蓓萨罗丁的合成及优化

以2,5-二甲基-2,5-己二醇为原料,经氯代、F-C烃化、F-C酰化、Wittig反应、水解反应等七步反应制得抗肿瘤药物蓓萨罗丁,并对其合成工艺进行优化,降低成本和操作难度,提高了产率。

蓓萨罗丁固体分散体制备及药物代谢动力学检测

为观察蓓萨罗丁固体分散体制备并评估蓓萨罗丁固体分散体药物代谢动力学特征。经LC-MS方法检测,观察SD大鼠体内药物代谢动力学,并进一步观察SD大鼠体内该分散体组织分布特征。蓓萨罗丁固体分散体血浆AUC浓度显著提升,从7035.15μg·L^(-1)·h增长至10157.12μg·L^(-1)·h,给药峰值时间得到显著缩短,从7.32 h缩短为0.9 h,Cmax呈现增加趋势,具体增长幅度为626.35~3012.89μg·L^(-1),MRT呈现下降趋势,下降幅度为11.32~6.31 h。蓓萨罗丁固体分散体使原药药物代谢动力学特征得到一定的改变,无论是生物利用度,还是组织含量均得到显著提升,能够为后续蓓萨罗丁晶型药物临床研究积累数据,并为验证蓓萨罗丁药物的质量和效用提供依据。

蓓萨罗丁通过激活ISGylation通路诱导乳腺癌MCF7细胞凋亡

目的研究蓓萨罗丁通过ISGylation对乳腺癌细胞系凋亡的影响。方法通过不同浓度、不同时间的蓓萨罗丁处理MCF7细胞,用Annexin V-FITC/7-AAD法检测细胞凋亡情况。同时利用免疫印迹实验检测蓓萨罗丁诱导Cyclin D1下调的时间依赖性和浓度依赖性以及对ISGylation通路的依赖性。结果蓓萨罗丁可以促进MCF7细胞凋亡,下调Cyclin D1表达并在一定程度上依赖ISGylation。结论蓓萨罗丁可以通过ISGylation下调Cyclin D1表达并诱导乳腺癌细胞系凋亡,是乳腺癌的潜在治疗药物。

蓓萨罗丁对AD小鼠空间认知、学习记忆损伤及海马神经再生的影响

目的 探讨蓓萨罗丁（BEX）对AD小鼠空间认知、学习记忆损伤及海马神经再生的影响. 方法 雄性健康ICR小鼠80只按随机数字表法分为对照组、模型组、BEX低剂量组和BEX高剂量组,每组20只.后3组小鼠采用侧脑室注射Aβ25-35肽段制备AD模型,后2组小鼠均于造模后7d灌胃50、100mg/ （kg·d）的BEX（连续14 d）,对照组给予等量生理盐水.造模后28 d采用Morris水迷宫和Y型电迷宫实验分别检测各组小鼠的空间认知、学习记忆功能.各组小鼠于造模后每天腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）3次,连续28 d后采用免疫组化染色检测海马BrdU的表达;双皮层蛋白（DCX）染色检测神经元前体细胞的增殖和迁移;Hoechst染色检测细胞凋亡;甲苯胺蓝染色检测成熟颗粒细胞;ELISA法检测海马脑源性神经营养因子（BDNF）的含量;Westernblotting检测海马胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）和生长相关蛋白-43 （GAP-43）的表达. 结果 Morris水迷宫实验第3、4、5、6天对照组、BEX高剂量组、BEX低剂量组、模型组小鼠的逃避潜伏期逐渐增加,第6天4组大鼠站台所在象限停留时间逐渐降低[分别为（33.76±2.87）s、（29.37±2.85）s、（26.68±3.26）s、（21.53±3.63）s];小鼠的正确反应所需电击次数逐渐增加,正确反应次数逐渐减少;海马区BrdU阳性细胞数、DCX阳性神经突起长度、DCX阳性神经突起密度和成熟颗粒细胞数逐渐减少,而Hoechst阳性细胞数逐渐增加;海马BDNF水平、GFAP、GAP-43蛋白表达（分别为0.81±0.28、0.76±0.22、0.62±0.16、0.55±0.11）逐渐降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 BEX可改善AD小鼠的空间认知、学习记忆损伤,并促进其海马神经再生.

