中国2012—2022年羊群中蓝舌病毒流行的Meta分析

旨在系统评价和分析我国2012—2022年羊群中蓝舌病毒(bluetongue virus,BTV)感染状况,为我国羊群BTV防控提供理论依据。通过检索2012—2022年中国知网(CNKI)、万方、维普、PubMed和ScienceDirect 5个数据库中对中国羊群BTV流行情况研究的文献并进行Meta分析。检索并筛选后共纳入Meta分析的有28篇文献,涉及样本总数为38226头羊,其中9109头羊为BTV阳性。分析显示,我国羊群中BTV的整体流行率为23.8%(95%CI:23.4,24.3),其中绵羊流行率为29.4%(95%CI:14.7,44.1),山羊流行率为25.1%(95%CI:18.6,31.7)。我国各省/市间比较发现,重庆市流行率最高,为34.6%(95%CI:32.0,37.1),其次为云南省和内蒙古自治区。亚组分析发现,我国5大区域BTV流行率存在显著地区差异(P=0.011),中国东部、南部、西部、北部及中部地区流行率分别为6.1%(95%CI:4.3,7.9)、33.8%(95%CI:29.5,38.1)、21.7%(95%CI:17.1,26.2)、21.0%(95%CI:8.3,33.6)及26.6%(95%CI:24.3,28.8)。同时,检测方式和气候类型也是我国羊群中BTV流行的风险因子(P<0.05)。上述分析结果提示,我国羊群中BTV流行率较高并且分布广泛,有必要持续对我国BTV的感染状况进行监测并采取适当的预防措施。

蓝舌病新疆分离株VP7蛋白编码基因序列分析及一步法RT-PCR方法的建立

【目的】分析蓝舌病新疆分离株编码VP7蛋白S7基因保守序列,建立蓝舌病新疆分离株一步法RT-PCR方法,为新疆BTV分子流行病学调查及防控提供技术支持。【方法】采用二代测序技术获得新疆分离株S7基因序列,登陆GenBank对序列进行同源性Blast比对,用软件MEGA 5.0分析序列差异,根据蓝舌病新疆分离株编码VP7蛋白S7基因保守序列,运用软件Oligo6.0设计引物,对蓝舌病新疆分离株S7基因进行RT-PCR扩增,并验证该方法的特异性及敏感性。【结果】蓝舌病中国新疆分离株编码VP7蛋白S7基因序列与哈尔滨报道BTV分离株S7基因片段相似度较高为89.64%,与中国云南报道BTV-29型分离株、蒙古国BTV分离株S7基因片段相似度分别为87.49%和87.39%;与德国BTV分离株S7基因片段相似度为80.70%,其余均无同源性序列。中国新疆分离株S7基因片段序列与4条同源序列间存在26处核苷酸差异,9处氨基酸差异。【结论】建立的蓝舌病中国新疆分离株S7基因片段一步法RT-PCR方法具有良好的特异性,仅BTV中国新疆分离株扩增获得目的条带,该方法的敏感性为4.0×10^(3)copies/mL。

免疫共沉淀联合质谱技术筛选蓝舌病病毒NS4蛋白的互作蛋白

[目的]筛选蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)NS4蛋白颉颃干扰素(interferon, IFN)信号通路的内源性互作蛋白,以便进一步研究NS4抑制IFN信号转导的作用机制。[方法]在前期仙台病毒(Sendai virus, SeV)诱导IFN信号通路基因表达研究基础上,利用免疫共沉淀方法从转染NS4融合eGFP标签表达载体pcDNA3.1-NS4-eGFP和pcDNA3.1-eGFP空载体的HEK-293T细胞中钓取NS4互作蛋白,对免疫沉淀物进行SDS-PAGE分析,免疫共沉淀洗脱液进行质谱鉴定及生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR检测候选蛋白的编码基因表达特征。[结果]通过免疫共沉淀及质谱鉴定分析和数据库比对,共获得189个差异表达蛋白。生物信息学分析结果显示,候选蛋白主要参与蛋白转录、翻译、病毒感染及免疫调控。亚细胞定位分析结果显示,差异表达蛋白主要定位于细胞核、细胞质以及胞质-胞核,筛选出4个与BTV NS4蛋白存在互作的候选蛋白:多聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)、细胞周期依赖性蛋白激酶9(CDK9)、N-端豆蔻酰化酶1(NMT1)和Y盒结合蛋白1(YBX1)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,SeV刺激72 h后,试验组PTBP1、NMT1、YBX1、CDK9基因mRNA表达量均显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01)。[结论]BTV NS4蛋白颉颃IFN信号通路与PTBP1、NMT1、YBX1、CDK9蛋白表达上调有关,本试验结果为进一步研究BTV NS4蛋白颉颃宿主天然免疫应答的分子机制提供靶标参考。

