蓖麻饼制取分离蛋白的研究——Ⅰ分离蛋白的制取

本文研究了用脱脂蓖麻饼制取分离蛋白的方法,所得分离蓖麻蛋白的蛋白质含量为80.20%. 国内尚无这种报告。实验表明,分离蓖麻蛋白成品中未检出蓖麻毒素,而且营养价值也是满意的。

褐菖鲉结合蛋白的分离提纯及某些性质研究

褐菖鲉结合蛋白的分离提纯及某些性质研究陈荣忠，杨丰，徐洵（国家海洋局第三海洋研究所，厦门）关键词镉结合蛋白，分离提纯，褐菖 ，Ｓｅｂａｓｔｉｓｃｕｓ；ｗａｒｍｏｒａｔｕｓ前言自５０年代日本发生由汞引起的水俣病及６０年代由镉引起的骨痛病以来，重金属污染...

蓖麻饼制取分离蛋白的研究

本文探讨用脱脂蓖麻饼制取分离蛋白的方法。实验表明,以弱硷性溶液提取蛋白的方法可以制取分离蓖麻蛋白。在所得成品中未检出蓖麻毒素,其蛋白质含量为80.20％,脂肪为1.89％,碳水化合物为4.87％。

人心肌肌凝蛋白轻链的分离提纯与鉴定研究

参考采用Schoβler方法并加以改进,分别应用等电点沉淀法、快速蛋白质液相层析(FPLC)及SDS聚丙烯酰胺凝胶制备电泳三种方法分离提纯肌凝蛋白轻链(CMLC),其各具有不同的优缺点,并对CMLC做了鉴定。同时证明在-20℃条件下,冻存时间较长或蛋白浓度较低的CMLC容易降解。

人颌下腺唾液粘蛋白的分离、提纯和鉴定

目的 分离、提纯、鉴定人类颌下腺唾液粘蛋白。方法 收集成人颌下腺唾液 ,经十六烷基三甲基溴化胺沉淀 ,SephadexG - 2 0 0凝胶过滤 ,用PAGE电泳判定纯化样本的纯度 ,SDS -PAGE电泳测定分子量 ,分析样本的免疫电泳、化学成分、氨基酸组成。结果 PAGE和SDS -PAGE显示有两条蛋白带 ,分子量分别为10 0 0kDa和 2 5 0kDa,样本含 18%的蛋白质 ,71%的碳水化合物。免疫电泳显示一条沉淀线。氨基酸组成以苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、丙氨酸为主。结论 该方法是一种可行的人类颌下腺唾液粘蛋白分离提纯方法。

蛋白质、蛋白酶以及短肽类的分离提纯技术及应用

介绍了蛋白质、蛋白酶以及短肽类研究的一些传统方法和新兴方法。主要对分离、提纯、鉴定及分析方法的使用条件、适用范围、操作步骤、各自特点和应用价值作了简要阐述,并对有关方法进行了比较与评价。

心室成纤维细胞分泌心肌营养活性蛋白的分离提纯及其作用

收集FCGM,用0.2μm微孔滤膜除去细胞碎片,再经Diaflo-YM-10滤膜超滤浓缩,截留分子量大于10 KD的FCGM,行Sephadex-G75凝胶层析,得到Ⅰ、Ⅱ两个洗脱峰。经生物学鉴定,证明Ⅰ峰洗脱液具有明显的心肌营养活性。将凝胶层析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,行PAK200SW高效液相色谱分析,结果得到五个不同的洗脱峰。经生物学鉴定,第Ⅰ峰具有生物活性。将已行半制备高效液相色谱分析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,再行高效液相色谱分析,结果获单一峰。用该单一峰物质行SDS-PAGE电泳,以标准蛋白质作对照,可知该单一峰中含有数种物质,分子量在25-35 KD。

蓖麻分离蛋白的安全性评价

为开发利用蓖麻分离蛋白,本文按食品毒理学方法,对其进行了初步的安全性毒理学评价,包括急性毒性试验、蓄积毒性试验和Ames试验。结果表明,蓖麻分离蛋白的经口LD_(50)为21500mg/kg,为无毒物质。在40天的蓄积毒性试验中,538mg/kg、1075mg/kg、2150mg/kg及4300mg/kg四个试验组和一个对照组的动物均无异常表现,各试验组的体重增重和对照组相似,说明蓖麻分离蛋白粉对小鼠无蓄积毒性作用,对小鼠体重增重也无不良影响。蓖麻分离蛋白的微核阳性率为2.4‰,和阴性对照组的微核阳性率相同,而阳性对照组的微核阳性率为28‰。Ames试验显示菌麻分离蛋白粉对测试菌无诱变活性。故认为蓖麻分离蛋白粉没有经口致死毒性和致突变性。

蓖麻毒蛋白分离条件优化

本文以蓖麻蛋白为原料,通过单因素试验和正交试验优化对毒蛋白纯化工艺进行优化。结果表明:最佳工艺条件为缓冲液pH值7.0、缓冲液浓度0.10mol/L、D-半乳糖浓度0.10mol/L和洗脱速度1.0mL/min。优选所得工艺设计合理、结果可靠,可作为蓖麻毒蛋白的分离纯化工艺。

