-β1低水平的房颤患者消融术后复发的风险低,且未复发时间更长。结论GRP94及TGF-β1水平与房颤密切相关,可能为房颤患者消融术后复发的早期识别、诊断及预防提供依据。

胃癌中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达的临床意义及与预后的相关性

目的确定葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)与胃癌(gastric cancer,GC)临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC和切缘组织中GRP78和GRP94的表达;Kaplan-Meier或卡方检验GRP78、GRP94和临床病理资料与GC术后整体生存期相关性。结果 GRP78和GRP94蛋白主要表达于胃癌细胞的胞质及胞膜,其阳性表达与淋巴结转移、TNM分期呈负相关,与分化程度正相关(P<0.05);GRP78、GRP94高表达及低表达GC患者术后平均生存时间分别为(23.51±2.32)个月和(37.54±3.24)个月、(21.31±1.46)个月和(40.02±2.19)个月,5年整体生存率分别为21.23%和41.42%、20.73%和43.86%(log-rank test,P<0.01),TNM分期、GRP78和GRP94是影响GC预后的独立因素。结论 GRP78和GRP94高表达可能是GC预后不良的分子标志物之一。

人乳腺癌中葡萄糖调节蛋白94(Grp94/Gp96)的表达及意义

目的 探讨人乳腺浸润性导管癌中葡萄糖调节蛋白 94 (glucose -regulatedprotein ,GRP94 )的表达与乳腺癌生长、浸润及转移的关系。方法 采用DakoEnvision免疫组织化学染色法对 30例乳腺癌中的GRP94进行免疫组化染色。结果 乳腺浸润性导管癌 30例 ,其中有淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 1例 ,弱阳性 5例 ,阴性 9例 ;无淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 10例 ,弱阳性 2例 ,阴性 3例 ;有淋巴结癌转移组GRP94表达低 ,无淋巴结癌转移组GRP94表达高 ;(P <0 0 5 ) ,两组之间存在显著差异。结论 在乳腺浸润性导管癌中GPR94的表达与转移有关 ,低表达者往往有转移。

葡萄糖调节蛋白94在结肠腺癌中的表达及其意义

目的探讨结肠腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及其与结肠腺癌分化程度、临床分期及转移等的关系。方法采用免疫组织化学S-P法分别检测结肠腺癌组织、结肠腺瘤组织及正常结肠组织GRP94表达情况,结合临床病理特征光学显微镜下用半定量方法对结果进行统计分析。结果正常组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有GRP94表达,其表达程度呈递增趋势。其表达程度随着细胞分化的降低、临床分期的增加及肿瘤转移而增高,与患者性别、年龄无关。结论GRP94的高表达可能参与结肠癌的发生、发展,对结肠癌肿瘤细胞有保护作用,抑制GRP94的表达有可能抑制肿瘤生长。

葡萄糖调节蛋白94在宫颈病变中的表达

目的研究葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)在宫颈病变及HPV感染中的表达及意义.方法选取2014年10月至2016年6月在昆明医科大学第二附属医院妇科门诊就诊或住院部行宫颈癌筛查(HPV、TCT),并因任一结果异常行阴道镜下活检术的患者,留取宫颈组织备用,最终根据病检结果选取正常宫颈组织40例;CIN I30例;CINII^III 30例;年龄范围为25~55岁.已行宫颈病变治疗及妊娠患者不纳入研究范围.用Western Blot法检测正常宫颈组织中以及CIN I、CINⅡ/Ⅲ组织中GRP94蛋白表达.结果正常宫颈组织中GRP94阴性、阳性表达分别占65.0%、35.0%;CINI组织中阴性、阳性分别为40.0%、60.0%;CINⅡ/Ⅲ组织中阴性、阳性分别占26.6%、73.3%.3个组阳性率总体上差异有统计学意义(P<0.05),两两比较发现:CINⅡ/Ⅲ的阳性率高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);CIN I的阳性率与正常组、CINⅡ/Ⅲ的阳性率相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 GRP94在宫颈上皮内瘤变中呈现高表达,而在正常宫颈组织中呈现低表达,GRP 94与宫颈病变进展的发生发展密切相关.

