从安达盐碱地采收的蒙古柳种子在1/2MS固体培养基中培养,等到长出3~4片真叶的幼苗为实验材料,提取植株总RNA后分离mRNA,用SMART(Switching Mechanism At 5’end of RNA Template)方法合成蒙古柳cDNA,并连接到PYES2载体,用电转化法将重...从安达盐碱地采收的蒙古柳种子在1/2MS固体培养基中培养,等到长出3~4片真叶的幼苗为实验材料,提取植株总RNA后分离mRNA,用SMART(Switching Mechanism At 5’end of RNA Template)方法合成蒙古柳cDNA,并连接到PYES2载体,用电转化法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞JM109。经测定,原始文库滴度为6×10^6 cfu·mL^-1,重组率大于98%。插入片段的长度大部分在0.5~2.0 kb,平均长度为0.8 kb,构建了蒙古柳cDNA-pYES2大肠杆菌文库。展开更多
文摘从安达盐碱地采收的蒙古柳种子在1/2MS固体培养基中培养,等到长出3~4片真叶的幼苗为实验材料,提取植株总RNA后分离mRNA,用SMART(Switching Mechanism At 5’end of RNA Template)方法合成蒙古柳cDNA,并连接到PYES2载体,用电转化法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞JM109。经测定,原始文库滴度为6×10^6 cfu·mL^-1,重组率大于98%。插入片段的长度大部分在0.5~2.0 kb,平均长度为0.8 kb,构建了蒙古柳cDNA-pYES2大肠杆菌文库。