HPLC法测定蓝玉簪颗粒中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量

目的:建立HPLC法测定蓝玉簪颗粒中三七皂苷R1与人参皂苷Rg_1、Rb_1含量的方法。方法:色谱柱为Agilent C_(18)(250 mm×416 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;检测波长为203nm;流速为1.0ml·min^(-1);柱温为35℃。结果:三七皂苷R_1在0.56～3.54μg、人参皂苷Rg_1在0.41～8.12μg、人参皂苷Rb_1在0.40～5.31μg范围内线性关系良好,相关系数r均为0.999 9。三七皂苷R1与人参皂苷Rg_1、Rb_1的平均回收率分别是99.45%、99.11%、99.84%;RSD值分别为0.97%、0.56%、0.24%(n=6)。结论:本方法操作简便、可靠,重复性好,可作为蓝簪这颗粒中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量测定方法。

蓝玉簪颗粒抑制脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α产生及相关机制研究

目的:探讨蓝玉簪颗粒对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞(AM)内TNFα-表达及可能作用机制。方法:分离纯化AM,应用ELISA法检测蓝玉簪颗粒对LPS诱导的大鼠AM培养上清中的TNFα-水平的影响,应用Western blot方法检测大鼠AM内TNFα-及pERK蛋白表达水平,同时应用ERK拮抗剂(PD98059)观察AM内TNFα-蛋白表达。结果:蓝玉簪颗粒可剂量依赖的降低由于LPS刺激导致的AM培养上清内TNFα-含量升高;蓝玉簪(100 mg/L)颗粒可显著降低由于LPS刺激导致的AM细胞内pERK及TNFα-蛋白表达升高;ERK特异性抑制剂(PD98059 30 mol/L)及蓝玉簪颗粒干预,蓝玉簪颗粒+PD98059干预后,我们发现与LPS刺激组相比,大鼠AM中TNFα-表达显著降低。结论:蓝玉簪颗粒可以抑制LPS诱导AM TNFα-表达,其作用的机制之一可能与蓝玉簪抑制细胞外信号转导通路有关。

蓝玉簪颗粒抗肝纤维化的作用研究

目的:探讨蓝玉簪颗粒对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠实验性肝纤维化治疗作用的剂量依赖性。方法:腹腔注射DMN,建立肝纤维化模型。实验第28天处死动物,进行血清学及肝组织学检查,观察血清肝纤维化指标谷氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、单胺氧化酶(MAO)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量。结果:蓝玉簪颗粒各剂量治疗组大鼠血清中ALT和HA及肝组织中的MAO、MDA和HYP含量均明显低于模型对照组,且呈剂量依赖性(P<0.05或<0.01);模型对照组显著高于正常对照组(P<0.01)。与模型对照组比较,蓝玉簪颗粒各剂量治疗组显著升高肝组织中SOD、GSH水平,且呈显著剂量依赖性(P<0.05或<0.01);模型对照组显著低于正常对照组(P<0.01)。结论:蓝玉簪颗粒对DMN诱导的大鼠肝纤维化有一定的防治作用并呈剂量依赖性。

蓝玉簪颗粒治疗大鼠放射性肺纤维化的CT影像研究

目的探讨蓝玉簪颗粒治疗放射性肺纤维化的影像学研究。方法将30只雄性SD大鼠采用随机数字法分为正常对照组、30Gy照射对照组和30Gy+蓝玉簪颗粒治疗组。照射后10、20、30d时,使用20%乌拉坦腹腔麻醉动物,CT扫描及重建,观察影像学变化;并进行病理组织学及肺部羟脯氨酸含量检测。结果受照大鼠肺CT影像在各时间点均见反应改变,30d后纤维化影像学变化显著,30Gy+蓝玉簪颗粒治疗组肺纤维化影像学变化与30Gy照射对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);病理组织学检测表明,30Gy+蓝玉簪颗粒治疗组大鼠肺组织改变与30Gy照射对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。大鼠肺部组织进行羟脯氨酸含量检测显示,30Gy照射对照组在照射后8、10d比30Gy+蓝玉簪颗粒治疗组及正常对照组均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),其他时间点也明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论蓝玉簪颗粒对照射引起的肺纤维化有潜在的治疗作用。

