尿苷二磷酸葡醛酸转移酶的代谢类型及影响因素

尿苷二磷酸葡醛酸转移酶 (UGT)是一类Ⅱ相代谢酶 ,能催化葡醛酸与其相应底物结合。该过程是机体的重要排泄途径之一。目前 ,有 15种人类UGT被确证有活性 ,而且对它们的底物选择性方面有了进一步认识 ,但UGT的酶学研究相对于细胞色素P4 5 0还比较落后 ,有待于进一步提高。

高效液相色谱法分离测定大鼠肝微粒体中普萘洛尔葡醛酸化代谢产物

目的 建立分离测定外消旋普萘洛尔两种对映体的葡醛酸化代谢产物的反相高效液相色谱法。方法用生物合成法合成R (+) 普萘洛尔葡醛酸苷 ,并经C1 8固液萃取柱纯化、浓集 ,得到标准液储备液 ,以此标准液进行普萘洛尔葡醛酸化代谢物的分析测定。结果 R (+) 普萘洛尔葡醛酸苷在 0 2 4- 73 17μmol·L- 1 浓度范围内线性良好 ,方法专属性高 ,平均回收率为 99 4%± 1 0 % ,日内精密度RSD小于 3 3% ,日间精密度小于 4 5 %。

普萘洛尔对映体人体葡醛酸化立体选择性代谢研究

目的 测定健康志愿者口服一定量消旋普萘洛尔后尿中两种不同构型普萘洛尔葡醛酸苷的排泄量 ,研究普萘洛尔对映体人体葡醛酸化代谢的立体选择性。方法 用生物合成法合成R (+) 普萘洛尔葡醛酸苷 ,并经C18固相萃取柱纯化、浓集 ,得到标准储备液 ,用于尿中普萘洛尔葡醛苷含量测定 ,计算药动学参数。结果 R (+) 普萘洛尔葡醛酸苷与S(- ) 普萘洛尔葡醛酸苷的消除速率常数 (K)分别为 (0 2 833± 0 0 5 8)与 (0 194 6± 0 0 4 0 )h-1,达峰时 (tmax)分别为 (1 75± 0 33)与 (2 2 1±0 4 5 )h ,2 4h累积尿药量 (Xu)分别为 (2 95 2± 0 6 15 )与 (5 6 4 8± 0 977) μmol。 结论 人体葡萄糖醛酸转移酶对普萘洛尔光学异构体葡醛酸结合反应的催化作用有立体选择性。

丹酚酸A对大鼠肝脏尿苷二磷酸葡醛酸转移酶活性的影响

目的考察丹酚酸A(salvianolic acid A,SAA)对大鼠肝脏尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(UGTs)的影响。方法SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为SAA组、阳性对照组和空白对照组3组。连续给药1周后断头处死动物,分离制备肝组织亚细胞组分,以对硝基酚(4-NP)为探针药物,HPLC法测定各亚细胞组分UGTs活性。结果在不同肝组织亚细胞组分中,以肝微粒体的UGTs酶活性最高,且雄鼠显著高于雌鼠;与空白对照组比较,SAA组大鼠的肝微粒体蛋白浓度和UGTs酶活性均无显著变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SAA经静脉途径连续给药1周对SD大鼠肝脏的UGTs酶活性无显著的诱导或抑制作用,提示其在临床应用时发生经UGTs酶介导的药物相互作用的潜在风险较小。

羟基化合物及其葡醛酸苷化学结构与RP-HPLC保留行为相关性研究

采用体外孵育生物合成方法获得羟基化合物葡醛酸苷系列化合物，并对其反相高效液相色谱保留行为及底物与其葡醛酸结合物保留行为相关性进行了研究，建立了相应的结构-色谱保留行为相关性方程及葡醛酸苷类代谢物保留行为的预测方法．将QSRR研究扩展到药物代谢物领域，对药物Ⅱ相葡醛酸化代谢产物的HPLC分析提供了帮助．

卡维地洛与一些常用化学药的体外葡醛酸化代谢性相互作用

目的研究卡维地洛与一些常用化学药的葡醛酸化代谢性相互作用，为临床合理用药提供科学依据。方法选择42种临床上可能合用的药物与卡维地洛在鼠肝微粒体中共孵育。以HPLC测定孵育液中卡维地洛葡醛酸结合物的浓度，计算共孵育药物对卡维地洛2个葡醛酸结合物的IC50或Ki值。结果非洛地平，拉西地平，尼群地平，辛伐他汀和洛伐他汀对卡维地洛葡醛酸化代谢均有较强的体外抑制作用，Ki值在0．65～63．48μmol·L^-1之间。这5种药物对卡维地洛葡醛酸结合物M1的Ki值均低于对M2的Ki值，对M1的抑制作用强于对M2的抑制作用。其中拉西地平对M1和M2的抑制作用最强，Ki值分别约0．65和6．44μmol·L^-1。结论这5种药物对卡维地洛葡醛酸化代谢有较强的体外抑制作用，在联合用药时应引起注意。