蓓萨罗丁-聚乙烯吡咯烷酮共无定型物制备及在SD大鼠体内评价

蓓萨罗丁是一种新型维甲酸类似物,大量研究表明其具有神经保护作用。其晶I型的溶解度和生物利用度较低,严重限制了蓓萨罗丁的临床应用。本文首次制备蓓萨罗丁-聚乙烯吡咯烷酮共无定型物样品,基于X射线衍射及红外光谱分析表征了共无定型物结构。同时,利用LC-MS建立SD大鼠血浆及组织中蓓萨罗丁检测方法。体外溶出结果表明共无定型物使蓓萨罗丁在纯水中溶出度提高了4.17倍。SD大鼠分别给予30 mg·kg^-1蓓萨罗丁和共无定型物后,共无定型给药组的蓓萨罗丁血浆AUC从7 034.89μg·L^-1·h提高至10 174.03μg·L^-1·h,达峰时间从7.33 h显著提前至0.9 h,同时Cmax由627.76μg·L^-1显著提升至3 011.88μg·L^-1。各个组织中的蓓萨罗丁含量都有提升,其中以脑、肝和肾组织中提升最为显著。动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院药物研究所动物伦理委员会的规定。结果表明蓓萨罗丁-聚乙烯吡咯烷酮共无定型物改变了原药药物代谢动力学特征,为蓓萨罗丁共无定型物治疗脑部疾病提供临床前数据支持。

蓓萨罗丁对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌肥厚及线粒体损伤的影响

目的探讨视黄醇X受体α(RXRα)激动剂蓓萨罗丁(Bex)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的SD大鼠心肌肥厚和线粒体损伤的影响及机制。方法通过AngⅡ胶囊渗透泵皮下植入法建立SD大鼠心肌肥厚及心肌线粒体损伤模型。40只雄性SD大鼠随机分为5组:空白对照组、Bex组[空白对照+Bex:30 mg/(kg·d)]、AngⅡ组[AngⅡ:200 ng/(kg·min)]、AngⅡ+Bex10组[AngⅡ:200 ng/(kg·min)+Bex:10 mg/(kg·d)]、AngⅡ+Bex30组[AngⅡ:200 ng/(kg·min)+Bex:30 mg/(kg·d)];尾套法测大鼠血压;心脏超声评估大鼠心功能;放射免疫法测血清及心肌组织中AngⅡ含量;扫描电镜观察心肌组织线粒体超微结构;免疫印迹法测心肌组织心房钠尿肽(ANP)、RXRα、线粒体外膜转运蛋白70(Tom70)、线粒体成型蛋白(Opa1)水平。结果与空白对照组比较,AngⅡ组血清AngⅡ水平升高(P<0.05),但各组间心肌组织的AngⅡ水平差异无统计学意义。Bex组与空白对照组血压的差异无统计学意义,与空白对照组相比,AngⅡ组大鼠血压水平升高,AngⅡ组、AngⅡ+Bex10组、AngⅡ+Bex30组大鼠血压水平差异无统计学意义。AngⅡ组舒张早期二尖瓣口血流速度与二尖瓣环峰值运动速度比值(E/e’)较空白对照组增加(P<0.05);与AngⅡ组比较,AngⅡ+Bex10组及AngⅡ+Bex30组E/e’降低(均P<0.05)。透射扫描电镜结果显示:AngⅡ可诱导SD大鼠心肌线粒体明显肿胀,嵴模糊、断裂甚至消失,Bex可呈剂量依赖性矫正AngⅡ诱导的SD大鼠心肌线粒体损伤。免疫印迹结果显示:AngⅡ可诱导心肌组织ANP表达水平上调及RXRα、Tom70和Opa1表达水平下调(P<0.05),Bex可呈剂量依赖性抑制AngⅡ诱导的心肌组织ANP表达水平上调及RXRα、Tom70和Opa1表达水平下调(P<0.05)。结论 AngⅡ可诱导SD大鼠心肌肥厚及心肌线粒体损伤;Bex可能通过矫正心肌线粒体损伤改善AngⅡ诱导的SD大鼠心肌肥厚。

蕈样霉菌病靶向治疗新进展

蕈样霉菌病在西方是最常见的原发皮肤T细胞淋巴瘤,受侵皮肤依表现分为斑片期、浸润性斑块期、肿瘤期。MF的预后主要取决于疾病分期,目前尚无治愈该病的方法,本文就三种新型靶向治疗药物——蓓萨罗丁(Bexarotene)、Vorinostat和Denileukin diftitox对MF的治疗进展作一综述。

