免疫沉淀联合LC-MS/MS筛选猪肝星状细胞中葡萄糖调节蛋白GRP94的互作蛋白

【背景】随着规模化、集约化生产程度的不断提高,养殖过程中饲养空间受限、冷热环境不适等因素常使猪处于应激状态。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)可能是最早期的应激反应,与细胞凋亡、代谢等方面有密切联系。肝脏是机体的主要代谢器官,猪养殖过程中由于人工操作(如断奶)、饲料霉变、温度变化和吸入有害气体等因素都会造成猪肝脏的ERS,不仅会造成肝脏损伤,还会引发肝脏的脂肪代谢紊乱和广泛的炎症反应,影响生产性能和繁殖性能。因此,深入探讨缓解ERS的有效措施,有助于减少猪养殖过程中的隐性损失。【目的】利用免疫沉淀联合质谱技术,从猪肝星状细胞中筛选在ERS条件下与葡萄糖调节蛋白94(GRP94)相互作用的细胞蛋白,为进一步探讨GRP94对猪肝星状细胞生物学功能的保护作用机理奠定基础。【方法】首先将GRP94抗体固定在谷胱甘肽亲和磁珠上,用亲和磁珠与ERS条件下或正常条件下猪肝星状细胞总蛋白进行孵育,与GRP94诱饵蛋白结合的蛋白复合物洗脱收集后,进行SDS-PAGE凝胶电泳验证。将验证成功的样品洗脱液进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测,鉴定出正常条件和ERS条件下GRP94的互作蛋白。运用生物信息学在线软件对筛选的互作细胞蛋白进行GO富集、KEGG信号通路注释和蛋白互作网络分析,并对其中的互作蛋白之一波形蛋白(vimentin)进行免疫共沉淀验证。【结果】筛选到正常条件下与GRP94存在互作关系的蛋白146个,ERS条件下与GRP94存在互作关系的蛋白76个,在两种情况下都存在互作关系的蛋白44个。ERS条件下有互作关系的76个蛋白质主要参与凋亡过程负调控、肽段交联、泛素依赖型ERAD(endoplasmic reticulum associated degradation)过程和过氧化氢分解代谢等过程。其中参与凋亡过程负调控的GRP94互作蛋白有albumin、catalase、filament A、heat shock protein family A member 5、keratin 18和prohibin 2,说明GRP94可能与这些蛋白共同发挥抗凋亡作用。除此之外组成中间丝纤维的vimentin蛋白参与多个GO富集的通路,可能与GRP94有重要的互作关系。进一步的免疫共沉淀试验也证实,ERS条件下vimentin和GRP94之间确实存在互作关系。此外,某些ERS条件下特异性表达的GRP94互作蛋白(如peroxiredoxin、death inducer obliterator 1、catalase、glandular kallikrein、pyruvate kinase等)与抗凋亡有密切联系。【结论】ERS条件下,猪肝脏GRP94互作蛋白主要参与抗凋亡、对未折叠蛋白进行折叠和维护细胞内稳态相关的信号通路。该结论为下一步开展GRP94参与肝脏ERS调控机制的研究打下基础。

葡萄糖调节蛋白94和转化生长因子-β1与房颤患者预后的相关性

目的探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。方法选择因房颤行射频消融术的住院患者共202例,统一归于房颤组,再依据房颤发生及持续的时间进一步分为阵发性房颤组(n=132)和持续性房颤组(n=70);另选择窦性心律且既往无房颤心律的健康体检者作为对照组(n=55)。通过酶联免疫吸附试验测定患者的血清GRP94及TGF-β1水平,并收集基线资料。出院后以门诊或电话形式对房颤患者进行随访,利用受试者工作特征曲线和Kaplan-Meier生存分析评估血清GRP94、TGF-β1水平对房颤患者消融术后远期复发事件的预测价值。结果在对照组、阵发性房颤组、持续性房颤组中,血清GRP94及TGF-β1水平依次升高。二元Logistic回归分析提示,血清TGF-β1、GRP94和体重指数是房颤发生的独立危险因素。Spearman相关性分析显示,在房颤患者血清中GRP94和TGF-β1水平呈正相关。复发组的TGF-β1高于非复发组,GRP94低于非复发组。二元Logistic回归分析表明,TGF-β1是房颤术后复发的独立危险因素,GRP94是房颤复发的独立保护因素。Kaplan-Meier曲线分析显示,GRP94高水平、TGF-β1低水平的房颤患者消融术后复发的风险低,且未复发时间更长。结论GRP94及TGF-β1水平与房颤密切相关,可能为房颤患者消融术后复发的早期识别、诊断及预防提供依据。

葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的差异表达

为探讨葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的生物学意义,利用蛋白质免疫印迹、免疫荧光及RNA印迹技术,检测了发育不同时期小鼠脑组织中GRP78、GRP94的表达及分布情况.结果显示:小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94的表达在时间和空间上呈现出显著差异,在脑发育的早中期GRP78表达水平高于GRP94,随发育的进程GRP78不断下降而GRP94逐渐升高,至胚胎发育晚期GRP94表达水平高于GRP78.在E16.5的不同脑区,GRP78的表达呈现出从端脑到后脑逐渐递减的“浓度梯度”分布,而GRP94在不同脑区中表达相同.小鼠出生后,二者作为应激蛋白在脑组织中的表达没有明显的差异性.免疫荧光结果显示,GRP78和GRP94在大脑组织中的分布基本相同,神经细胞和神经胶质细胞的细胞质均有分布.这些观察得到的结果提示,GRP78和GRP94与神经细胞分化和脑的形态建成有关,它们分别在脑发育的不同时期起作用.

人乳腺癌中葡萄糖调节蛋白94(Grp94/Gp96)的表达及意义

目的 探讨人乳腺浸润性导管癌中葡萄糖调节蛋白 94 (glucose -regulatedprotein ,GRP94 )的表达与乳腺癌生长、浸润及转移的关系。方法 采用DakoEnvision免疫组织化学染色法对 30例乳腺癌中的GRP94进行免疫组化染色。结果 乳腺浸润性导管癌 30例 ,其中有淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 1例 ,弱阳性 5例 ,阴性 9例 ;无淋巴结癌转移的 15例 ,GRP94阳性 10例 ,弱阳性 2例 ,阴性 3例 ;有淋巴结癌转移组GRP94表达低 ,无淋巴结癌转移组GRP94表达高 ;(P <0 0 5 ) ,两组之间存在显著差异。结论 在乳腺浸润性导管癌中GPR94的表达与转移有关 ,低表达者往往有转移。

胃癌中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达的临床意义及与预后的相关性

目的确定葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)与胃癌(gastric cancer,GC)临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC和切缘组织中GRP78和GRP94的表达;Kaplan-Meier或卡方检验GRP78、GRP94和临床病理资料与GC术后整体生存期相关性。结果 GRP78和GRP94蛋白主要表达于胃癌细胞的胞质及胞膜,其阳性表达与淋巴结转移、TNM分期呈负相关,与分化程度正相关(P<0.05);GRP78、GRP94高表达及低表达GC患者术后平均生存时间分别为(23.51±2.32)个月和(37.54±3.24)个月、(21.31±1.46)个月和(40.02±2.19)个月,5年整体生存率分别为21.23%和41.42%、20.73%和43.86%(log-rank test,P<0.01),TNM分期、GRP78和GRP94是影响GC预后的独立因素。结论 GRP78和GRP94高表达可能是GC预后不良的分子标志物之一。

葡萄糖调节蛋白94在人胚胎发育中的表达

目的为探讨葡萄糖调节蛋白９４（ＧＲＰ９４）在胚胎发育中的作用，研究了１０～３１周人胎组织ＧＲＰ９４的定位及表达。方法用ＳＰ免疫组织化学方法。结果结肠粘膜上皮、肾小管上皮及肝细胞的胞质内，在１０周已有ＧＲＰ９４的表达，１８～２０周时表达增多，一直维持较高水平。胃粘膜上皮及心肌细胞也有较强的表达。肺、骨骼肌、脊髓及胸腺未见表达。结论ＧＲＰ９４存在着基础表达，可能在某些器官的发育过程中起作用。

