葡萄膜巩膜房水排出通道的研究进展

尽管在30年前,有学者就提出葡萄膜巩膜房水流出通道(uveoscleraloutflow)的概念,但是由于研究手段的限制,在相当一段时间内有关这一房水引流途径的研究几乎处于停滞状态。近几年来,随着新的研究手段的应用,许多研究结果使我们加深了对这一房水流出途径的认识。从而对青光眼房水排出障碍,眼压升高机制增加了新的认识。更为重要的是近年来许多研究发现采用药物或手术的方式可增加房水从这一通路流出,从而为青光眼的治疗提供了新的手段。

房水的葡萄膜巩膜排出通道

房水的葡萄膜巩膜排出通道是房水排出途径的重要组成部分,随着拟前列腺素药物在抗青光眼治疗中的应用,其临床重要性重新引起了人们的注意。对有关房水的葡萄膜巩膜排出通道的研究进行综述,重点介绍房水葡萄膜巩膜排出的测量技术和方法,正常值,生理学基础,药理学基础（主要包括胆碱能类药物、肾上腺素、前列腺素及其衍生物对房水葡萄膜巩膜排出的影响和机制）。

哌唑嗪点眼对脱交感兔眼葡萄膜巩膜房水流出量的影响

目的 探讨哌唑嗪（ＰＺ） 对脱交感眼的降眼压机理。 方法 制作家兔单侧颈上交感神经节切除模型，交感神经节切除侧之兔眼点用０ ．１ ％ ＰＺ，用示踪剂异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白（ＦＩＴＣＢＳＡ） 对正常对照组和脱交感组（ＳＣＧ 组）兔眼进行前房灌注，测定葡萄膜巩膜房水流出量。 结果 脱交感眼葡萄膜巩膜房水流出量为（０ ．２４５ ±０ ．００９）μｌ／ｍｉｎ ，比正常对照组显著增加（ Ｐ＜ ０ ．０１） 。 结论 葡萄膜巩膜途径房水排出增加是脱交感眼ＰＺ

FITC-BSA示踪法测定兔眼葡萄膜巩膜途径房水流出量

用异硫氰酸荧光素牛血清白蛋白（Fluorescein－isothiocvanatebovineserumalbumin，FITC－BSA）示踪法测定兔眼葡萄膜巩膜途径房水流出量。造健康白色家兔6只12眼，测量双眼眼压。用0．1mmol／LFITC－BSA持续前房灌注30min，灌注毕处死家兔，摘除双眼球，并将组织分离为前葡萄膜、后葡萄膜、前巩膜、后巩膜、视网膜和残余液体等6种组织。测定每种组织的荧光强度，计算每眼葡萄膜巩膜房水流出量（uveoscleraloutflow，Fu）为（0．178±0．029）μl／min。证明FITC－BSA示踪法是一种测定葡萄膜巩膜途径房水流出量的有效方法。

自主神经对房水流出通道的调控作用

青光眼是全球首位的不可逆致盲性眼病,而眼压是青光眼发生发展的关键因素,但其调控机制尚不明确。临床上药物降眼压的主要机制为减少房水生成或增加房水流出,但降眼压幅度有限。目前研究发现眼压可能受自主神经调控,现围绕自主神经系统对房水生成及流出的作用进行综述,以期了解自主神经在房水流出通道的分布及调控机制,为探索新的降眼压方法及开发新药提供思路。

