原发性肝癌蓖麻凝集素受体的观察

应用蓖麻凝集素(RCA)以ABC亲和细胞化学方法标记原发性肝癌组织,其RCA受体阳性率为86.4％(57/66),其中肝细胞癌63例,胆管上皮癌3例,其阳性率分别为85.7％(54/63)和100.0％(3/3),而对照组包括10例正常肝组织,9例肝炎,22例肝硬化的肝细胞均无RCA受体表达。作者认为,RCA受体出现是原发性肝癌重要标记之一。结果表明,RCA受体阳性率与肝细胞癌分化程度或排列方式无明显关系,但RCA受体分布型式与肿瘤分化程度似乎有一定关系,提永低分化肝细胞癌糖基可能更加紊乱。本文结果还显示,癌旁宿主部分肝细胞RCA受体呈阳性,这种化学结构异常先于形态学改变,对于认识癌前病变及诊断也有重要意义。

短额负蝗配子发生过程中蓖麻凝集素受体的分布

利用凝集素细胞化学方法对短额负蝗Atractomorpha sinensis Bolivar配子发生过程中蓖麻凝集素(Ricinus communis agglutininⅠ,RCA-Ⅰ)受体分布进行了定位研究,旨在认识昆虫配子发生过程中β-半乳糖复合物的分布规律及意义。结果表明:在短额负蝗精子发生过程中,RCA-Ⅰ在各期生精细胞膜上均有明显的阳性反应,变形期及成熟期精子头部为中强度阳性反应。卵子发生中,各阶段卵母细胞均为阳性反应,在卵母细胞生长期阳性反应达峰值,随着卵黄颗粒的逐渐形成,阳性反应逐渐减弱,成熟卵子中卵黄膜上重新出现中强度阳性反应。结果提示短额负蝗配子发生过程中β-半乳糖复合物的高度表达和修饰变化与其配子发生密切相关。

小鼠表皮发育期间蓖麻凝集素受体的定位

采用酶标凝集素技术，在光镜水平对小鼠表皮发育期间蓖麻凝集素的受体进行定位，结果表明：在胚胎期间周皮细胞和角质层以及基膜中均有Ｇａｌ残基分布；在表皮中间层、毛根原基处无Ｇａｌ，在眼睑和眼睑缘处也无Ｇａｌ分布．Ｇａｌ可能参与表皮的角质化和基膜组建，与周皮在胚胎期发挥正常功能有关．

蓖麻凝集素研究进展(综述)

本文介绍蓖麻凝集素的性质、生理功能及用途等方面的研究成果,通过前人在蓖麻凝集素应用领域的工作,阐述其科学研究与应用价值,并对其进一步应用的研究趋势进行探讨。

蓖麻凝集素协同乐铂杀伤非小细胞肺癌细胞的实验研究

目的 :研究蓖麻凝集素 ( RCA)协同乐铂 ( Lob)对人非小细胞肺癌细胞的杀伤作用。方法 :运用MTT法和间接免疫荧光法 ,分别测定原代培养非小细胞肺癌细胞在 Lob、RCA、RCA+ Lob的作用下生长增殖的情况。结果 :RCA+ Lob组细胞生长抑制率 ( 4 5 .0± 8.4) %比 Lob组 ( 1 4.2± 5 .0 ) %明显增高 ( P<0 .0 1 ) ;RCA+ Lob组癌细胞中 PCNA的含量低于对照及 Lob组 ( P<0 .0 1 )。结论 :RCA增强 Lob对癌细胞生长增殖的抑制作用。

蓖麻凝集素-Ⅰ受体在正常和致畸神经管发育过程中的表达

目的 探讨蓖麻凝集素-Ⅰ (RCA-Ⅰ)受体在正常发育和过量维生素A酸致畸神经管发育中的分布状况以及变化规律.方法:以生物素标记的凝集素为探针,采用SABC亲和细胞化学法检测RCA-Ⅰ受体在正常和致畸神经管的分布情况.结果:正常发育和致畸神经管,RCA-Ⅰ受体在神经管腔面、基底面、神经上皮细胞的胞膜和胞质均有不同程度的阳性表达.随着发育进展,RCA-Ⅰ受体在正常发育神经管的头部和尾部的表达水平呈现逐渐上升趋势;在体部是先上升后下降;在维生素A酸致畸组,RCA-Ⅰ受体的表达水平明显低于正常组.结论.RCA-Ⅰ受体参与了神经管形态构建过程并呈现规律性变化,并且其表达水平可作为维生素A酸诱发神经管畸形的检测指标.