葡萄糖调节蛋白94在结肠腺癌中的表达及其意义

目的探讨结肠腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及其与结肠腺癌分化程度、临床分期及转移等的关系。方法采用免疫组织化学S-P法分别检测结肠腺癌组织、结肠腺瘤组织及正常结肠组织GRP94表达情况,结合临床病理特征光学显微镜下用半定量方法对结果进行统计分析。结果正常组织、腺瘤组织及腺癌组织中均有GRP94表达,其表达程度呈递增趋势。其表达程度随着细胞分化的降低、临床分期的增加及肿瘤转移而增高,与患者性别、年龄无关。结论GRP94的高表达可能参与结肠癌的发生、发展,对结肠癌肿瘤细胞有保护作用,抑制GRP94的表达有可能抑制肿瘤生长。

葡萄糖调节蛋白94在宫颈病变中的表达

目的研究葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)在宫颈病变及HPV感染中的表达及意义.方法选取2014年10月至2016年6月在昆明医科大学第二附属医院妇科门诊就诊或住院部行宫颈癌筛查(HPV、TCT),并因任一结果异常行阴道镜下活检术的患者,留取宫颈组织备用,最终根据病检结果选取正常宫颈组织40例;CIN I30例;CINII^III 30例;年龄范围为25~55岁.已行宫颈病变治疗及妊娠患者不纳入研究范围.用Western Blot法检测正常宫颈组织中以及CIN I、CINⅡ/Ⅲ组织中GRP94蛋白表达.结果正常宫颈组织中GRP94阴性、阳性表达分别占65.0%、35.0%;CINI组织中阴性、阳性分别为40.0%、60.0%;CINⅡ/Ⅲ组织中阴性、阳性分别占26.6%、73.3%.3个组阳性率总体上差异有统计学意义(P<0.05),两两比较发现:CINⅡ/Ⅲ的阳性率高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);CIN I的阳性率与正常组、CINⅡ/Ⅲ的阳性率相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 GRP94在宫颈上皮内瘤变中呈现高表达,而在正常宫颈组织中呈现低表达,GRP 94与宫颈病变进展的发生发展密切相关.

肿瘤相关糖蛋白72和葡萄糖调节蛋白94在乳腺良恶性病变组织中的表达及其意义

目的:研究乳腺良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72(tumor-associated glycoprotein,TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein94,GRP94)的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中TAG72和GRP94的表达,并进行评分。应用Kaplan-Meier法对乳腺癌患者进行生存分析。结果:乳腺癌组织中TAG72和GRP94表达的阳性率分别为68.3%和63.3%,其总评分分别为2.53±1.86和2.73±2.23;乳腺良性病变组织的TAG72和GRP94表达阳性率分别为10.0%和13.3%,其总评分分别为0.37±1.13和0.47±1.22;乳腺癌组织与乳腺良性病变组织相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。导管内癌、组织学分级为Ⅰ或Ⅱ级、肿瘤最大径≤3cm、无淋巴结转移、雌激素受体阳性、p53阴性及CA15-3阴性乳腺癌患者的TAG72和GRP94表达阳性率及其评分均明显低于浸润性导管癌(P<0.05)、组织学分级Ⅲ级(P<0.01)、肿瘤最大径>3cm(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.01)、雌激素受体阴性(P<0.05)、p53阳性(P<0.01)和CA15-3阳性(P<0.01)的乳腺癌患者。TAG72和GRP94表达阳性的乳腺癌患者及两者均表达阳性的乳腺癌患者的术后生存期明显短于阴性表达者(P<0.01)。COX多因素分析结果显示,TAG74和(或)GRP94表达阳性均与术后生存率呈负相关,与死亡率呈正相关,均是独立的预后因素。结论:TAG72和GRP94表达在乳腺癌的发生、发展、临床生物学行为及预后方面可能具有重要作用,TAG72和(或)GRP94表达阳性的乳腺癌患者预后不良。