人体内的葡醛酸结合反应及其影响因素

目的:为了解葡醛酸结合反应转移酶（UGTs）在体内Ⅱ相代谢中的作用及机体对它的影响因素。方法:从UGTs的结构和作用,UGTs的基因结构和基因多态性,UGTs的组织分布,药物在人体内葡醛酸结合反应的范围,影响UGT活性变化的因素等方面分别进行总结。结果与结论:UGTs催化人体内的葡醛酸结合反应。该酶为一个超基因家族,其中有些具有基因多态性,从而影响酶的活性。UGTs在体内有广泛的分布且具有组织特异性。在药物中,有一部分主要通过葡醛酸结合反应清除。UGTs的活性受到年龄、吸烟、饮食、疾病情况、治疗药物、种族、激素因素等方面的影响。与CYP450相比,关于UGT活性的变化对机体的影响的研究还十分滞后,UGTs的代谢作用和调节机制及其对治疗的影响这方面的知识还存在很大的空白。由于UGT酶在人类药物代谢方面的重要性,对关键UGT酶的鉴定是十分重要的,需要引起人们日益的重视。

膜技术分离浓缩葡醛酸水母液的工艺研究

文章针对葡醛酸水母液中残存的硝酸需要分离处理的企业技术难题,采用膜技术对葡醛酸水母液进行了分离浓缩。主要考察了不同操作方式下葡醛酸水母液的体积稀释倍数与体积稀释比的关系、体积稀释倍数与透余液硝酸浓度的关系、透过液硝酸脱除率、分离前后葡醛酸水母液透过液与透余液波美度变化等工艺参数。结果表明:料液稀释倍数达到4倍以后,采用洗滤技术对葡醛酸水母液中硝酸的脱除具有明显的效果;采用纳滤膜技术可以对其进行浓缩。这些研究对改进葡醛酸水母液的生产工艺、降低生产成本具有积极的意义。

尿苷二磷酸葡醛酸转移酶的研究进展

尿苷二磷酸葡醛酸转移酶(UGT)是体内最重要的Ⅱ相代谢酶,它可以参与许多内源性物质如胆红素、甾体激素、甲状腺激素、胆汁酸和脂溶性维生素等的代谢,在许多药物如阿片类药物、镇痛药、非甾体抗炎药和抗惊厥药等的代谢中也发挥着重要的作用。UGT在药物的吸收、分布、代谢和排泄中发挥重要作用。研究UGT特别是其基因多态性及其介导的药物-药物相互作用不仅可以指导临床用药,也可以揭示内源性物质代谢紊乱的机制。本文就UGT的分类、组织分布、对药物吸收的影响、基因多态性及其所介导的药物-药物相互作用进行综述。

尿中普萘洛尔对映体葡醛酸苷的HPLC测定

建立了人尿中普萘洛尔对映体葡醛酸苷无需水解、直接测定的HPLC法。采用生物合成获得普萘洛尔葡醛酸苷,并经C18固-液萃取纯化、浓集,作为对照品储备液。采用荧光检测器,激发波长和发射波长分别为310和339nm。线性范围0.0232～5.8mmol/L,r=0.9999。平均回收率为99.8%±5.01%,日内和日间精密度分别小于1.08%和2.86%。

大鼠肝脏葡醛酸转移酶活性测定的显色光度法研究

在探讨显色反应机理的基础上,对以2-氨基酚为底物测定葡醛酸转移酶(UGTs)活性的显色光度法进行了优化.结果表明,在控制反应条件下,过量的底物本身并不发生显色反应,而其葡醛酸结合代谢物2-氨基酚葡醛酸苷可发生重氮-偶氮化反应,在540nm波长处有最大吸收,且吸光度与代谢物浓度成正比.因此,可以具有相同发色团的苯胺为标准,根据标准曲线计算UGTs的酶活性.2-氨基酚葡醛酸苷在0.5～8μmol/L范围内线性良好,r>0.999(n=6),吸光度值可在显色完全后40 min内保持稳定.应用本法测定了雄性SD大鼠肝微粒体及S9组分的UGTs活性,结果分别为0.704 nmol·min-1·mg-1和0.177 nmol·min-1·mg-1.该方法测定条件的可控性好,操作简便,结果准确可靠,适用于临床前动物药代实验研究中UGTs活性的常规评价.