大鼠IκBα基因siRNA序列的体外筛选及体内验证

目的:寻找可在体内有效抑制大鼠睫状肌核转录因子κB抑制物α(IκBα)基因表达的小干扰RNA(siRNA)序列。方法:设计合成3对针对大鼠IκBα基因的siRNA,体外转染表达IκBα基因的大鼠A7r5细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并经Real Time-PCR及western blot在mRNA及蛋白水平筛选对IκBα表达抑制率最高的序列。通过前房注射选出的siRNA进行大鼠体内转染,荧光显微镜下观察其在大鼠睫状肌的分布并利用Real Time-PCR及免疫荧光验证其对该部位IκBα基因沉默的有效性。结果:体外筛选证明针对大鼠IκBα基因CTACGATG ACTGTGTGTTT靶序列的siRNA对IκBα的表达抑制效果最明显,大鼠前房注射该siRNA可到达睫状肌,并能有效抑制该部位IκBα基因的表达,IκBαmRNA水平在转染后24h降低最明显,抑制率达59.0%,而蛋白水平则在72h达最低,抑制率为52.3%(P<0.01)。结论:针对大鼠IκBα基因CTACGATGACTGTGTGTTT靶序列的siRNA是对大鼠睫状肌IκBα基因进行体内RNA干扰的有效序列。

PGF_2α类抗青光眼药Unoprostone对培养猴睫状肌细胞中胶原Ⅲ、Ⅳ及MMP-1表达的影响

目的 :探讨前列腺素F2 α(prostaglandinF2 α ,PGF2 α)类抗青光眼药Unoprostone对猴的降眼压作用机制是否与睫状肌中基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinase ,MMP)及细胞外基质 (extracellularmatrix ,ECM)的表达有关。方法 :采用免疫细胞化学方法对培养猴睫状肌细胞中胶原Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ及MMP 1的分布进行观察。比较 10 -6mol/LPGF2 α、Unoprostone代谢物M1及M2 对睫状肌细胞作用前后胶原Ⅲ ,Ⅳ及MMP 1的染色变化。结果 :胶原Ⅲ ,Ⅳ及MMP 1在培养猴睫状肌细胞内外分布各异 ,胶原Ⅰ未见明显染色 ;10 -6mol/LPGF2 α、Unoprostone代谢物M1及M2 分别使猴睫状肌细胞中胶原Ⅲ ,Ⅳ减少 ,MMP 1表达增强。结论 :Unoprostone增强猴睫状肌MMP表达 ,引起ECM降解加强 ,表明其降眼压机制为使睫状肌束间隙增大 。

Latanoprost及Unoprostone对兔及猴葡萄膜MMP-2表达影响的研究

研究 PGF2α类抗青光眼药 L atanoprost和 Unoprostone对兔及猴的降眼压途径有否不同。方法 :1.用 0 .0 0 5 % L atanoprost、 0 .12 % U noprostone分别对 12只兔、 8只猴点眼 10天 ,测量点眼前后兔及猴眼压 ,兔眼前房水蛋白浓度。 2 .采用 Zymography技术对兔、猴点眼后葡萄膜中 MMP- 2活性进行定量分析。结果 :1L atanoprost及 Unoproston都可有效降低兔及猴眼压 ,并且对兔眼前房水蛋白浓度无明显影响。 2两种药物点眼后 ,猴葡萄膜中 MMP- 2活性增强 ,却对兔葡萄膜中 MMP- 2活性均无明显影响。结论 :L atanoprost及 Unoprostone对猴的降眼压作用机制在于影响了葡萄膜巩膜房水流出 。

基于房角镜和扫频光学相干断层成像的眼球房角反射成像技术探究

目的:利用改进的房角扫频光学相干断层成像技术(SS-OCT)探索在体高分辨率房水流出通道成像的可行性。方法:实证研究法。利用SS-OCT以及房角镜搭建房角镜光学相干断层成像(OCT)用于拍摄眼球虹膜角膜角横断面图像,同时建立了模型眼模型以及在体动物实验模型,并获取了虹膜角膜角的结构。结果:基于自行搭建的房角光学相干断层成像技术(G-OCT),成功获取了眼球房角中小梁网和Schlemm's管的图像,并应用G-OCT来测量房水流出通道,并观察眼压变化对其的影响。在给眼球加压后,可以观测到Schlemm's管随眼球压力变化而容受性发生改变。结论:本研究成功搭建了基于SS-OCT和房角镜的G-OCT系统,并且获得了眼球房角横断面下小梁网的面积与Schlemm's管的面积以及相应的动态变化。