葡萄糖调节蛋白94在膀胱肿瘤中的表达及其对膀胱肿瘤细胞生物学行为的影响

目的观察葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在膀胱肿瘤组织和细胞中的表达情况,并下调膀胱肿瘤细胞内GRP94表达,检测其对肿瘤细胞凋亡及迁移能力的影响,探讨其可能机制。方法选取35例膀胱尿路上皮癌组织和35例癌旁组织,应用免疫组化方法检测GRP94在两种组织中的表达,同时应用Western blot法检测GRP94在正常膀胱上皮细胞株和膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达;设计合成可靶向结合GRP94序列的小干扰RNA(siGRP94),将其导入膀胱尿路上皮癌SW780细胞株,随后应用Western blot法检测SW780细胞内GRP94的表达情况;并分别应用流式细胞术检测凋亡率,Transwell法检测迁移能力;同时应用Western blot法检测细胞内caspase-9、Bcl-2、Bax和vimentin表达情况。结果膀胱尿路上皮癌组织中GRP94表达的平均光密度值明显高于癌旁组织(P<0.01),膀胱尿路上皮癌细胞株中GRP94表达明显高于正常膀胱上皮细胞株(P<0.01);siGRP94转染后48 h,SW780细胞内GRP94表达较空白组和阴性对照组明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显上升(P<0.01),同时迁移能力明显下降(P<0.01);凋亡调控蛋白中,caspase-9前体表达下调同时剪切体表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调同时Bax表达上调(P<0.01);细胞迁移相关蛋白波形蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论GRP94在膀胱尿路上皮癌中呈高表达,下调其表达水平可诱导膀胱肿瘤细胞发生凋亡并抑制细胞迁移能力,GRP94可能具有成为膀胱肿瘤治疗靶基因的潜力。

热休克蛋白70、葡萄糖调节蛋白94和IgG在人肺癌组织中的表达

目的:探讨热休克蛋白70(Hsp70)、葡萄糖调节蛋白94(Grp94)、IgG在人肺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学方法结合病理学图像分析系统研究40例肺癌组织中Hsp70、Grp94和IgG的表达。并用免疫荧光双标染色及激光共聚焦技术研究三者的定位关系。结果:人肺癌组织中Hsp70、Grp94、IgG都有高表达,阳性率分别为65%(26/40)、45%(18/40)和82.5%(33/40),Hsp70阳性定位胞核胞质,Grp94和IgG阳性定位主要在胞质,平均光密度值分别为(5.10±0.32)、(3.52±0.35)和(8.12±0.31)。26例Hsp70阳性的肺癌病例中有10例与IgG有共定位关系,18例Grp94与IgG有共定位关系。结论:Hsp70、Grp94和IgG在肺癌组织中高表达,提示三者在肺癌的发生发展中起重要作用;肺癌肿瘤细胞表达的IgG与Hsp70、Grp94分别存在一定共定位关系,其在肿瘤的发展中可能具有协同作用或者在肺癌组织中存在Hsp70-IgG、Grp94-IgG和Hsp70-Grp94-IgG复合物的形式。

创伤后应激障碍大鼠海马分子伴侣葡萄糖调节蛋白94表达的变化

目的观察创伤后应激障碍(PTSD)模型大鼠海马神经元分子伴侣葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达变化。方法建立单一延长应激(SPS)大鼠模型,随机分为SPS刺激后第7天组、第14天组及正常对照组,采用免疫组化、Western blot、RT-PCR方法检测各组海马神经元GRP94的表达。结果免疫组化及Western blot结果均显示:造模第7天海马神经元GRP94蛋白表达较正常对照组明显增加(P<0.05),而第14天明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示:造模第7天海马神经元GRP94 mRNA水平明显增加(P<0.05),第14天则明显降低。结论 PTSD大鼠海马GRP94蛋白水平发生了变化,为进一步研究内质网径路细胞凋亡提供了实验基础。

