猪蓝耳病活疫苗免疫效果试验观察

共选择杜大长仔猪约3452头分成4组,分别在19日龄免疫蓝耳病活疫苗(R98株)2批,9日龄免疫一批、7日龄或15日龄分别免疫一批,其中免疫仔猪共1188头,非免疫对照2264头。选61头大长母猪在怀孕80～90d免疫蓝耳病活疫苗,48头不免疫对照,观察产仔及哺乳期健康状况。并抽取部分试验猪血样检测PRRS血清ELISA抗体。结果显示,19日龄1组、19日龄2组、9日龄1组保育猪僵病仔率分别是1.38%、1.08%、1.66%,对照组分别是30.7%、14.5%、15.82%;出栏健仔率试验组分别是91.72%、96.77%、97.35%,对照组分别是67.54%、84.72%、82.64%;日增重试验组分别是293.4g、274.6g、304.7g,对照组分别是241.9g、236.9g、256.9g;差异很明显。对1-2胎母猪比率达46.8%～71.1%的产后哺乳仔猪分别在7日龄、15日龄免疫对比试验表明,2组仔猪窝发病率分别为23.4%、50.0%,出栏健仔率分别为97.19%、76.14%,说明对1-2胎母猪产后仔猪7日龄免疫比15日龄免疫更好。母猪免疫组胎产活仔、死胎、初生仔猪头均重分别为10.11头、0.98头、1.482kg,对照组分别为10.15头/胎、0.90头/胎、1.483kg,2组差异不显。试验组产后母猪不正常发生率为16.67%,比对照组40.43%要低23.76个百分点,差异明显。哺乳仔猪精神不佳窝发生率分别为10.0%、17.02%,差异明显。说明母猪怀孕80～90d接种PRRS活疫苗对母猪及胎猪尚未产生不良影响,且对产后母猪和仔猪临床健康情况有明显改善。2周、4周、6周、8周血清ELISA抗体检测结果显示19日龄1组抗体阳性率分别为92.86%、85.71%、78.57%、92.86%,19日龄2组分别为100.0%、93.33%、86.67%、100.0%,9日龄免疫组分别为100.0%、100.0%、92.86%、100.0%,对照组分别为73.33%、93.33%、86.67%、100.0%,说明免疫组和对照组升降曲线较一致,以9日龄免疫组阳性率最高,对照组和19日龄免疫组差异不大。总体说明活疫苗在阳性场并不能抵抗野毒攻击而影响血清学抗体转化,但在减少野毒临床致病性上有较明显改善作用。

高致病性蓝耳病纯化灭活疫苗的研制

为提高现行高致病性蓝耳病(HR-PRRS)灭活疫苗的纯度和效价,试验将HP-PRRSV(NVDC-JXAl株)接种于已长成单层的Marc-145细胞培养板上,培养收获的HP-PRRSV原液,经超滤浓缩50倍后灭活,再用Sepharose 4 Fast Flow分子筛柱层析,收集完整的病毒粒子,加油佐剂制成纯化HP-PRRS灭活疫苗,并对制备的疫苗进行攻毒保护试验和血清抗体检测。结果表明:浓缩后3批病毒效价至少提高了1.1个效价,通过纯化可将HP-PRRSV与非病毒蛋白分开,纯化后病毒蛋白收率为76.7%～82.4%,杂蛋白去除率均为96%以上,且纯化疫苗的攻毒保护率达到4/5以上,血清抗体检测阳转率达86%以上,均高于未纯化的灭活疫苗,差异显著。说明HP-PRRS病毒液经浓缩、纯化制成疫苗后,增强了免疫效果,并可有效地去除杂蛋白,避免了疫苗的过敏反应和应激反应。

