复方蒲黄颗粒的制备及临床应用

目的:建立复方蒲黄颗粒的制备方法及质量控制标准并观察其临床疗效。方法:按照处方工艺制备复方蒲黄颗粒,建立性状、鉴别等质量标准,并用其治疗脑梗死197例,以脑血栓片为对照治疗脑梗死131例,进行临床疗效观察。结果:鉴别方法专属性强、重现性好;治疗组和对照组对临床症侯均有一定的疗效,其中眩晕、偏瘫、肢体麻木方面治疗组优于对照组(P<0.05),而在言语蹇涩方面,与对照组相比无显著性差异。结论:本制剂工艺可行,质量可靠,临床疗效确切。

蒲黄颗粒抗小鼠前列腺增生机制的实验研究

目的观察蒲黄颗粒对小鼠前列腺增生模型前列腺组织Ki67、CD34抗原表达的影响。方法将60只小鼠随机分为正常组、造模组、舍尼通组、蒲黄组,每组15只;皮下注射丙酸睾丸素5mg/kg连续21d造前列腺增生模型。各组分别按设计剂量给药,连续30d。摘取前列腺病理组织观察,免疫组织化学法检测各组小鼠前列腺组织Ki67、CD34抗原表达。结果蒲黄组与舍尼通组均可一定程度改善前列腺细胞增生的病理变化。造模组Ki67与CD34表达水平升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);蒲黄组与舍尼通组均可降低Ki67、CD34表达水平,与造模组比较差异有统计学意义(P<0.05),而两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论蒲黄颗粒降低前列腺组织Ki67、CD34抗原表达水平,抗前列腺增生作用与抑制前列腺细胞增殖和新生血管产生有关。

复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后GFAP表达的影响

目的研究复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法实验采用90只清洁级SD大鼠,随机分为6组(每组15只):假手术组(Sham组),模型组(I/R组),复方蒲黄大剂量组(PHH组),复方蒲黄中剂量组(PHM组),复方蒲黄小剂量组(PHL组),脑血栓片组(NXS组)。采用右侧颈总动脉夹闭手术,建立大鼠脑缺血再灌注模型,分别在术后6 h、24 h、72 h,运用TTC染色计算脑梗死体积,运用免疫组化方法检测脑组织GFAP的动态变化。结果GFAP的表达呈现随时间增加而增长,与I/R组相比较,PHH组、PHM组在术后24 h、72 h表达增长显著增加(P<0.05)。结论复方蒲黄颗粒能够有效减小大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积,调节脑缺血再灌注损伤后GFAP蛋白表达,以大、中剂量作用最为显著,这可能是本方对全脑保护的重要疗效机制之一。

复方蒲黄颗粒对脑缺血再灌注大鼠GAP-43表达的影响及动态变化规律

[目的]通过观察大脑缺血再灌注大鼠模型治疗前、后神经生长相关蛋白(growth associated protein 43,GAP-43)的表达和动态变化规律,探讨复方蒲黄颗粒对脑缺血再灌注后神经保护作用机制。[方法]用复方蒲黄颗粒大、中、小剂量组分别干预局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,于缺血再灌注1、3、7、14、21d这5个时间点断头取脑组织,免疫组化检测GAP-43的含量。[结果]模型组GAP-43的表达在再灌注1d就显著升高,7d达到高峰,14d开始下降,但均高于假手术组(P<0.05),21d的GAP-43表达逐渐下降(P>0.05)。复方蒲黄颗粒大、中剂量干预组中大鼠脑组织的GAP-43表达在缺血再灌注后1d、3d、7d、14d明显升高(P<0.05),再灌注21d时GAP-43的表达升高不明显(P>0.05)。[结论]复方蒲黄颗粒的神经保护作用机制可能与上调GAP-43表达有关。大脑缺血再灌注可使GAP-43表达增加,7d可能为治疗的关键时间窗。

蒲黄颗粒抗小鼠前列腺增生实验研究

目的:观察蒲黄颗粒对小鼠前列腺增生模型的影响。方法:75只小鼠随机分为正常对照组、BPH造模组、舍尼通对照组、蒲黄低剂量组、蒲黄高剂量组各15只,除正常对照组外,其他组皮下注射丙酸睾丸素制造前列腺增生模型。舍尼通对照组灌胃舍尼通,蒲黄低剂量组灌胃低剂量蒲黄颗粒,蒲黄高剂量组灌胃高剂量蒲黄颗粒,均连续30天。第52天处死小鼠,测定各组前列腺湿质量及血清睾酮含量。结果:小鼠前列腺湿质量及血清睾酮含量舍尼通对照组和蒲黄低剂量组均显著低于造模组(P<0.05),舍尼通对照组与蒲黄低剂量组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);小鼠前列腺湿质量及血清睾酮含量蒲黄高剂量组显著低于舍尼通对照组(P<0.05)。结论:蒲黄颗粒对丙酸睾酮所致的小鼠前列腺增生具有一定的抑制作用,其作用机制可能与降低血清睾酮水平有关。

复方蒲黄颗粒的制备工艺研究

复方蒲黄颗粒剂由蒲黄、连翘、川芎等6味中药配制而成,临床多用于治疗肾病,且疗效较好。传统用法为水煎剂。本研究拟在原水煎剂的基础上,将其制备成颗粒剂,以方便患者服用及长期保存。 1 材料 蒲黄、连翘、川芎等6味中药均购自杭州康恩贝有限公司。按照《中国药典》2010版标准检验，均符合规定。

