肝细胞核因子1α通过调控葡萄糖转运蛋白2促进肾小管上皮细胞葡萄糖重吸收

目的:探究肝细胞核因子1α(HNF1α)通过葡萄糖转运蛋白(GLUT)调控肾脏葡萄糖重吸收的机制。方法:构建小鼠HNF1α表达载体,将重组质粒转染人胚肾HEK293T细胞和人肾小管上皮细胞HK2中过表达HNF1α,将HNF1α siRNA和GLUT2 siRNA转染入HEK293T细胞,采用流式细胞仪检测荧光葡萄糖类似物2-NBDG被细胞吸收的情况。采用Western印迹法检测HNF1α基因沉默后对GLUT2表达的影响。通过实时定量PCR检测HNF1α下游靶基因如GLUT2、钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)、胰岛素诱导基因1(INSIG1)等的mRNA水平,通过共聚焦免疫荧光检测GLUT2在肾上皮细胞的定位情况,使用荧光素酶报告基因和Western印迹法检测HNF1α对GLUT2的转录激活能力。通过凝胶迁移实验(EMSA)和染色质免疫共沉淀(ChIP)实验检测HNF1α与GLUT2的结合作用。结果:过表达HNF1α摄取2-NBDG的细胞比例明显高于对照组( P<0.01),HNF1α和GLUT2基因沉默后细胞对2-NBDG吸收作用减弱,HNF1α基因沉默后GLUT2表达减少。与对照组相比,过表达HNF1α使得肾脏包括GLUT2在内的有关糖转运基因表达水平上升( P<0.01)。过表达HNF1α显著增加GLUT2转录活性,干涉HNF1α可下调GLUT2转录活性。此外,HNF1α可与GLUT2的启动子直接结合。 结论:HNF1α通过直接结合GLUT2促进其表达,进而调节肾源细胞对葡萄糖重吸收作用。

治疗2型糖尿病新药:钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂

根据全国多中心流行病学调查研究显示,2010年中国成人糖尿病患病率达到11.6%,糖尿病前期状态患病率达到50.1%[1],意味着在不久的将来糖尿病的治疗将会是我国面临的巨大挑战。虽然目前2型糖尿病（T2DM）有多种治疗选择,但近来研究表明,仅有7.0%-15.

肾脏SGLT2抑制剂:一类新型口服降血糖药物

近年来,钠-葡萄糖2型转运体(sod ium-glucose co-transporter 2,SGLT2)作为一个治疗糖尿病的新靶点受到广泛关注。SGLT2是一类特异性分布在肾脏近曲小管S1段的葡萄糖转运体,其生理功能是负责约90%葡萄糖的重吸收。通过抑制SGLT2,从而减少肾脏对葡萄糖的重吸收,增加尿糖排出,进而降低血糖及其毒性是SGLT2抑制剂的作用机制。SGLT2抑制剂可以明显增加正常动物的尿糖排除量,在糖尿病动物模型可以降低血糖和糖化血红蛋白。代表药物Dapagliflozin的临床试验结果表明其对2型糖尿病人具有很好的降糖效果,不良反应较少。本文结合我们的部分工作,简要介绍SGLT2和其抑制剂的研究进展。

肾性糖尿的诊疗现状

肾性糖尿（RG）是因近端肾小管对葡萄糖的重吸收障碍引起的遗传病，由SLC5A2基因突变所致。SLC5A2基因突变导致其编码蛋白钠-葡萄糖转运体2（SGLT2）缺陷，引起近端肾小管S1段重吸收原尿中葡萄糖减少，致终尿中葡萄糖增多，表现为尿葡萄糖阳性。RG的主要临床特点是尿糖阳性，尿糖成分是葡萄糖，而血糖水平正常；其遗传方式呈不完全外显的常染色体共显性遗传。RG的诊断依据：持续且相对稳定的尿糖（10-100g／d）；尿糖成分为葡萄糖；空腹血浆血糖水平和口服葡萄糖耐量试验正常；碳水化合物储存和利用正常，饮食中无明显碳水化合物不足。RG一般无需特殊治疗，但需适当增加碳水化合物的摄入量，且运动和锻炼不可过度。