Preparation of Purified and Inactivated HP-PRRS Vaccine

[Objective] The aim of this study was to improve the purification and protective potency of HP-PRRS inactivated vaccine. [Method] HP-PRRS virus that had been multiplied inside Marc-145 cells was collected and concentrated 50 times and then inactivated. Complete virions were separated and collected by chromatography with Sepharose 4 Fast Flow. Oil adjuvant was added to prepare purified inactivated vaccine. [Result] Viral protein was separated from other proteins by purification and the viral protein contents ranged from 76.7% to 82.4%, and 96% of the expected serum proteins were removed. Protective potency of purified vaccine was above 4/5 and positive conversion rate of antibody was over 86%, both higher than that of unpurified vaccine. The differences were significant. [Conclusion] The experiment il-lustrated that the immune efficacy of vaccine can be enhanced through concentrat- ing and purifying, while the non-viral protein can be removed, so that allergic reaction and stress response cadsed by vaccine inoculation can be avoided.

二种免疫方法的抗体水平与效果比较

为了解不同免疫方法使用疫苗后的安全性和对免疫抗体水平与效果的影响,通过试验提供数据,并做出科学评价,以便制定合理的免疫程序,适时地进行免疫预防,为乐都区基层动物防疫员在生猪防疫工作中提供准确的科学依据,以减轻防疫员队伍的劳动量,减少免疫应激的产生率,推广应用同时分点注射技术。笔者结合2011年基层农技推广体系改革与建设示范县项目,于2012年4~5月在乐都福乐牧业有限公司生态养猪场进行了不同免疫方法的免疫抗体水平与效果的对比试验。

浙江金华地区猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫程序的筛选及推广应用

目的筛选现阶段浙江金华地区猪场常用的3种猪繁殖与呼吸综合征疫苗[高致病性蓝耳弱毒活疫苗(JXA1-R株)、弱毒活疫苗(CH-1R株)和灭活疫苗(NVDC-JXA1株)]的免疫程序,并进行推广应用。方法采集免疫了3种疫苗的38个不同规模猪场猪血清,ELISA法检测蓝耳抗体水平,记录主要的免疫程序(包括猪瘟、蓝耳和口蹄疫)。按筛选出的不同规模猪场适合的蓝耳疫苗免疫程序,选择6家应用不同猪蓝耳病疫苗的猪场进行效果验证与示范,根据这些猪场的养殖规模及免疫情况,进行疫苗或免疫程序的调整,免疫后28 d采血,分离血清,检测蓝耳抗体水平。结果蓝耳、猪瘟和口蹄疫的免疫程序较普遍,并能获得较高的蓝耳抗体水平和抗体合格率,蓝耳疫苗免疫时间一般为15或21日龄。其中高致病性毒株JXA1-R在金华地区的不同规模猪场使用最为广泛,特别是小规模和大规模猪场分别占61%和55%,临床应用以猪瘟-口蹄疫-蓝耳和蓝耳-猪瘟-口蹄疫两种免疫程序为主,且免疫时间分别为65日龄和14日龄,猪群可获得最高的蓝耳抗体水平和抗体合格率。蓝耳活疫苗(CH-1R株)在小、中、大规模猪场的使用率分别达15%、10%和18%,免疫程序为蓝耳、猪瘟和口蹄疫,且21日龄免疫蓝耳疫苗猪群可获得更高的蓝耳抗体水平和抗体合格率。猪蓝耳灭活疫苗(NVDC-JXA1株)也以蓝耳、猪瘟和口蹄疫免疫程序为主,其在小、中、大规模猪场的使用率分别达2%、10%和0%,且在15日龄免疫比在21日龄免疫可获得更高的蓝耳抗体水平。验证效果显示,6家猪场的抗体水平整体均有所提高,抗体效价至少提高12%,抗体合格率平均提高15%。结论大规模猪场采用蓝耳-猪瘟-口蹄疫免疫程序可获得更高的蓝耳抗体水平,中等规模猪场采用蓝耳-猪瘟-口蹄疫,而小规模猪场采用猪瘟-口蹄疫-蓝耳免疫程序可达到更好的免疫效果。