碘标蓖麻凝集素在荷人肝癌裸鼠模型中生物分布和定位

近年来,凝集素作为一种新型导向载体已广泛用于肿瘤的阳性显象。本文使用体外对肝癌有高亲和力的蓖麻凝集素(RCA_1)为载体,在荷人肝癌裸鼠模型中进行生物分布和定位,发现肝癌中未见明显放射性积聚,摄取放射性较多的器官是胃、肠、脾。 材料和方法 ①RCA_1系Sigma公司产品,人肝癌裸鼠模型(ZSH89412)系本所林芷英教授提供:②ABC法测定原发性肝癌及裸鼠移植肝细胞癌内RCA_1受体;③Karber改进法测定RCA_1 LD_(60):④^(131)I标记RCA_1在荷人肝癌裸鼠体内生物分布和定位:Iodogen法标记RCA_1,Sephadex

人胚食管上皮和食管癌的蓖麻凝集素受体研究

用蓖麻凝集素(RCA Ⅰ)对3、4、5、6、7、8个月和出生前人胚食管和食管癌组织采用ABC法进行了石蜡切片标记。结果发现,人胚食管上皮在8月前后,有较明显的分化过程。3-7月,RCA Ⅰ所识别的半乳糖残基仅出现在顶部细胞纤毛的膜上,8月起,食管上皮逐渐由纤毛型演变为非纤毛型,RCA Ⅰ染色中见到基底细胞向表面分化出RCA Ⅰ阳性细胞取代RCA Ⅰ阴性细胞。意味着胞膜上半乳糖残基的表现早于上皮细胞形态学的改变。食管癌细胞,RCA Ⅰ受体的分布和着色的深度都与正常细胞不同、染色加深,不仅在胞膜而且在胞浆,都呈现强的阳性反应。结果提示:蓖麻凝集素对食管上皮的发育、分化以及癌变的研究,是有价值的。

人体肝癌和裸鼠肝癌模型中蓖麻凝集素受体分布

人体肝癌和裸鼠肝癌模型中蓖麻凝集素受体分布江贤朋，夏晓玲，周信达，汤钊猷上海医科大学肝癌研究所（２０００３２）细胞膜糖蛋白和糖脂中糖基的改变可导致细胞识别和粘附性发生改变，伴随有细胞的恶性转化、侵袭件生长和转移等生物学特性［１，２］。鉴于凝集素具有与...

蓖麻凝集素－Sepharose4B柱层析纯化人绒毛膜促性激素

本文报导一种新的制备和纯化ＨＣＧ的方法。正常２～５个月妊娠妇女尿用苯甲酸钠吸附的脱附品，经５０％乙醇抽提、１０～６０％乙醇分级、ＤＥＡＥ－纤维素柱层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ－蓖麻凝集素柱层析纯化后，低温酒精沉淀干燥，可得到生物活性４６００ＩＵ／ｍｇ的ＨＣＧ精品。

蓖麻凝集素的纯化及其对肺癌血清末端Galβ1-4GlcNAc糖链的测定

作者应用生物化学方法从中药蓖麻籽中分离纯化蓖麻凝集素,经SDS-PAGE和血球凝集试验鉴定纯度及活性后,用亲和层析法获得的蓖凝集素识别的糖蛋白.用蓖麻凝集素和辣根过氧化物酶标记的糖蛋白建立了一种血清末端Galβ1-4GlcNAc糖链分子ELISA检测方法.对肺癌.良性肺部疾病患者和正常人血清检测结果证实:肺癌患者血清中蓖麻凝集素识别的末端Galβ1-4GlcAc糖链分子表达明显增加.以正常人组血清检测平均值加2个标准差之和(11-5×2=21U ml)作为判断肿瘤的阳性阀值.肺癌阳性率为60.6％(20/33);良性肺部疾病21.4％(6,28);正常人仅为4.0％(1 25).它的检测和分析对肺癌标志物的寻找及其发病机理的探讨具有一定意义.