肿瘤相关糖蛋白72和葡萄糖调节蛋白94在乳腺良恶性病变组织中的表达及其意义

目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中TAG72和GRP94的表达,并进行评分。应用Kaplan-Meier法对乳腺癌患者进行生存分析。结果:乳腺癌组织中TAG72和GRP94表达的阳性率分别为68.3%和63.3%,其总评分分别为2.53±1.86和2.73±2.23;乳腺良性病变组织的TAG72和GRP94表达阳性率分别为10.0%和13.3%,其总评分分别为0.37±1.13和0.47±1.22;乳腺癌组织与乳腺良性病变组织相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。导管内癌、组织学分级为Ⅰ或Ⅱ级、肿瘤最大径≤3cm、无淋巴结转移、雌激素受体阳性、p53阴性及CA15-3阴性乳腺癌患者的TAG72和GRP94表达阳性率及其评分均明显低于浸润性导管癌(P<0.05)、组织学分级Ⅲ级(P<0.01)、肿瘤最大径>3cm(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、雌激素受体阴性(P<0.05)、p53阳性(P<0.01)和CA15-3阳性(P<0.01)的乳腺癌患者。TAG72和GRP94表达阳性的乳腺癌患者及两者均表达阳性的乳腺癌患者的术后生存期明显短于阴性表达者(P<0.01)。COX多因素分析结果显示,TAG74和(或)GRP94表达阳性均与术后生存率呈负相关,与死亡率呈正相关,均是独立的预后因素。结论:TAG72和GRP94表达在乳腺癌的发生、发展、临床生物学行为及预后方面可能具有重要作用,TAG72和(或)GRP94表达阳性的乳腺癌患者预后不良。

葡萄糖调节蛋白94在膀胱肿瘤中的表达及其对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响

目的观察葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在膀胱肿瘤组织和细胞中的表达情况,并下调膀胱肿瘤细胞内GRP94表达,检测其对肿瘤细胞凋亡及迁移能力的影响,探讨其可能机制。方法选取35例膀胱尿路上皮癌组织和35例癌旁组织,应用免疫组化方法检测GRP94在两种组织中的表达,同时应用Western blot法检测GRP94在正常膀胱上皮细胞株和膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达;设计合成可靶向结合GRP94序列的小干扰RNA(siGRP94),将其导入膀胱尿路上皮癌SW780细胞株,随后应用Western blot法检测SW780细胞内GRP94的表达情况;并分别应用流式细胞术检测凋亡率,Transwell法检测迁移能力;同时应用Western blot法检测细胞内caspase-9、Bcl-2、Bax和vimentin表达情况。结果膀胱尿路上皮癌组织中GRP94表达的平均光密度值明显高于癌旁组织(P<0.01),膀胱尿路上皮癌细胞株中GRP94表达明显高于正常膀胱上皮细胞株(P<0.01);siGRP94转染后48 h,SW780细胞内GRP94表达较空白组和阴性对照组明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显上升(P<0.01),同时迁移能力明显下降(P<0.01);凋亡调控蛋白中,caspase-9前体表达下调同时剪切体表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调同时Bax表达上调(P<0.01);细胞迁移相关蛋白波形蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论GRP94在膀胱尿路上皮癌中呈高表达,下调其表达水平可诱导膀胱肿瘤细胞发生凋亡并抑制细胞迁移能力,GRP94可能具有成为膀胱肿瘤治疗靶基因的潜力。

热休克蛋白70、葡萄糖调节蛋白94和IgG在人肺癌组织中的表达

目的:探讨热休克蛋白70(Hsp70)、葡萄糖调节蛋白94(Grp94)、IgG在人肺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学方法结合病理学图像分析系统研究40例肺癌组织中Hsp70、Grp94和IgG的表达。并用免疫荧光双标染色及激光共聚焦技术研究三者的定位关系。结果:人肺癌组织中Hsp70、Grp94、IgG都有高表达,阳性率分别为65%(26/40)、45%(18/40)和82.5%(33/40),Hsp70阳性定位胞核胞质,Grp94和IgG阳性定位主要在胞质,平均光密度值分别为(5.10±0.32)、(3.52±0.35)和(8.12±0.31)。26例Hsp70阳性的肺癌病例中有10例与IgG有共定位关系,18例Grp94与IgG有共定位关系。结论:Hsp70、Grp94和IgG在肺癌组织中高表达,提示三者在肺癌的发生发展中起重要作用;肺癌肿瘤细胞表达的IgG与Hsp70、Grp94分别存在一定共定位关系,其在肿瘤的发展中可能具有协同作用或者在肺癌组织中存在Hsp70-IgG、Grp94-IgG和Hsp70-Grp94-IgG复合物的形式。

