蒲公英中总黄酮的提取条件研究——“天然产物化学实验”课程实验设计

天然产物化学实验注重学生综合能力及创新能力的培养。通过实验设计,以蒲公英总黄酮为对象,结合紫外分光光度法探索不同条件对蒲公英总黄酮得率的影响,使学生掌握总黄酮提取和测定机理,从而夯实学生理论知识,提升学生解决天然产物提取复杂问题,强化知识运用能力。整个实验课程内容全面,操作简单,对培养学生科学探究、开拓创新的精神有很大帮助。

高效液相色谱-质谱联用鉴定黄芩总苷元提取物中黄酮类成分

目的:使用高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF/MS)技术,分离鉴定黄芩总苷元提取物中的黄酮类成分,并总结其裂解规律。方法:采用岛津LX-20210330-01 C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.1%甲酸为流动相A,甲醇-乙腈(50∶50)为流动相B进行梯度洗脱,对黄芩总苷元提取物中的黄酮类成分进行分离,利用电喷雾离子化-四极杆-飞行时间串联质谱高分辨测定各成分母离子及其子离子的准确质量,结合电喷雾离子源正、负离子模式下的质谱信息和色谱保留时间进行结构鉴定。结果及结论:除了黄芩素和汉黄芩素两个已知成分外,从黄芩总苷元提取物中共鉴定出31种黄酮类成分,包括12种苷类与19种苷元,其中有3个化合物为本研究首次鉴定,并分析归纳了黄酮类成分在电喷雾离子源正、负离子模式下的质谱碎片裂解规律。

蒲公英黄酮提取物对鲜切玉露香梨果的保鲜效果

随着鲜切果蔬产业的发展,天然植物提取物保鲜剂越来越受到关注。利用植物天然提取物进行鲜切果蔬保鲜不但安全高效,还能延长鲜切果蔬的货架期,提高其商品价值。为探究蒲公英黄酮提取物对鲜切玉露香梨果的保鲜效果,本研究在蒲公英黄酮提取的基础上,以无菌蒸馏水为对照,利用不同质量浓度(0.3 mg/ml、0.6 mg/ml、0.9 mg/ml、1.2 mg/ml)的蒲公英黄酮提取物对鲜切玉露香梨果进行浸泡处理,分析了贮藏期间鲜切玉露香梨果可滴定酸含量、可溶性固形物含量、总酚含量、丙二醛(MDA)含量等抗氧化指标和品质指标的变化。结果表明,与对照相比,适宜质量浓度的蒲公英黄酮提取物浸泡处理可以显著抑制贮藏期间鲜切玉露香梨果的相对电导率上升、MDA含量增加、色泽褐变和微生物的生长,维持鲜切玉露香梨果可滴定酸含量、可溶性固形物含量、总酚含量、硬度和2,2-二苯基-1-苦丙烯酰肼(DPPH)自由基清除率。其中,0.3 mg/ml质量浓度蒲公英黄酮提取物浸泡处理具有较好的保鲜效果,而高质量浓度蒲公英黄酮提取物浸泡处理会在一定程度上降低鲜切玉露香梨果的品质。

蒲公英提取物黄酮类物质成分及其抗氧化活性的初步研究

蒲公英全草干粉经乙醇回流提取 ,聚酰胺柱层析 (polyamidepole)得到的黄酮类提取物 (totalflavonoid)的纯度为 6 7.4% ,用高效液相色谱法 (HPLC)测定其中的芦丁 (Rutin)占 5 .49% ,槲皮素占 1.2 2 % ,另外还有其他黄酮类物质。经NBT法测定的结果表明 ,蒲公英黄酮类提取物和其中的芦丁均有较强的体外清除超氧阴离子 (O·-2 )

蒲公英黄酮类物质提取条件的优化与含量测定

蒲公英是一种常见的药用植物,内含多种化学物质,研究蒲公英内含的化学成分对其药用价值的开发利用具有重要意义。以蒲公英全草为研究对象,采用超声辅助溶剂提取法提取其黄酮类物质,对提取时间和提取温度进行优化,确定最佳提取条件;采用分光光度法,以芦丁标准溶液为标样,测定蒲公英内黄酮类物质的含量。结果表明,提取温度为70℃、提取时间为30min时,蒲公英黄酮类物质的提取效果最佳;蒲公英中黄酮类物质含量为4.33%。