葡萄糖调节蛋白94在内质网应激诱导肝细胞凋亡中的调控机制研究进展

细胞内质网应激在畜禽和人类许多的应激反应中普遍存在。细胞在持续内质网应激下诱发未折叠蛋白反应并激活细胞凋亡信号通路。葡萄糖调节蛋白94(GRP94)是内质网应激的标志蛋白,并通过内质网信号途径调控细胞凋亡的发生。本文主要就GRP94及其互作蛋白对内质网应激诱导的肝细胞凋亡的调控机制,及GRP94在肝疾病中如何发挥作用进行综述,以期为畜牧上引起内质网应激的生产条件调控以及临床上与内质网应激相关细胞凋亡的肝病治疗提供参考。

乳腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94的表达及临床意义分析

目的探讨乳腺癌组织中葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的表达及临床意义。方法本研究所用的90对乳腺癌组织标本来源于2013年1月至2015年12月航空总医院收治的乳腺癌患者,每对组织标本包括癌组织以及癌旁正常组织。利用免疫组织化学法检测乳腺癌组织和癌旁正常组织中GRP94的表达,分析GRP94的表达与患者临床病理特征的关系。结果 69例患者进行免疫组织化学评分分析发现,乳腺癌组织中GRP94蛋白表达水平高于癌旁正常组织[(5.5±0.6)分比(2.3±0.3)分](P<0.01)。乳腺癌组织中GRP94的表达与病理分级、临床分期和分子分型有关(均P<0.05),而与患者年龄、肿瘤类型和肿瘤直径无关(均P>0.05)。结论 GRP94在乳腺癌组织中的表达明显高于正常组织,其表达与乳腺癌的发生发展密切相关。

以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)为靶向的胰蛋白酶抑制剂抗肠癌效应研究

目的构建以肿瘤细胞表面葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)为靶向的重组绿豆胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)活性片段GBP-TI,并探讨其抗肠癌的分子靶向效应。方法用带有GRP78结合肽(GRP78binding peptide,GBP)表达序列的引物PCR扩增胰蛋白酶抑制剂活性片段,构建GBP-TI的原核表达载体;采用GST亲和层析柱纯化获得GBP-TI蛋白;激光共聚焦方法检测GBP-TI与GRP78的相互作用;MTT和DAPI细胞核染色方法分别检测GBP-TI对大肠癌细胞存活和凋亡的影响。结果 GBP-TI能够与大肠癌细胞表面的GRP78相互作用;与GST-TI相比,GBP-TI能够剂量依赖性地诱导大肠癌细胞死亡,而对正常细胞生长无明显影响。结论 GBP-TI可以通过结合肿瘤细胞表面GRP78蛋白特异性杀伤肿瘤细胞。本研究为肿瘤靶向治疗提供了一种新的策略。

葡萄糖调节蛋白GRP78研究进展

葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated p rotein78 kD,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上重要的分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员.GRP78分子及其DNA分子序列结构在许多生物物种中高度保守.GRP78在内质网中参与阻止内质网新生肽聚集、调节内质网钙稳态、抗内质网相关性细胞凋亡,以及启动未折叠蛋白反应等细胞生命过程.GRP78生物学功能的研究已经引起生物学家的广泛重视.