创伤后应激障碍大鼠海马分子伴侣葡萄糖调节蛋白94表达的变化

目的观察创伤后应激障碍(PTSD)模型大鼠海马神经元分子伴侣葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达变化。方法建立单一延长应激(SPS)大鼠模型,随机分为SPS刺激后第7天组、第14天组及正常对照组,采用免疫组化、Western blot、RT-PCR方法检测各组海马神经元GRP94的表达。结果免疫组化及Western blot结果均显示:造模第7天海马神经元GRP94蛋白表达较正常对照组明显增加(P<0.05),而第14天明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示:造模第7天海马神经元GRP94 mRNA水平明显增加(P<0.05),第14天则明显降低。结论 PTSD大鼠海马GRP94蛋白水平发生了变化,为进一步研究内质网径路细胞凋亡提供了实验基础。

葡萄糖调节蛋白94在内质网应激诱导肝细胞凋亡中的调控机制研究进展

细胞内质网应激在畜禽和人类许多的应激反应中普遍存在。细胞在持续内质网应激下诱发未折叠蛋白反应并激活细胞凋亡信号通路。葡萄糖调节蛋白94(GRP94)是内质网应激的标志蛋白,并通过内质网信号途径调控细胞凋亡的发生。本文主要就GRP94及其互作蛋白对内质网应激诱导的肝细胞凋亡的调控机制,及GRP94在肝疾病中如何发挥作用进行综述,以期为畜牧上引起内质网应激的生产条件调控以及临床上与内质网应激相关细胞凋亡的肝病治疗提供参考。

乳腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94的表达及临床意义分析

目的探讨乳腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及临床意义。方法本研究所用的90对乳腺癌组织标本来源于2013年1月至2015年12月航空总医院收治的乳腺癌患者,每对组织标本包括癌组织以及癌旁正常组织。利用免疫组织化学法检测乳腺癌组织和癌旁正常组织中GRP94的表达,分析GRP94的表达与患者临床病理特征的关系。结果 69例患者进行免疫组织化学评分分析发现,乳腺癌组织中GRP94蛋白表达水平高于癌旁正常组织[(5.5±0.6)分比(2.3±0.3)分](P<0.01)。乳腺癌组织中GRP94的表达与病理分级、临床分期和分子分型有关(均P<0.05),而与患者年龄、肿瘤类型和肿瘤直径无关(均P>0.05)。结论 GRP94在乳腺癌组织中的表达明显高于正常组织,其表达与乳腺癌的发生发展密切相关。

早期急性肺栓塞患者血清中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94的表达水平及意义

目的通过观察早期急性肺栓塞患者血清中葡萄糖调节蛋白(GRP)78和GRP94的水平,探讨其在急性肺栓塞中的表达及意义。方法选择2018年1月至2020年3月大连大学附属中山医院收治的早期急性肺栓塞患者90例为肺栓塞组及40例健康成年人定义为对照组,比较两组患者血清中D-二聚体、GRP78、GRP94的水平,根据2019年欧洲心脏学会的肺栓塞诊治指南将急性肺栓塞组分为高、中、低危组(高危组:存在血流动力学障碍,中危组:右心室功能不全和/或心脏生物学标志物升高,低危组:无上述表现),比较三组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94、血气分析、肺动脉压、肺栓塞风险评分(PESI)的水平。结果两组患者年龄、性别、体质量指数比较差异无统计学意义(P>0.05),但两组患者血清中D-二聚体、GRP78、GRP94水平比较,肺栓塞组高于对照组[(3.86±1.82)mg/L比(0.31±0.15)mg/L、(2.68±0.71)μg/L比(1.64±0.38)μg/L、(1.31±0.29)μg/L比(0.98±0.13)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。高危组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94的水平及肺动脉压、PESI评分均高于低危组和中危组[(5.63±1.75)mg/L比(2.29±0.51)和(3.64±1.02)mg/L、(3.24±0.76)μg/L比(2.17±0.41)和(2.64±0.47)μg/L、(1.57±0.33)μg/L比(1.12±0.13)和(1.26±0.14)μg/L、(47.75±6.98)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)比(26.15±4.63)和(35.21±5.85)mmHg、(123.5±20.59)分比(85.5±14.31)和(102.5±13.32)分](P<0.05),中危组上述指标均高于低危组(P<0.05),高危组患者PO2水平低于低危组和中危组[(53.85±5.53)mmHg比(76.21±4.96)mmHg和(72.71±4.76)mmHg](P<0.05),中危组低于低危组(P<0.05)。三组患者血气分析pH比较差异无统计学意义(P>0.05),高危组患者血气分析PCO2水平低于中危组和低危组(P<0.05),中危组与低危组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肺栓塞组患者血清D-二聚体、GRP78、GRP94与PESI评分均呈正相关,r=0.610、0.622、0.627,P均<0.01。肺栓塞组治疗后D-二聚体、GRP78、GRP94较治疗前明显下降(P<0.05)。结论血清中GRP78、GRP94水平与急性肺栓塞有关,且其水平可以反映肺栓塞病情程度。