复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究临床有效的中药复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法实验采用90只清洁级SD大鼠,随机分为6组(每组15只):假手术组(sham组),模型组(I/R组),复方蒲黄颗粒大剂量组(PHH组),复方蒲黄颗粒中剂量组(PHM组),复方蒲黄颗粒小剂量组(PHL组),脑血栓片组(NXS组)。采用右侧颈总动脉结扎手术,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,分别在术后6h、24h、72h通过神经功能评分观察神经行为学改变,采取TTC染色计算脑梗死体积。结果①与sham组相比,其他各组在术后6h评分均较高,并随时间推移评分逐渐下降;与I/R组比较,PHL组、NXS组评分无显著改善(P>0.05),但在PHH组、PHM组评分则有显著改善(P<0.05)。②I/R组梗死体积为21.55%;PHL组、PHM组、PHH组、NXS组梗死体积在12.87%～15.01%波动,与I/R组相比较,梗死体积显著缩小(P<0.05)。结论复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤具有良好的保护作用,以大、中剂量作用最为显著。

复方蒲黄颗粒质量标准的研究

目的:建立复方蒲黄颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对复方蒲黄颗粒中陈皮、黄芪、甘草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对君药蒲黄中的异鼠李素-3-0-新橙皮苷进行含量测定。结果:复方蒲黄颗粒中的陈皮、黄芪、甘草薄层色谱中,在与对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点;异鼠李素-3-0-新橙皮苷在3.56μg·mL-1～26.70μg·mL-1间呈良好的线性关系,r=0.9995,稳定性试验RSD为1.30%(n=5),平均回收率为99.04%(n=9),RSD为1.98%(n=9),重复性试验RSD为0.84%(n=5),精密度RSD为1.30%(n=5)。结论:所建立的鉴别法专属性强,定量方法操作简单、精密度高、重现性好,是控制复方蒲黄颗粒质量的有效方法。

复方蒲黄颗粒提取工艺研究

目的:探讨制备复方蒲黄颗粒提取的最佳工艺。方法:以异鼠李素-3-0-新橙皮苷含量、橙皮苷含量和醇浸出物量为指标,采用正交试验设计优选蒲黄、麦冬、陈皮醇提取条件;以芍药苷含量、水浸出物量为指标,采用正交试验设计优选黄芪、赤芍、甘草水提取条件。结果:确定蒲黄、陈皮、麦冬最佳醇提取条件为:8倍量70%乙醇提取2次,每次1.5h;黄芪、赤芍、甘草最佳水提取条件为:8倍量水提取3次,每次1.0h。结论:上述实验结果可为复方蒲黄颗粒提取工艺的确定提供实验依据。

复方蒲黄颗粒对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响

目的:观察复方蒲黄颗粒(PH)对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。75只大鼠分为假手术、模型和PH高、中、低剂量组。采用Nissl染色观察神经元形态变化,TUNEL法检测神经元凋亡,原位杂交检测Caspase-3mRNA的表达。结果:PH高、中剂量组少量细胞核固缩深染,细胞丢失、凋亡细胞数及Caspase-3mRNA阳性细胞数均显著减少。结论:PH可下调Caspase-3的表达,从而抑制神经元凋亡,对脑缺血再灌注损伤有保护作用。

复方蒲黄颗粒对局灶性脑缺血再灌注大鼠热休克蛋白70及其mRNA表达的影响

目的观察复方蒲黄颗粒对大鼠脑缺血再灌注后热休后蛋白70(HSP-70)及其mRNA表达的影响。方法75只雄性SD大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,随机分为假手术组、模型组,蒲黄颗粒大、中、小剂量组,每组15只。各组大鼠分别在缺血2小时再灌注6、24、72小时断头取脑组织,每时间点5只。再灌注24小时进行神经功能缺陷评分,采用Nissl染色观察神经元形态学变化;采用原位杂交检测HSP-70 mRNA的表达;采用免疫组化法检测HSP-70蛋白的表达。结果蒲黄颗粒大、中剂量组在缺血再灌注24小时时神经功能改善显著优于模型组(P<0.05);Nissl染色结果显示,模型组大脑皮层神经元形态不规则,体积缩小,胞核固缩深染,细胞间质水肿,尼氏体减少,可见明显的神经元丢失,而蒲黄颗粒各剂量组未见明显的神经元损伤和丢失;模型组在再灌注6～72小时HSP-70及其mRNA的表达均增加,与假手术组比较各时间点差异均具有统计学意义(P<0.01),蒲黄颗粒各剂量均能增强HSP-70及其mRNA的表达,与模型组各时间点的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论复方蒲黄颗粒能促进脑缺血再灌注后HSP-70的表达,减轻缺血再灌注损伤。

蒲黄消炎颗粒急性毒性试验

目的:评价蒲黄消炎颗粒的急性毒性,为畜用临床剂量的设计提供依据。方法:蒲黄消炎颗粒按原生药4 g/mL的浓度及40 mL/kg的给药容量,24 h内给昆明种小鼠灌胃1次,连续观察14 d内小鼠的体重,毒性反应及死亡情况。结果:给药组和对照组小鼠在第1、7、14天的体重并无差异;小鼠无死亡,也无明显中毒反应,测得蒲黄消炎颗粒最大耐受量(MTD)为原生药160 g/kg(成人临床拟用量的333倍)。结论:蒲黄消炎颗粒在临床常用剂量下是安全的。