尿甘二磷酸葡醛酸转移酶基因多态性对米格列奈在人体内药代动力学个体差异的影响

目的研究尿甘二磷酸葡醛酸转移酶UGT1A3和UGT2B7基因多态性对米格列奈在人体内药代动力学个体差异的影响,为临床制定合理的用药方案提供依据。方法选取12名健康志愿者,应用液质联用法分别检测单次和多次口服米格列奈的血药浓度,计算药代动力学参数,用焦磷酸测序法检测UGT1A3(rs:28898617;rs:3821242;rs:45625338;rs:6431625)和UGT2B7(rs:12233719;rs:7439366)SNP,并按不同基因型分组。结果米格列奈药代动力学个体差异很大。单次给药后米格列奈药代动力学参数(AUC、Cmax、CL)个体差异与UGT1A3和UGT2B7基因多态性间无显著性差异。多次给药后米格列奈药代动力学参数个体差异与UGT1A3基因多态性间相关性经方差分析得出PAUC<0.05,且UGT1A3*1/*5:UGT1A3*1/*2:UGT1A3*1/*3=1.59:1.03:1,Pd=0.06(>0.05),但UGT1A3*1/*5组与UGT1A3*1/*2组的LSD-t检验两两比较Pq=0.032(<0.05),且UGT1A3*1/*5:UGT1A3*1/*2:UGT1A3*1/*3=1:1.57:1.59,表明它们代谢米格列奈的酶活性比较UGT1A3*1/*3>UGT1A3*1/*2>UGT1A3*1/*5。UGT2B7基因多态性与米格列奈药代动力学个体差异之间相关性在本试验中无显著性差异。结论尿苷二磷酸葡醛酸转移酶UGT1A3基因多态性对米格列奈体内药代动力学个体差异有影响;UGT2B7基因多态性与米格列奈体内药代动力学个体差异不存在相关性。

影响尿苷二磷酸葡醛酸转移酶活性的研究进展

尿甘二磷酸葡醛酸转移酶是重要的Ⅱ相代谢酶,尿甘二磷酸葡醛酸转移酶的活性对药物代谢和药物疗效具有重要影响。本文就影响尿甘二磷酸葡醛酸转移酶活性的主要因素年龄、激素水平、底物、疾病状态、遗传多态性以及基因表达调控作一综述。

氧氟沙星对映体在经不同诱导剂诱导的大鼠肝微粒体中的葡醛酸化代谢(英文)

为评价氧氟沙星 ( OFLX)对映体葡醛酸化代谢的立体选择性 ,采用手性 HPLC法测定大鼠肝微粒体孵育液中 OFLX对映体 .结果显示 :经苯巴比妥 ( PB)和β-萘黄酮 ( BNF)诱导的不同葡醛酸转移酶 ( UDPGT)亚族对 OFLX对映体葡醛酸化代谢有不同的影响 .在所试验的对照 ,PB或 BNF诱导的微粒体中 S- ( - ) -和 R- ( + ) - OFLX之间 ,Km 和Vmax无显著性差异 ;但 PB组中 S- ( - ) -和 R- ( + ) -OFLX的 Km 和 Vmax与对照组或 BNF组相应的对映体比较有显著性差异 ;OFLX对映体之间的 Clint在对照组与 BNF组没有显著性差异 ;而在 PB组则有显著性差异 .另外 BNF组的 Clint较对照组和 PB组分别有显著性差异 .因此 ,经 PB诱导的 UDPGT亚族对 S-和 R- OFLX的 相代谢存在立体选择性 ,并主要是由于其催化部位的差异引起了内在清除率的变化 .

中国汉族肾移植受者尿苷二磷酸葡醛酸转移酶1A9基因多态性对霉酚酸浓度的影响

目的了解中国汉族肾移植受者尿苷二磷酸葡醛酸转移酶（UGT）1A9基因多态性对体内霉酚酸（MPA）浓度的影响。方法使用PCR-LDR方法,对196例汉族肾移植受者的UGT1A9编码基因进行单核苷酸基因多态性（SNP）检测,主要检测突变位点：C-440T/T-331C、C-2152T、T-275A和T98C。移植术后第28天,通过3点法（服药前、服药后0.5h和2h）检测并推算MPAAUC0-12浓度,对SNP和MPA浓度进行相关性分析。结果①196例中国汉族肾移植受者的UGT1A9编码基因中,未发现C-2152T、T-275A和T98C突变;C-440T/T-331C突变频率为14.29﹪（28/196）;②-440/-331位点CT/TC基因突变型患者MPAAUC0-12为（40.62±11.81）mg？h/L,野生型患者为（37.55±14.19）mg？h/L,两组比较差异无统计学意义（P=0.443）。结论中国汉族肾移植受者UGT1A9编码基因中,C-2152T、T-275A和T98C突变发生频率较低。-440/-331位点突变多为杂合基因型。-440/-331位点的SNP与受者体内MPA浓度没有明显的相关性。