高血压大鼠血管平滑肌细胞内质网应激时葡萄糖调节蛋白94与C/EBP同源蛋白的表达及氨氯地平对其的干预作用

目的 通过观察高血压大鼠动脉血压和主动脉中层厚度、大鼠动脉血管平滑肌细胞内质网应激（ERS）相关因子葡萄糖调节蛋白94（GRP94）和C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达变化,探讨ERS对高血压大鼠血管重构的影响及氨氯地平对其的干预作用.方法 应用颈动脉插管法测定大鼠血压;利用计算机图像分析系统测量大鼠主动脉中层的厚度;通过免疫组化、Western Blot法检测GRP94、CHOP的表达.结果 手术组大鼠2、4、8周亚组的平均动脉压（MAP）和主动脉中层厚度、GRP94和CHOP的表达均高于相应的假手术组和氨氯地平组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 上述结果提示腹主动脉狭窄致高血压早期即可触发ERS,导致GRP94和CHOP表达增加;氨氯地平可能通过抑制高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞内质网应激反应的激活,逆转高血压所致的血管平滑肌细胞的损伤,保护血管平滑肌细胞.

抑制葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达对胃癌细胞株生长的影响

目的观察利用psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白78 （GRP78）和pSiSTRIKETM/GRP94抑制人类胃癌细胞株SGC-7901 GRP78和GRP94基因表达对胃癌细胞活性及凋亡的影响。方法构建受控于人RNA聚合酶HI启动子U6的真核表达载体，采用Lipofectamine？ 2000转染试剂进行共转染，将psiSTRIKETM/GRP78和PsiSTRIKETM/GRP94同时导人胃癌细胞内，在转染前及转染后72 h通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、间接法免疫荧光技术检测GRP78和GRP94 mRNA及蛋白水平的表达，并设立阴性对照组（只加人转染试剂）比较。设立3组：实验组（共转染组）、阴性对照组（只加人转染试剂）及空白对照组（未加任何处理），在转染72 h后用噻唑蓝（MTT）法检测胃癌细胞活性，流式细胞仪检测胃癌细胞早期凋亡。结果成功将psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94转染至SGC-7901 72 h后，与2个对照组比较，GRP78相对表达量为0.49，GRP94为0.40，与对照组比较的表达明显下降，差异有统计学意义（P 〈0.05）。MTT结果显示：在转染后48 h及72 h，与2个对照组比较，实验组胃癌细胞生长受到抑制；转染后72 h，实验组具有21. 98%的凋亡率，与空白对照组和阴性对照组比较细胞凋亡显著增多，而阴性对照组（6. 04%）与空白对照组（1.05%）比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在体外同时转染psiSTRIKETM/GRP78和psiSTRIKETM/GRP94 72 h后，胃癌细胞株SGC-7901 GRP78及GRP94表达明显降低。转染72 h后胃癌细胞活性明显受到抑制,细胞早期凋亡增多。

葡萄糖调节蛋白94和78在结肠癌中的表达及临床意义

葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein78，GRP78）和葡萄糖调节蛋白94（glucose regulated protein94，GRP94）分别是热休克蛋白（HSP）70和HSP90家族成员，是细胞为了适应内质网应激状态所产生的一组应激蛋白，在低氧、酸中毒、葡萄糖缺乏及感染等应激条件下表达增加，可在维持细胞稳态方面发挥多种功能。

肝缺血再灌注时葡萄糖调节蛋白78、葡萄糖调节蛋白94、磷酸化蛋白激酶B1及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12的表达及意义

目的动态观察大鼠肝缺血再灌注（HIRI）不同时限葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、葡萄糖调节蛋白94（GRP94）、磷酸化蛋白激酶B1（p-Akt1）及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶12（Caspase-12）的表达变化，并探讨其意义。方法将55只Wistar雄性大鼠随机分为正常组（n=5）、假手术组（n=25）、缺血再灌注组（n=25），无损伤动脉钳阻断肝血流45min后使其复流，用免疫组织化学法检测GRP78、GRP94及Caspase-12在再灌注0、3、12、24、72h时的蛋白表达，用Western blot法检测同期p-Akt1蛋白表达。结果GRP78在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（393．04±79．06），12h时达峰值（2369．38±182．53），24h（1023．02±185．61）及72h（505．19±102．89）表达开始下降，但仍高于前述各组表达水平。GRP94在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（168．47±21．08），12h时达峰值（678．80±52．62），24h（425．78±38．63）及72h（173．99±36．82）表达降低。Caspase-12在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（647．00±73．68），12h达峰值（6867．67±601．11），24h（2356．12±210．65）及72h（675．89±109．3）表达开始降低。p-Akt1在缺血再灌注组各观察时限点的表达趋势与GRP78一致，显著高于正常组及假手术组。结论大鼠肝缺血再灌注损伤可触发经内质网途经的Caspase级联反应活化；GRP78与GRP94可能通过降低内质网负荷和促进糖异生而发挥细胞保护作用；p-Akt1可能是此过程中机体通过磷酸肌醇3激酶（P13K）／Akt信号通路上调GRP78表达的重要信号分子。