大豆胰蛋白酶抑制剂的分离提纯及降糖活性研究

目的研究大豆胰蛋白酶抑制剂提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的治疗效果。方法以市售大豆为材料,经酸浸、脱脂、硫酸铵沉淀、透析除盐、葡聚糖凝胶G-75柱纯化等方法进行大豆胰蛋白酶抑制剂的分离提纯。然后,用大豆胰蛋白酶抑制剂提取物对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠灌胃给药。通过比较正常对照组、实验对照组、大豆抑蛋白酶抑制剂高中低剂量组的多项血液指标(血糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇)及各组小鼠病理切片等,研究大豆胰蛋白酶抑制剂的降糖活性。结果给予大豆胰蛋白酶抑制剂灌胃的糖尿病小鼠其血糖水平明显下降,甘油三酯水平下降,总胆固醇水平和高密度脂蛋白胆固醇水平无明显变化。结论大豆胰蛋白酶抑制剂提取物对糖尿病有较显著的疗效。

蓖麻毒蛋白的分离纯化和毒理作用研究

经(NH4)2SO4沉淀,分子筛层析和亲和层析等处理,从去壳蓖麻籽中分离纯化得到蓖麻毒蛋白,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈32kDa和34kDa两条蛋白带,证明该蓖麻毒蛋白已被纯化至均一。用等电聚焦法测出该蓖麻毒蛋白的等电点为pI6.1和pI6.7。高效液相色谱测出该蓖麻毒蛋白在非变性条件下有五个峰,表明蓖麻毒蛋白可能存在五个不同的多聚态。动物实验表明该蓖麻毒蛋白对小白鼠有较强的毒性,但对斜纹夜蛾幼虫无毒杀作用。

人血清载脂蛋白E的分离、提纯和鉴定(简报)

载脂蛋白E(apoE)主要存在于极低密度脂蛋白(VLDL)和高密度亚组分I(HDL)中,并较大量地存在于B-VLDL和HDLC,二种异常的脂蛋白。它能与外周组织细胞和肝细胞表面β/E受体及E受体相结合,因此apoE在上述脂蛋白及其在胆固醇的代谢中起极重要的作用,且与动脉粥样硬化的形成和消退密切相关。国外已对apoE进行了大量研究并分离提纯了人apoE,测出其一级结构,含299个氨基酸残基、分子量34000道尔顿。并从分子水平和基因水平研究了其基因结构。

唾液富脯蛋白的分离提纯

收集刺激性腮腺唾液１０００ｍｌ，利用先进的生化技术分离提纯出唾液富脯蛋白（ＰＲＰｓ）。经硫酸铵浓度差超速离心后得到初步纯化的ＰＲＰｓ，再经葡聚糖凝胶（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ－７５过滤和ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５离子交换层析后可得到ＰＲＰｓ的６个组份，其分子量大小分别为１４３００、１０８００、１１０００、１２３５０、１３０００和１２５８０ｕ；等电点范围在４．１８～４．６０之间。６种组分的ＰＲＰｓ氨基酸组成分析，均富含脯氨酸、甘氨酸和谷氨酰胺。

凤凰木种子蛋白的分离提纯和生化性质

研究了植物凤凰木种子中的蛋白质成分，试图分离出新的核糖体失活蛋白凤凰木种子经磷酸盐缓冲液抽提，硫酸铵分级盐析，分子筛和阴离子交换剂等多次柱层析，分离出三种组分ＤｒⅠ、ＤｒⅡ和ＤｒⅢ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ实验表明这三种蛋白质均达到单一纯，而ＨＰＬＣ实验则表明它们的纯度不低于９０％。它们的分子量据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＨＰＬＣ实验分别约２３５００、２６０００、２８５００．ＩＥＦ实验测得三者的等电点均为５．２左右。测定了组分ＤｒⅠ的蛙卵泡裂解活性，其毒性约为天花粉蛋白的１／４０．分析了它们的氨基酸组成。估算了三种蛋白质的二级结构含量，结果表明三者均富含β折叠结构。已有的实验事实表明这三种蛋白质的生化行为明显异于核糖体失活蛋白，因而很可能不属于这一蛋白质家族。

蛋白质的分离提纯及鉴定分析方法

本文介绍了蛋白质研究的一些传统方法和新兴方法。主要对分离、提纯、鉴定及分析方法的使用条件、适用范围、操作步骤、各自特点和应用价值作了简要阐述，并对有关方法进行了比较与评价。

鱼肝中蛋白磷酸酶的分离纯化

鱼肝中蛋白磷酸酶的分离纯化徐立红，张甬元，陈国胜，徐盈（中国科学院水生生物研究所，武汉４３００７２）原田健一（日本名城大学药学部）关键词鱼，蛋白磷酸酶，纯化，抑制ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＰＵＲＩＦＩＣＴＩＯＮＯＦＦＩＳＨＰＲＯＴＥＩＮＰＨＯＳＰＨＡＴ...

67ku胃蛋白酶原的分离纯化及性质研究

用ＤＥＡｎ－５２阴离子交换层析，高压液相凝胶过滤层析两步法，从人胃粘膜中分离纯化到分子质量为６７ｋｕ的胃蛋白酶原．此蛋白具有较强的抗碱性，水解活性在ｐＨ１０．８处理后仍无明显变化，其水解活性的最适ｐＨ为１．８，比活性为５．