葡萄糖载体-1研究进展

葡萄糖载体-1(Glut-1)广泛分布于体内各组织细胞中,主要集中在血脑屏障(脑毛细血管内皮细胞)和红细胞膜上,是机体各细胞被动转运葡萄糖最基本的转运载体。Glut-1表达异常是临床多种疾病的发病原因或结果。近年来的研究表明,Glut-1为治疗人T细胞白血病、肿瘤及多种脑疾病提供了潜在靶点。

乳源β-酪啡肽7对大鼠葡萄糖吸收的影响及其作用机制

目的:探讨乳源活性肽β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7,β-CM7)应用于食品时对葡萄糖吸收的影响及其作用机制.方法:选用健康成年SD大鼠,分为对照组(0mol/Lβ-CM7),L低剂量组、M中剂量组、H高剂量组(终浓度分别为7.5×10-7,7.5×10-6,7.5×10-5mol/L).利用翻转离体小肠囊模型进行实验:(1)葡萄糖氧化酶法测定翻转后小肠内液葡萄糖含量;(2)比色法测定小肠黏膜Na+-K+-ATP酶活力;(3)荧光定量PCR法分析小肠黏膜组织中钠葡萄糖共转运载体(SGLT-1)和葡萄糖协助扩散转运载体(GLUT-2) mRNA的表达.结果:在离体环境下β-CM7在7.5×10-7-7.5×10-5mol/L浓度下对葡萄糖的吸收均有一定的抑制作用(1.09mol/L,1.24mol/L,1.12mol/L vs 1.74mol/L,P=0.01,0.04,0.02),能够降低Na+-K+-ATP酶活力(85.73,112.06,109.68 vs 114.93,P=0.004,0.73,0.54);荧光定量PCR结果发现:与对照组相比,β-CM7能够显著降低SGLT-1及GLUT-2 mRNA水平(0.46,0.58,0.77 vs 1.11,P=0.20,0.05,0.02;0.50,0.66,0.85 vs 1.14,P=0.30,0.14,0.03).结论:β-CM7可以通过降低Na+-K+-ATP酶活力及下调SGLT-1、GLUT-2 mRNA水平,减少大鼠小肠对葡萄糖的吸收.

头穴电针对脑出血大鼠脑组织GLUT-1及其基因表达的影响

目的:研究大鼠脑出血后血肿周围组织葡萄糖载体蛋白-1(GLUT-1)、GLUT-1mRNA表达的动态变化规律及头穴透刺治疗作用。方法:将雄性Wistar大鼠144只随机分为假手术组、模型组、针刺组,每组又分为24h、72h、168h三个小组,采用胶原酶/肝素联合注入法制备脑出血大鼠模型。针刺组给予百会透太阳穴电针治疗,按指定时间断头取脑,取血肿周围3mm范围内组织,分别采用免疫组织化学法检测GLUT-1和RT-PCR法检测GLUT-1mRNA表达的变化。结果:脑出血后,模型组三个时间点均见大部分GLUT-1阳性微血管形态变窄、皱缩、闭塞,越靠近病灶越严重;与假手术组比较,模型组GLUT-1及GLUT-1mRNA表达24h时失代偿性升高(P<0.05),72h、168h时失代偿性降低(P<0.05)。针刺组:仅在24h时血肿周围出现了轻微的管腔狭窄,之后大部分血管表现为管腔呈圆形扩张;GLUT-1与GLUT-1mRNA表现相同的变化趋势,即与假手术组比较,24h时变化不明显,72h、168h时出现降低(P<0.05),且各时间点与模型组有明显差异(P<0.05)。结论:头穴电针能扩张血管,改善供血,减轻血管内皮细胞的损伤,故能推迟GLUT-1及GLUT-1mRNA病变的发生,延长治疗时间窗。

脂多糖对人单核细胞株THP-1细胞HIF-1α及其靶基因GLUT-1表达的影响

目的研究脂多糖（LPS）对人单核细胞株THP-1细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其靶基因葡萄糖转运载体-1（GLUT-1）表达的影响。方法以1μg／mLLPS分别处理体外常规培养的THP-1细胞0、2、4、6、8h。采用Western blotting检测THP-1细胞HIF-1α蛋白表达，RT—PCR技术检测HIF-1αmRNA与GLUT-1mRNA表达。以不同浓度的LPS（0、0．01、0．1、1μg／mL）分别刺激THP-1细胞6h，Western blotting检测HIF—1α蛋白表达。结果1μg／mLLPS作用2h时，THP-1细胞的HIF—1α蛋白表达开始增加，4h时显著增加（P〈0．05），6～8h时达高峰（P〈0．01）。0．01μg／mLLPS刺激6h，THP-1细胞的HIF—1α蛋白表达较对照组明显升高（P〈0．05）；当0．1μg／mLLPS和1μg／mLLPS刺激6h时，HIF-1α蛋白表达更高，与对照组相比差异有高度统计学意义（P〈0．01）。提示LPS能够诱导THP-1细胞内HIF—1α蛋白表达，并且呈时间和浓度依赖性。1μg／mLLPS作用2、4、6、8h均能上调THP-1细胞HIF-1α与GLUT-1mRNA水平（P〈0．01），且随时间的延长表达逐渐增加。结论LPS能够促进人单核细胞株THP-1细胞HIF-1α及其靶基因GLUT-1的表达。