沉默葡萄糖调节蛋白94对乳腺癌MCF7细胞的影响及可能的机制

目的探讨沉默葡萄糖调节蛋白94(GRP94)对乳腺癌MCF7细胞的影响及可能的作用机制,旨在对GRP94在乳腺癌发生发展中的作用及机制提供数据参考。方法将人乳腺癌细胞株MCF7细胞随机分为空白对照组、空白转染组和实验组,其中空白转染组和实验组分别转染siRNA和siRNA-GRP94,采用CCK8实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡,qRT-PCR检测GRP94 mRNA表达,Western blot检测GRP94、c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白表达。结果实验组GRP94 mRNA和蛋白表达量分别为(0.106±0.031)和(0.211±0.068),明显低于空白对照组的(0.984±0.122)和(0.943±0.117)及空白转染组的(0.980±0.120)和(0.946±0.121),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组培养24 h、48 h MCF7细胞增殖A值分别为(0.426±0.120)和(0.547±0.114),明显低于空白对照组的(0.864±0.121)和(1.064±0.117)及空白转染组的(0.870±0.119)和(1.060±0.110),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组MCF7细胞凋亡率为(8.92±1.01)%,明显高于空白对照组的(3.16±0.64)%和空白转染组的(3.20±0.59)%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组MCF7细胞c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白相对表达量分别为(0.813±0.104)、(0.214±0.067)和(0.511±0.121),明显低于空白对照组和空白转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GRP94可抑制乳腺癌MCF7细胞增殖、诱导凋亡,可能与其下调c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白表达有关。

人葡萄糖调节蛋白94在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞生物学行为的影响

探讨人GRP94(葡萄糖调节蛋白94)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响。收集2015年1月至2016年7月成都医学院第一附属医院有完整病历资料的46例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中GRP94表达水平;采用脂质体转染法将GRP94表达质粒转染入宫颈癌Hela细胞,上调细胞内源GRP94表达;活细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测GRP94对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响。46例宫颈癌患者癌组织中GRP94表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析宫颈癌患者癌组织中GRP94表达与患者临床指标发现,GRP94的表达水平与患者的年龄无关(P>0.05),而与FIGO分期以及病例分级密切相关(P<0.05);转染GRP94表达质粒后,上调宫颈癌Hela细胞内源GRP94表达;相比于对照组和空白组,GRP94转染组的宫颈癌细胞增殖能力显著升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05),细胞的侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。结果显示GRP94在宫颈癌组织中的表达量显著升高,其表达水平的升高与宫颈癌的FIGO分期以及分化程度密切相关;在宫颈癌细胞中的上调GRP94的表达,能够明显提高其细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡,表明GRP94的表达与宫颈癌发生发展密切相关。

大鼠脑缺血后内质网伴侣蛋白GRP78和GRP94及胱冬酶12表达的改变

目的观察大鼠局灶性脑缺血时内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白(glucose-regulatedprote in GRP)78、GRP94及内质网凋亡因子胱冬酶(caspase)12的变化,探讨内质网分子伴侣及凋亡因子在脑缺血损伤中的作用。方法W istar大鼠60只,雌雄各半,随机分为假手术组和缺血组,各为30只。采用线栓法制备大鼠局灶脑缺血模型。应用免疫组织化学及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血6、12、24 h大鼠纹状体GRP78、GRP94及caspase-12 mRNA表达变化。结果免疫组织化学和RT-PCR检测均发现缺血组GRP78、GRP94 mRNA表达低于假手术组(P<0.05);其mRNA及蛋白表达在缺血12 h达峰值,与6、24 h比较差异有显著性(P<0.05)。缺血组缺血6 h caspase-12表达升高,12 h达高峰,24 h明显下降;假手术组未见caspase-12表达。结论大鼠纹状体缺血后可能通过GRP78、GRP94表达升高启动内质网自稳调节系统;严重的脑损伤GRP78、GRP94表达下降。内质网caspase-12凋亡通路的启动可能是脑缺血损伤的又一机制。