Na_2CO_3胁迫对青龙桑、蒙古桑叶片生理和叶片光系统Ⅱ活力的影响

以青龙桑Moros alba‘Qinglong’和蒙古桑Moros alba‘Mongolia’为试验材料,研究了不同浓度Na2CO3对青龙桑和蒙古桑叶绿素含量、渗透调节能力、叶片PSⅡ活力的影响。结果表明:随着Na2CO3浓度的提高,青龙桑和蒙古桑的叶绿素含量均呈现下降趋势,在相同Na+浓度条件下,青龙桑降低的幅度明显低于蒙古桑;随着Na2CO3浓度的提高,青龙桑和蒙古桑的脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量呈现增加趋势,当Na+浓度>80 mmol/L时,在相同Na+浓度条件下,青龙桑的各组分含量明显高于蒙古桑;当Na+浓度低于120 mmol/L时,各项叶绿素荧光指标变化均不明显;当Na+浓度超过120 mmol/L时,随着Na+浓度的增加,桑树叶片的Fv/Fm、Fv/Fo、Sm、φPo、φEo、TRo/RC和ETo/RC呈现降低的趋势,而VJ、Mo、φDo以及DIo/RC增加;在相同Na+浓度条件下,青龙桑的各项叶绿素荧光指标变化幅度明显低于蒙古桑,说明盐胁迫抑制了PSⅡ受体侧QA向QB的电子传递,使桑树叶片捕获的光能比例降低,而用于热耗散的比例增加,用于QA-以后的电子传递能量比例减少。以上结果表明青龙桑对Na2CO3胁迫的适应能力高于蒙古桑。

桑树低温诱导基因Wap25的序列分析及表达产物的亚细胞定位

Wap25是从桑树幼茎克隆的低温诱导蛋白基因,为胚胎后期富集蛋白(LEA)基因的成员之一,与其它物种低温诱导基因的同源性很低。生物信息学分析表明,桑树低温诱导基因Wap25编码蛋白由226个氨基酸组成,分子质量25.3kD,等电点5.52;蛋白N端1-30位氨基酸表现出强烈的疏水性,其后是亲水性高的区域,平均亲水值达-1.020,而蛋白1-29位氨基酸为典型的真核生物蛋白质的信号肽序列,表明WAP25蛋白属于分泌型蛋白。用SubLocv1.0软件预测WAP25的亚细胞定位,将该蛋白定位于细胞质中。Tmpred软件预测WAP25不存在跨膜结构。构建Wap25与绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒,用基因枪法将其转入洋葱表皮细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下发现GFP分散于洋葱表皮的细胞质中,而在细胞核未发现GFP的表达,此结果与WAP25的亚细胞定位预测结果相符。