药物调控PPAR-γ/RXR-α信号通路对改善丰宫并殖吸虫感染所致大鼠肺损伤的作用

目的探索通过药物调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ/视黄醛X受体α(PPAR-γ/RXR-α)对改善丰宫并殖吸虫感染所致大鼠肺损伤的作用。方法从云南省疫源地采集溪蟹,分离丰宫并殖吸虫后尾蚴,于SD大鼠腹壁皮下注射后尾蚴(8条/鼠),感染大鼠分为高脂饮食组、罗格列酮组、蓓萨罗丁组,每组10只,分别予以高脂饮食(高脂饲料)、罗格列酮[3 mg/(kg•d)]、蓓萨罗丁[10 mg/(kg•d)]灌胃,连续给药7 d,以感染大鼠和健康大鼠分别为感染对照组和健康对照组。首次给药后28 d处死大鼠,取肺组织和心尖血液,制备肺组织切片,HE染色观察肺组织的损伤情况,并进行肺泡炎半定量评分;ELISA检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;提取肺组织总蛋白,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测肺PPAR-γ/RXR-α信号通路[PPAR-γ、RXR-α、脂肪酸转运蛋白3(FATP3)、载脂蛋白A1(ApoA1)]、核因子κB(NF-κB)信号通路[p65、激活子蛋白1(AP1)]和janus激酶(JAK)/信号传导及转录激活(STAT)信号通路(JAK2、STAT3)关键靶分子蛋白的相对表达量。多组间比较采用单因素ANOVA分析。结果除蓓萨罗丁组2只大鼠感染失败外,其余大鼠均被感染成功,肺脏可见寄生虫囊包或在胸腔中可查见寄生虫。HE染色显示,感染对照组大鼠肺泡间隔中可见大量炎性细胞浸润,肺泡壁增厚,出现肺泡腔塌陷或闭合;高脂饮食组可见明显炎症损伤,与感染对照组相比较轻,肺泡腔充气略改善;罗格列酮组和蓓萨罗丁组肺泡间隔的炎性细胞较感染对照组明显减少,肺泡壁增厚程度明显减轻,肺泡腔充气明显改善。健康对照组、感染对照组、高脂饮食组、罗格列酮组、蓓萨罗丁组大鼠的肺泡炎半定量评分分别为(0.300±0.053)、(2.200±0.189)、(1.900±0.320)、(1.300±0.301)和(1.500±0.112)分(F=12.033,P<0.05)。ELISA检测结果显示,健康对照组、感染对照组、高脂饮食组、罗格列酮组、蓓萨罗丁组大鼠血清IL-1β水平分别为(103.23±3.37)、(111.59±20.49)、(110.13±12.95)、(89.91±14.84)和(96.34±19.03)pg/ml,TNF-α水平分别为(144.81±1.35)、(180.21±23.38)、(171.76±27.83)、(155.37±13.67)和(143.24±23.66)pg/ml,5组之间差异均有统计学意义(F=17.236、13.558,均P<0.05);其中,感染对照组IL-1β和TNF-α水平均高于健康对照组,罗格列酮组和蓓萨罗丁组低于感染对照组(均P<0.05)。Western blotting检测结果显示,健康对照组、感染对照组、高脂饮食组、罗格列酮组、蓓萨罗丁组大鼠肺组织中,PPAR-γ的相对表达水平分别为0.51±0.09、0.67±0.06、0.75±0.08、0.34±0.02和0.56±0.04,RXR-α分别为0.89±0.05、0.15±0.03、0.81±0.09、0.22±0.02和0.61±0.10,FATP3分别为0.59±0.06、0.64±0.060、0.68±0.09、0.59±0.09和0.55±0.03,ApoA1分别为0.58±0.04、0.83±0.11、0.92±0.19、0.71±0.04和0.63±0.08,5组之间差异均有统计学意义(F=25.70、67.12、8.94、11.58,均P<0.05);p65的相对表达水平分别为0.25±0.19、1.01±0.21、0.27±0.15、0.32±0.01和0.22±0.11,AP1分别为0.11±0.09、1.12±0.36、0.08±0.02、0.03±0.00和0.02±0.01,JAK2分别为0.76±0.18、1.11±0.24、0.34±0.06、0.42±0.01和0.35±0.04,STAT3分别为0.80±0.33、1.11±0.27、0.68±0.22、0.77±0.06和0.68±0.19,5组之间差异均有统计学意义(F=43.77、85.19、37.22、17.63,均P<0.05)。其中,感染对照组PPAR-γ、FATP3、ApoA1、p65、AP1、JAK2和STAT3的相对表达水平高于健康对照组,罗格列酮组和蓓萨罗丁组低于感染对照组;感染对照组RXR-α的相对表达水平低于健康对照组,高脂饮食组、罗格列酮组和蓓萨罗丁高于感染对照组(均P<0.05)。结论建立了丰宫并殖吸虫感染大鼠肺损伤模型,药物调控PPAR-γ/RXR-α信号通路可通过抑制NF-κB和JAK/STAT信号通路发挥抗炎作用,减轻肺损伤的严重程度。