线粒体信号肽引导葡萄糖调节蛋白75-增强型绿色荧光蛋白(GRP75-EGFP)融合蛋白定位于线粒体

目的构建葡萄糖调节蛋白75(GRP75)不同结构域、不同形式突变体与线粒体信号肽重组蛋白并鉴定其亚细胞定位。方法通过重叠延伸PCR,将线粒体靶向信号肽序列分别与GRP75不同结构域基因拼接。利用定点突变PCR分别扩增实现62和65位氨基酸突变的磷酸化失活型、磷酸化激活型突变体、482位氨基酸突变的底物结合缺陷型突变体及三位点同时突变重组体。将上述重组基因克隆入p EGFPC1真核表达质粒,酶切和测序验证后分别用脂质体转染He La细胞,Western blot法检测重组蛋白表达水平,激光共聚焦显微镜观察比较重组蛋白亚细胞定位情况。结果成功构建了线粒体信号肽融合或缺失的GRP75结构域、磷酸化失活和激活突变体、底物结合缺陷突变体真核表达质粒。各重组质粒的片段插入、位点突变、信号肽融合情况均符合设计目的,在He La细胞表达后产物的相对分子质量大小均符合预期。EGFP蛋白C端插入信号肽能引导下游融合的GRP75全长蛋白、结构域片段、突变体蛋白表达定位于He La细胞线粒体中,而缺失信号肽的对应重组蛋白则主要分布于胞质和局部核周。结论构建了一系列GRP75重组真核表达质粒,EGFP融合信号肽能引导重组蛋白在线粒体中表达定位。

大鼠脑缺血后内质网伴侣蛋白GRP78和GRP94及胱冬酶12表达的改变

目的观察大鼠局灶性脑缺血时内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白(glucose-regulatedprote in GRP)78、GRP94及内质网凋亡因子胱冬酶(caspase)12的变化,探讨内质网分子伴侣及凋亡因子在脑缺血损伤中的作用。方法W istar大鼠60只,雌雄各半,随机分为假手术组和缺血组,各为30只。采用线栓法制备大鼠局灶脑缺血模型。应用免疫组织化学及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测缺血6、12、24 h大鼠纹状体GRP78、GRP94及caspase-12 mRNA表达变化。结果免疫组织化学和RT-PCR检测均发现缺血组GRP78、GRP94 mRNA表达低于假手术组(P<0.05);其mRNA及蛋白表达在缺血12 h达峰值,与6、24 h比较差异有显著性(P<0.05)。缺血组缺血6 h caspase-12表达升高,12 h达高峰,24 h明显下降;假手术组未见caspase-12表达。结论大鼠纹状体缺血后可能通过GRP78、GRP94表达升高启动内质网自稳调节系统;严重的脑损伤GRP78、GRP94表达下降。内质网caspase-12凋亡通路的启动可能是脑缺血损伤的又一机制。

葡萄糖调节蛋白78研究进展

葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78kD,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上重要的分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构在许多生物物种中高度保守。GRP78在内质网中参与阻止内质网新生肽聚集、调节内质网钙稳态、抗内质网相关性细胞凋亡,以及启动未折叠蛋白反应等细胞生命过程。GRP78基因启动子上存在内质网应激反应元件(ERSE)和cAMP反应元件(CRE)等特殊的顺式作用元件,特异性转录因子ATF6等与GRP78启动子上顺式作用元件发生动态结合,从而调节GRP78基础性或诱导性转录表达。近年来发现,GRP78与脂肪肝、肿瘤和神经系统等疾病的发生发展密切相关,GRP78生物学功能的研究已经引起生物学家们的广泛重视。

人胃癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达及其意义

目的:探讨休克蛋白70(HSP70)和糖调节蛋白94(grp94)在人胃癌组织中的表达与临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学和病理学图像分析方法研究60例人胃癌组织及其癌旁组织、发生及未发生转移的癌组织中HSP70和grp94的表达。结果:在胃癌组织中HSP70和grp94的表达明显高于癌旁组织(93.3%,81.7%vs36.7%,25.0%,P<0.01)。HSP70和grp94在低分化和发生转移的胃癌组织中的表达明显高于非转移癌和癌旁组织(90.0%,85.0%;100%,84.6%vs36.7%,25.0%;P<0.01)。结论:HSP70和grp94在发生转移的低分化胃癌组织和未发生转移的高分化癌组织中表达存在明显不同,可以作为胃癌的诊断或预后指标。