慢性癫痫大鼠大脑皮质、海马胶质细胞激活的凝集素组化研究

在腹腔注射马桑内酯所致的大鼠慢性点燃癫痫模型上 ,应用小胶质细胞的特异性标记物蓖麻凝集素 - 12 0(Ricinus comm unis agglutinin- 12 0 ,RCA- 1)对大鼠海马和大脑皮质小胶质细胞及其形态学进行凝集素组化研究。结果显示 ,慢性癫痫大鼠小胶质细胞无序排列、散乱分布。小胶质细胞增生显著 ,RCA- 1受体表达增加 (P<0 .0 1) ,细胞体积增大 ,多数呈高度分枝状、多边形或圆形。表明在慢性癫痫大鼠的中枢神经系统中有小胶质细胞的持续激活 ,胶质增生 ,功能活跃 。

凝集素亲和层析技术分离金花茶多糖的研究

以蓖麻凝集素(RCA)为亲和配体制备亲和层析树脂,在比较2种固定载体制备亲和树脂对金花茶多糖分离效果的基础上,探讨了多糖上样量、NaCl浓度以及洗涤量对RCA-Sepharose-2B亲和树脂结合率或再生效果的影响,并采用高效液相色谱(HPLC)对亲和多糖进行分离效果分析,为将亲和层析技术应用于金花茶活性多糖的分离纯化提供科学依据。研究结果显示,相比AF-Amino-650 m树脂,RCA-Sepharose 2B亲和树脂的分离效果比较好,而且可以进行反复使用多次。多糖上样量显著影响多糖与树脂的亲和效果,多糖结合率随上样量增加呈倒U型变化,当多糖上样量为10.4 mg/g亲和层析树脂时,其亲合率最高,达到57%左右;NaCl浓度对树脂的再生效果也有显著影响,用含0.2 mol/L NaCl的磷酸缓冲液洗涤树脂可以有效恢复树脂对多糖的亲和效果。HPLC分析结果显示分离获得的亲和活性多糖是由3种不同分子量的多糖组分组成。

东方蜜蜂微孢子虫蓖麻毒素B凝集素基因的分子克隆及生物信息学分析

为获得东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)的NCRBL-081基因序列,并对NCRBL-081编码蛋白进行预测和分析。本研究利用RT-PCR克隆NCRBL-081基因,利用相关生物信息学工具对NCRBL-081编码蛋白进行预测。结果表明:NCRBL-081共含有630个核苷酸,可编码含209个氨基酸的亲水性蛋白;NCRBL-081编码蛋白含有1个信号肽,6个明显的丝氨酸,5个酪氨酸磷酸化位点及1个跨膜结构域;该蛋白含有20.10%的α螺旋,8.61%的β折叠,25.84%的延伸链及45.45%的无规卷曲,且具有Ⅱ型核糖体失活蛋白家族的典型特征;同一个微孢子虫物种的不同RBL蛋白之间进化距离较近,而不同微孢子虫物种的RBL蛋白之间进化距离较远;东方蜜蜂微孢子虫的NCER;00581与AAJ76;00008081之间亲缘关系较近。研究结果解析了东方蜜蜂微孢子虫NCRBL-081的序列,并揭示了东方蜜蜂微孢子虫NCRBL-081编码蛋白的分子特征,可为后续功能探究提供依据。