高糖腹膜透析液对HPMECs中GLUT1、SGLT1、TGF-β 1、VEGF-A、CTGF表达的影响研究

目的探讨高糖腹膜透析液对人腹膜微血管内皮细胞(HPMECs)中GLUT1、SGLT1、TGF-β1、VEGF-A、CTGF表达的影响。方法体外培养HPMECs并分为5组,N组用含葡萄糖的无酚红RPMI-1640培养基培养;P组用2.5%葡萄糖腹膜透析液培养;GN组用含50g/ml葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)拮抗剂根皮素的2.5%葡萄糖腹膜透析液培养;SN组用含10g/ml钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)拮抗剂根皮苷的2.5%葡萄糖腹膜透析液培养;GN+SN组用含50g/ml根皮素和含10g/ml根皮苷的2.5%葡萄糖腹膜透析液培养。分别采用RT-PCR法、Western blot法检测各组HPMECs GLUT1、SGLT1、细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA、蛋白表达水平。结果 5组HPMECs GLUT1、SGLT1、TGF-β1、VEGF-A、CTGF的mRNA、蛋白表达水平比较均有统计学差异(均P<0.05)。与N组比较,P组HPMECs GLUT1、SGLT1、TGF-β1、VEGF-A、CTGF的mRNA、蛋白表达水平均升高(均P<0.05);与P组比较,GN组、SN组、GN+SN组HPMECs GLUT1、SGLT1、TGF-β1、VEGF-A、CTGF的mRNA、蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。结论高糖腹膜透析液或通过上调HPMECs中GLUT1、SGLT1的表达,进而上调TGF-β1、VEGF-A、CTGF的表达,从而起促腹膜纤维化作用。

头穴透刺对脑出血大鼠脑组织GLUT1表达的影响

目的:研究大鼠脑出血后血肿周围组织葡萄糖载体蛋白-1(GLUT1)表达的动态变化规律及头穴透刺的治疗作用。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组,每组又分为24h、72h、168h三个小组,采用胶原酶/肝素联合注入法制备脑出血大鼠模型,给以百会透太阳穴电针治疗,各组动物在指定时间断头取脑,取血肿周围3mm范围内组织,采用免疫组织化学法观测GLUT1表达的变化。结果:模型组:三个时间点均见大部分GLUT1阳性微血管形态变窄、皱缩、闭塞,越靠近病灶越严重;GLUT1表达24h先代偿性升高,与假手术组比较P<0.05,后72h、168h失代偿性降低,与假手术组比较P<0.05;针刺组:仅在24h时血肿周围出现了轻微的管腔狭窄,之后大部分血管表现为管腔呈圆形扩张,GLUT1在72h、168h也出现下降(P<0.05),但明显好于模型组(P<0.05)。结论:针刺在多时间点对GLUT1均有治疗作用,能延长治疗时间窗,减轻病变程度且早期作用明显。

老龄小鼠肠短链脂肪酸对肠屏障功能的影响

目的探讨肠内短链脂肪酸(SCFAs)水平对老龄小鼠肠屏障功能的影响及其机制。方法老龄小鼠随机分为禁食和正常进食组,以不同月龄(6、10和14月龄)成年小鼠为对照。采用高效液相色谱法检测小鼠肠内容物中SCFAs含量,鲎试验法检测血浆内毒素,改良酶法检测血浆D-乳酸水平,逆转录-聚合酶链反应检测小肠黏膜细胞钠葡萄糖共转运载体-1(SGLT-1)mRNA的表达。结果成年小鼠SCFAs水平并不随月龄增加而降低,但老龄小鼠的SCFAs水平明显低于成年小鼠(P值均<0.05),禁食组小鼠SCFAs水平较正常饮食组虽有下降,但差异无统计学意义(P值均>0.05)。老龄小鼠的血浆内毒素和D-乳酸水平均明显高于成年小鼠(P值均<0.05),而肠黏膜细胞上SGLT-1 mRNA表达水平明显低于成年小鼠(P<0.05)。结论老龄小鼠肠内容物SCFAs水平下降预示肠屏障功能下降,内毒素和D-乳酸易位入血增加,其机制与肠道内低水平SCFA降低肠黏膜细胞的正常功能有关。