蒲公英总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

研究旨在优化蒲公英总黄酮提取工艺,并研究其抗氧化活性。试验通过考察乙醇浓度、提取温度、提取时间对蒲公英总黄酮提取得率的影响,采用正交试验优化蒲公英总黄酮提取工艺。结果显示:蒲公英总黄酮最优提取工艺参数为乙醇浓度60%、提取温度70℃和提取时间45 min。在此条件下,蒲公英总黄酮提取得率为5.62%。蒲公英总黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸二铵盐(ABTS+)自由基具有较强的清除能力,其半数抑制浓度(IC50值)分别为235.6 mg/L和306.8 mg/L。研究表明,正交试验法优化超声波辅助提取工艺方案设计可行,蒲公英总黄酮具有较强的抗氧化性能,是一种优质的天然抗氧化物质。

蒲公英总黄酮提取及其抗氧化活性研究

研究了料液比例、超声处理时间、乙醇浓度和提取温度对蒲公英总黄酮提取率的影响。结果表明,蒲公英总黄酮最佳提取条件为:料液之比1∶50(m∶V)、提取超声的时间40min、乙醇的浓度60%、超声的提取温度60℃,该条件下蒲公英中总黄酮的实际提取率为9.37%。进行了总黄酮抗氧化性的研究,结果表明蒲公英总黄酮对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除率与黄酮浓度呈正比关系,抗氧化实验表明蒲公英总黄酮具有良好的抗氧化性。

蒲公英总黄酮提取物泡腾片的研制

为了制备蒲公英总黄酮提取物泡腾片,试验以感官质量为评价指标,进行单因素试验和正交试验。结果表明:蒲公英总黄酮提取物泡腾片的最佳配方是NaHCO3与柠檬酸的质量比为1∶2.5;蒲公英提取物添加量为16%;甜菊糖甙添加量为2.5%;同时添加一定比例的甘露醇和乳糖作为填充剂;以10%淀粉浆作为黏合剂;以1.5%硬脂酸镁作为润滑剂。

蒲公英总黄酮在聚乙二醇-硫酸铵双水相体系中的分配与提取

蒲公英中内含的黄酮类物质具有较高药用价值,用双水相萃取法提取植物中有效成分是新型提取高附加值生物质的有效方法。本文考察了PEG/(NH4)2SO4双水相体系萃取分离蒲公英总黄酮时聚乙二醇相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、温度、pH值5个因素对分配行为的影响,并通过正交实验优化了工艺条件。结果表明最佳双水相提取工艺条件为:(NH4)2SO4质量分数18%,PEG1000质量分数23%,pH值5.34,提取温度25℃,NaCl盐的存在与否对萃取影响很小,蒲公英中总黄酮的提取率可达5.47%。因此,使用双水相法提取蒲公英总黄酮是该类提取技术中一种更加绿色环保和高效的方法。

蒲公英总黄酮的提取工艺及定性分析

探讨了蒲公英总黄酮的提取工艺。在单因素实验的基础上,通过正交实验,确定总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度75%,温度70℃,液料比28∶1,时间60min,在此条件下,总黄酮含量达到3.869%(以芦丁计)。通过颜色反应和紫外光谱法对提取物进行了定性分析,结果表明,提取物中存在黄酮类化合物,其类型主要为黄酮醇类,还可能含有黄酮或二氢黄酮类。

马尾松花粉中总黄酮类物质提取条件的研究

采用溶剂浸提法从马尾松花粉中提取总黄酮类物质。通过单因素实验对影响马尾松花粉黄酮类物质提取率的因素进行了研究,并通过正交实验设计对其提取工艺进行了优化。结果表明,脱脂处理对总黄酮类物质的提取率没有明显影响;乙醇是马尾松花粉总黄酮类物质的最适提取剂,其最佳提取条件为乙醇浓度95%,料液比为1:25,温度为70℃,在此条件下,总黄酮类物质的提取率为13.52mg/g。