β-1,4-半乳糖苷键在星形胶质细胞瘤中的表达特征

目的研究-β1,4-半乳糖苷键在各型人脑星形胶质细胞瘤中的表达变化特征。方法分别提取人正常脑及星形胶质细胞瘤蛋白质,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),考马斯亮蓝(CBB)染色。并利用特异识别-β1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素-Ⅰ(RCA-Ⅰ),经letin blot和组织化学方法分析-β1,4-半乳糖苷键在各型人脑星形胶质细胞瘤中的表达变化和表达定位。结果CBB染色结果显示,人正常脑及星形胶质细胞瘤的蛋白质组成相似。RCA-I letin blot显示:脑星形胶质细胞瘤组织半乳糖基化较正常脑组织有升高趋势,并且有一61 kD的蛋白在胶质瘤组织中被半乳糖基化。组织化学方法表明:-β1,4-半乳糖苷键散在表达于正常脑组织和各级胶质瘤组织中,随着肿瘤分级增高,表达-β1,4-半乳糖苷键的细胞增多:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ平均RCA-I染色阳性率分别为15%、21%、28%和41%,而正常脑组织平均RCA-Ⅰ染色阳性率为8%。结论-β1,4-半乳糖苷键的表达与人脑星形胶质细胞瘤恶性程度密切相关,为分析-β1,4-半乳糖苷键及其相关糖基转移酶在恶性胶质瘤中的发病和诊治意义奠定基础。

β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化

为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1～ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1。

β1,4-半乳糖基转移酶-I表达质粒在许旺细胞中的转染与鉴定

目的 构建 β1,4 半乳糖基转移酶 I(β1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)表达质粒 ,并将其转染到许旺细胞中 ,为探讨周围神经许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的生物学意义提供研究基础。 方法 构建 β 1,4 GalT I表达质粒 ,并将其转染到分离培养的许旺细胞中 ;用特异识别 β1,4 半乳糖苷键的蓖麻凝集素 I(RicinusCommunisAgglutinin I,RCA I)免疫组织化学方法和NorthernBlot鉴定转染情况。结果 通过酶切鉴定和测序分析 ,实验成功构建 β 1,4 GalT I表达质粒。将构建的表达质粒转染到许旺细胞中 ,经鉴定表明 ,转染的表达质粒在许旺细胞中能表达 β 1,4 GalT I,并随转染浓度增高而表达增加。 结论 β 1,4 GalT I在许旺细胞中的转染和表达 ,对分析许旺细胞表达 β 1,4 GalT I的意义如对其自身增殖的影响和对神经元生长作用 。

β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ在先天性巨结肠的表达及意义

目的 观察β-1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1,4-galactosyltransferase-Ⅰ,β-1,4-GalT-Ⅰ）基因B4GALT1和蛋白在先天性巨结肠（HD）中的表达及其催化合成的β-1,4-半乳糖苷键（β-1,4-galactosylated carbohydrate,Galβ1-4GlcNAc）糖链在HD中的表达和分布,探讨它们与HD的发病关系及其意义.方法 运用RT-PCR和Western blot技术检测37例HD患儿狭窄段（无神经节细胞段）、移行段、正常段结肠肠壁组织和6例对照组肠套患儿中B4GALT1 mRNA和β-1,4-GalT-Ⅰ蛋白的表达,计算其相对量并进行比较分析.采用免疫组织化学方法观察肠壁内各层之间β-1,4-半乳糖苷键（利用特异性识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素）的分布情况.结果 RT-PCR和Western blot结果显示B4GALT1基因及β-1,4-GalT-Ⅰ蛋白在狭窄段表达明显增高,从狭窄段到正常段逐渐减低,差异有统计学意义（P〈0.05）,HD扩张段和对照组肠段表达差异无统计学意义;免疫组化结果显示,特异识别β-1,4-半乳糖苷键糖链结构的蓖麻凝集素（RCA-Ⅰ）染色面积及染色强度从狭窄段到正常段依次减弱,差异有统计学意义（P〈0.05）,同样HD扩张段和对照组肠段RCA-Ⅰ的表达差异无统计学意义,两者呈正相关.结论 β-1,4-GalT-Ⅰ在HD狭窄段（无神经节细胞段）表达增高是内在的,它与HD的发生可能存在某种内在的联系.