人UGT1A3催化黄酮类化合物葡醛酸结合反应定量构效关系研究

目的建立人UGT1A3催化黄酮类化合物定量构效关系,考察不同结构参数对葡醛酸结合反应的影响。方法采用半经验量子化学计算法MOPAC-AM1及逐步回归方法对11个黄酮类化合物的结构参数和UGT1A3催化葡醛酸反应的Km值进行定量构效关系研究。结果所建立的QSMR模型(pKm=-2.207 07+0.002 56HOF+3.212 90 QC5)具有较好的拟合性。结论分子生成热(HOF)和5位C上的静电荷这两个结构参数是影响其葡醛酸结合活性的主要结构因素。

人UGT1A3重组酶催化芹菜素葡醛酸结合反应

目的旨在了解人UGT1A3重组酶与芹菜素的有关代谢及其酶动力学参数,并阐述不同有机溶剂对酶动力学参数测定的影响。方法采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶与芹菜素37℃共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,利用Lineweaver Burk法计算酶动力学参数,并进一步进行代谢物的确认。同时考察了用不同有机溶剂溶解底物对酶动力学参数测定的影响。结果采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶,测得其催化芹菜素的Km为(28.88±2.47)μmol.L-1,Vmax为(224.19±21.11)nmol.m in-1.g-1,Vmax/Km为(7.75±0.29)mL.m in-1.g-1。不同有机溶剂对酶动力学参数测定无显著影响。结论芹菜素可被人UGT1A3重组酶催化,进行葡醛酸结合反应。

人葡糖醛酸基转移酶介导的黄酮Ⅱ相代谢研究进展

人葡糖醛酸基转移酶(UGT)同工酶在黄酮类化合物Ⅱ相代谢反应中呈重要的作用。本综述总结了近年来国内外学者对黄酮类化合物Ⅱ相代谢中UGT的研究情况,包括各同工酶间的底物差异,结构-代谢活性关系,基因多态性的影响以及黄酮对UGT调控的研究。结果表明,人UGT1A1,1A3,1A8,1A9,1A10和2B15主要参与了广泛黄酮类化合物的葡醛酸结合反应,而UGT1A5,1A7和2B7对黄酮代谢的作用有待于进一步研究证明,UGT的基因多态性、结构-代谢关系、调控机制为生物黄酮的合理利用以及此类化合物的合理药物设计提供了重要的参考依据。

UGT酶与N-萄糖醛酸结合反应

许多含伯胺、仲胺和叔胺的的化学物质与葡糖醛酸结合能形成N-葡糖醛酸代谢物。大约30余种UDP-葡糖醛酸转移酶已经被纯化,或克隆与表达,其中一些可以催化伯胺和叔胺的N-葡醛酸结合反应。UGT1的基因突变,致使一些物种不能形成季铵葡醛酸结合物。研究UGT同工酶对致癌芳杂环胺的代谢产物的催化活性,对于了解这些化合物的致癌危险性具有很大的意义。致癌的芳杂环胺通过代谢成为N-羟化物后,产生基因毒性,UDP-葡糖醛酸转移酶和母体胺结合或与N-羟化代谢物结合形成N-羟化胺类的N-葡醛酸苷,使之代谢失活,或产生稳定的结合物后转移到靶相组织(膀胱),进一步变成有活性的代谢物。

健康人UGT1A9基因多态性与麦考酚酸药动学的关系

目的探讨中国健康人麦考酚酸(MPA)药动学特性与尿苷二磷酸葡醛酸转移酶UGT1A9基因多态性的关系。方法采集20名健康男性单次po500 mg麦考酚酸酯后48 h内不同时间点的血样。HPLC测定麦考酚酸(MPA)和葡醛酸化麦考酚酸(MPAG)的药物浓度。UGT1A9的基因多态性采用测序法测定,包括-2208,-2152,-2141,-1887,-1818,-665,-440,-331,-275,-109至-98(Tn),-87 11个位点。结果20名受试者中,-2208,-2152,-2141,-665,-275位点未发现突变,-440和-331位点均为纯合突变型,-1887,-1818,-109至-98(Tn)和-87的突变率分别为0.25,0.7,0.75,0.05。统计学检验未发现MPA和MPAG的mρax,AUC0-t以及二者的比值与上述单核苷酸多态性有显著性差异。结论中国人群UGT1A9的基因多态性与白种人存在差异,且未发现UGT1A9的基因多态性与MPA的药动学特征有关。