蓝玉簪颗粒对大鼠肝纤维化的治疗作用

目的:探讨蓝玉簪颗粒对实验性二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的SD大鼠肝纤维化模型的治疗作用机制.方法:SD♀大鼠45只随机分为正常组,模型组,蓝玉簪颗粒高、中、低治疗组,γ-干扰素阳性对照组.除正常组外,其余各组大鼠均给予10mg/kg的剂量腹腔注射DMN,隔天注射1次,连续30d.第31天,检测各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)含量;肝组织匀浆中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的含量.应用HE染色观察各组大鼠肝组织病理学变化.结果:模型组大鼠血清中ALT、AST明显升高,ALB明显降低;肝组织匀浆中α-SMA明显增加、MMP-2降低,与正常组比较有显著性差异(182.042±0.658vs60.879±0.987;145.612±4.66vs74.824±9.004;16.078±0.633vs28.971±0.443;161.667±26.766vs80.167±10.135;5.994±1.360vs8.270±0.289,均P<0.05);蓝玉簪颗粒治疗组与模型组比较,血清ALT、AST降低,ALB增加;α-SMA降低,肝组织中MMP-2水平升高(87.856±8.526,106.69±0.987,136.11±0.329vs182.042±0.658;94.208±2.017,107.602±20.014,118.847±5.486vs145.612±4.66;23.412±0.775,19.653±0.775,18.635±0.221vs16.078±0.633;109.958±3.607,117.833±6.600,119.833±6.167vs161.667±26.766;11.610±0.523,10.367±0.714vs5.994±1.360,均P<0.05),小剂量组与模型组MMP-2水平比较,差异无统计学意义.HE染色观察肝组织纤维化分级和积分明显改善.结论:蓝玉簪颗粒可减轻肝脏炎症,保护肝脏功能,减轻或抑制DMN诱导的肝纤维化的形成.

蓝玉簪颗粒的质量标准提高

目的:建立蓝玉簪颗粒的质量提高标准。方法:采用TLC法定性鉴别蓝玉簪龙胆和三七总皂苷;采用HPLC法定量测定龙胆苦苷的含量。色谱柱为Promosil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(27∶73)为流动相,检测波长为270 nm,流速为1.0 ml·min^-1,进样量为10μl,柱温25℃。结果:薄层鉴别斑点清晰,阴性对照无干扰;龙胆苦苷含量在25.00~1 000.00μg·ml-^1之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为98.24%,RSD为3.04%(n=6)。结论:本方法结果可靠,操作简便,可用于蓝玉簪颗粒的质量控制。

蓝玉簪颗粒抑制慢性支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌及Bcl-2表达

目的观察蓝玉簪颗粒对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道上皮杯状细胞化生及黏液高分泌的抑制作用并探讨其机制。方法32只BABL/C小鼠随机分成正常对照组(A组)、慢性哮喘模型组(B组)、蓝玉簪颗粒组(C组,0.33g生药/kg体质量)和地塞米松干预组(D组,2.0mg/kg体质量),每组8只。卵白蛋白腹腔注射致敏并长期雾化吸入制备小鼠慢性哮喘模型。阿尔辛蓝-过碘酸-希夫(AB-PAS)染色观察气道上皮杯状细胞增生、黏液分泌情况,免疫组织化学半定量法测定气道壁Bcl-2含量。计算机图象分析软件测定气道壁Bcl-2、AB-PAS染色阳性面积和气道上皮层面积(Aep)与气道基底膜周径(Pbm)比值(如Aep/Pbm,Bcl-2/Pbm)等。结果B组小鼠气道上皮层增生,气道黏液分泌显著增加,气道壁Bcl-2表达增强;B组AB-PAS/Pbm,Bcl-2/Pbm等值较C组均显著增高(P<0.01);B组和C组Aep/Pbm值比较差异有统计学意义(P<0.01),C组与D组比较差异无统计学意义;AB-PAS/Pbm与Bcl-2/Pbm呈显著正相关(r=0.671,P<0.01),Aep/Pbm与Bcl-2表达也呈显著正相关(r=0.784,P<0.001)。结论蓝玉簪颗粒可以抑制慢性哮喘小鼠气道上皮杯状细胞增殖和黏液高分泌,其部分机制可能通过抑制Bcl-2的表达实现。