蒲公英总黄酮的提取及其抑菌性能

研究了蒲公英总黄酮的提取条件及其抑菌性能,考查了乙醇质量分数、料液比、提取温度、提取时间和提取次数等因素对蒲公英总黄酮提取效果的影响,并在单因素试验基础上进行了正交实验以确定最佳的提取条件。试验结果表明,蒲公英总黄酮的最佳提取条件为:以40%乙醇为提取剂,在70℃、料液比1∶20条件下提取4次,每次提取时间30min,蒲公英粗总黄酮的提取率为17.51%(以芦丁计)。最佳提取条件下,相对标准偏差为0.41%,说明试验重复性很好。利用蒲公英总黄酮对黑曲霉、宛氏拟青霉、酿酒酵母和枯草杆菌进行了抑菌试验研究。结果表明,0.43g/L(以芦丁计)的蒲公英总黄酮对宛式拟青霉和枯草杆菌具有良好的抑菌作用,对酿酒酵母具有一定的抑菌作用,而对黑曲霉没有抑菌作用。

蒲公英中总黄酮提取工艺的研究

目的对蒲公英中总黄酮的提取工艺进行优选。方法采用正交实验设计,以总黄酮的含量为指标,对提取溶剂、料液比、提取温度、提取时间4种因素进行研究。结果蒲公英细粉用甲醇,料液比1∶20,在70℃下超声提取10min,总黄酮的提取率较高。结论此工艺操作简便,重现性好,稳定可行。

超声波提取蒲公英花中总黄酮及总酚酸的试验研究

目的确定蒲公英花中总黄酮及总酚酸超声提取的最佳工艺,进而实现对其天然功能性色素的工业化生产。方法采用超声波提取技术,以对人体危害较轻的乙醇作为提取溶剂,通过正交试验考察了乙醇浓度、料液比、超声功率、温度等因素对蒲公英花中总黄酮及总酚酸提取率的影响。结果蒲公英花粉末用75%乙醇,料液比1∶100,超声功率100W,在55℃的条件下超声提取30min,总黄酮与总酚酸成分的提取较为完全,为蒲公英花的最佳超声提取条件。结论此工艺操作简便、重现性好、稳定可行,提取液色泽鲜黄、透亮,为蒲公英花中功能性色素的工业化生产提供了试验依据。

用响应面法优化蒲公英总黄酮的超声提取条件

目的:运用响应面法优化蒲公英总黄酮的超声提取条件。方法:采用单因素实验筛选实验因素及水平,根据Box-Behnken组合设计原理,以三因素三水平的响应面分析法优化蒲公英总黄酮的超声提取条件。结果:优选的超声提取条件为36%乙醇,130倍的料液比,超声提取42min,总黄酮含量预测值为3.14%,实测值为3.10%,与预测值的相对误差为1.27%。结论:用响应面法优化得到的提取条件合理、可靠,可用于对蒲公英总黄酮的超声提取条件的优化。

罗布麻叶总黄酮类化合物的酶解-溶剂提取工艺研究

[目的]研究了酶法提取罗布麻叶总黄酮的工艺,为罗布麻叶总黄酮的提取提供参考。[方法]罗布麻叶先以纤维素酶酶解预处理后再用溶剂乙醇提取其中的总黄酮。分别考查了酶解各因素如酶解pH值、酶用量、酶解温度、酶解时间以及溶剂乙醇的浓度对罗布麻叶总黄酮得率的影响,确定了罗布麻叶总黄酮的最佳提取工艺条件。[结果]罗布麻叶总黄酮的最佳提取工艺条件为:pH值5,酶用量3mg/g,酶解温度45℃,酶解时间2 h,乙醇浓度50%。该条件下总黄酮得率达到4.6%。[结论]以纤维素酶酶解预处理后再用溶剂乙醇提取罗布麻叶中的总黄酮得率明显提高。

蒲公英总黄酮提取及对羟自由基清除作用

为充分利用蒲公英植物资源,避免资源的浪费,探讨蒲公英总黄酮的提取、鉴别及对羟自由基清除作用。采用超声波乙醇浸提法从蒲公英中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用分光光度法测定含量,用蒲公英总黄酮对羟自由基清除作用进行试验。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.9366mg/mL,回收率为103%,其纯度和产率均较高。由此知该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取蒲公英黄酮类物质的有效途径。蒲公英总黄酮提取液对Fenton体系产生的.OH自由基有很好的清除作用。

超声辅助提取蒲公英中总黄酮的工艺研究

采用超声辅助提取蒲公英中总黄酮。分别研究了乙醇体积分数、料液比、超声时间、超声温度和提取次数对总黄酮提取的影响,通过正交实验优化了提取工艺。结果表明,总黄酮提取的最佳工艺条件是:乙醇体积分数65%、料液比1:35、超声时间35min、超声温度60℃,提取次数4次。在最佳条件下,总黄酮含量可达4.01%。

桑叶中总黄酮类化合物提取工艺的研究

本文研究了醇提法、微波法、超声波法从桑叶中提取总黄酮的工艺。通过正交实验研究了最佳提取条件。结果表明:桑叶中总黄酮类物质的最佳提取工艺件是60%乙醇,料液比1:30,超声提取35min,超声温度40℃,回流1h。

基于UHPLC-Q-TOF/MS技术分析肿节风总黄酮提取物促进巨核细胞分化的效应成分

目的筛选肿节风总黄酮提取物促进巨核细胞分化的效应成分。方法(1)以人巨核细胞白血病细胞(Dami)与人骨髓基质细胞(HS-5)共培养的方式建立巨核细胞分化障碍模型作为评价体系,实验分组:Dami组(Dami)、对照组(Dami+HS-5)、PMA组[Dami+HS-5+5 ng·mL-1佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)]、模型组[Dami+HS-5+1%兔抗大鼠血小板血清(APS)+5 ng·mL-1PMA],培养48 h。采用流式细胞术检测巨核细胞分化成熟表面标记分子CD41a、CD61的表达情况。(2)将49只SD雄性大鼠随机分为空白血浆组、15 min组、30 min组、60 min组、90 min组、120 min组、240 min组,每组7只。各给药组大鼠灌胃肿节风总黄酮提取物1.26 g·kg^(-1),在6个设定时间点(15、30、60、90、120、240 min)采血制备肿节风总黄酮提取物经时含药血浆。(3)采用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF/MS)对肿节风总黄酮提取物经时含药血浆进行分析,以峰面积构建肿节风总黄酮提取物经时含药血浆中的化学成分随时间变化量矩阵(X矩阵)。将所采集的6个不同时间点的肿节风总黄酮经时含药血浆对巨核细胞分化成熟障碍模型进行干预,采用流式细胞术检测细胞表面分子CD41a、CD61的表达水平,构建肿节风总黄酮提取物经时含药血浆效应矩阵(Y矩阵)。(4)将X矩阵和Y矩阵数据标准化处理后,采用偏最小二乘法(Partial least squares,PLS)计算分析量效关系,以变量重要性投影(Variable importance for projection,VIP)>1为阈值,筛选与细胞表面分子CD41a、CD61变化相关的效应成分,并进行化学成分鉴定,作为肿节风总黄酮提取物中促进巨核细胞分化的潜在效应成分,最后回归评价体系验证其药效。结果(1)与Dami组比较,对照组Dami细胞表面的CD41a表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,PMA组Dami细胞表面的CD41a、CD61表达水平均显著升高(P<0.01)。与PMA组比较,模型组Dami细胞表面的CD41a、CD61表达水平均显著降低(P<0.01)。(2)与空白血浆组比较,15、30、60、90、120、240 min各时间点Dami细胞表面分子CD41a、CD61表达水平均显著升高(P<0.01),且CD41a、CD61均在30 min组表达水平最高。在正、负离子模式下筛选出VIP值>1的潜在效应成分,并选取540.3638@12.25与559.2991@11.53两个成分进行药效学验证。559.2991@11.53被鉴定为胡萝卜苷(Daucosterol,Dau),540.3638@12.25被鉴定为迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖(Rosmarinic acid 4-O-β-Dglucoside,Ros)。Ros、Dau分别干预巨核细胞分化成熟障碍模型后,与模型组比较,Ros及Dau低、中、高剂量组(40、60、80μg·mL-1)的Dami细胞表面的CD41a、CD61表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论Ros、Dau可能是肿节风总黄酮提取物促进巨核细胞分化的效应成分。