羊蓝舌病的流行病学及防控策略

羊蓝舌病是由蓝舌病病毒引起的一种急性传染病,主要通过库蠓等昆虫传播,对养羊业造成严重威胁。本文综述了羊蓝舌病的病原学、流行病学、临床症状,并提出了综合防控策略,包括媒介昆虫控制、环境卫生管理、检疫与隔离措施、饲养管理、疫情应急处理、防控体系建设,以及科普宣传与教育培训等方面的内容,旨在为羊蓝舌病的防控提供科学依据和实践指导。

羊蓝舌病的流行特点与防控措施

羊蓝舌病是一种由蓝舌病病毒引起的非接触性传染病,主要通过昆虫传播给绵羊等反负动物。该文通过对蓝舌病的病原特点、流行特点、临床症状及病理变化,以及防控措施的分析,总结了羊蓝舌病的流行特点和防控策略,以期为疫情防控提供理论依据和实践指导。

蓝舌病病毒VP7抗原在重组杆状病毒表达系统中的表达与鉴定

本试验通过在重组杆状病毒表达系统中制备、纯化与鉴定蓝舌病病毒VP7抗原,为开发蓝舌病病毒免疫学抗体检测方法提供科学依据。利用SignalP与TMHMM在线软件分析VP7序列的信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pFastBacHTA载体上,并构建相应的重组杆粒Bacmid-VP7-DH10Bac,转染sf9昆虫细胞后获得重组杆状病毒Bacmid-BTV-VP7株,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达制备蓝舌病病毒VP7抗原。结果显示,重组杆粒Bacmid-VP7-DH10Bac转染sf9昆虫细胞并连续盲传5代后,成功获得重组杆状病毒Bacmid-BTV-VP7株,并成功表达纯化出VP7蛋白,大小约为43 kDa,蛋白纯度约为94%;VP7重组蛋白与其他疫病抗体无非特异性交叉。综上,重组VP7蛋白能够与BTV阳性血清呈现特异性反应,具有良好的反应原性,蛋白纯度高,并且具有病毒蛋白的生物学活性,将其作为诊断抗原,后期可用于开发系列免疫学抗体诊断检测技术。

山东省规模化牛场蓝舌病血清学调查

[目的]了解山东省规模牛场蓝舌病的发病和流行情况。[方法]采用血清学检测方法抽检山东省25个牛场(13个奶牛场、12个肉牛场)的738份血清样品(奶牛血清383份,肉牛血清355份)进行蓝舌病抗体检测,并测定个体阳性率和群体阳性率。[结果]25个牛场中,3个牛场存在蓝舌病抗体阳性,群体阳性率为12.00%;738份样品中,3份样品为阳性,个体阳性率为0.41%。[结论]2022年山东省规模化牛场存在蓝舌病的感染。

羊蓝舌病的传播与风险评估

蓝舌病(bluetongue,BT)是一种由媒介传播的传染性疾病,可感染山羊、牛、绵羊和野生反刍动物。其主要通过库蠓叮咬进行传播。现如今,蓝舌病的流行感染会加剧养殖行业的养殖风险,并对畜牧业造成经济损失。本文立足于蓝舌病的病原学特点、易感动物与传播途径、流行情况等三个方面,综合探讨羊蓝舌病的风险及危害。

规模化牛场牛蓝舌病的防控措施

在市场需求的导向下,规模化牛场得到了快速发展。但是在规模化养殖的过程中,牛疫病的出现,不仅影响牛的生长,还影响养殖户的经济效益。牛蓝舌病作为一种非接触性的感染病,反刍性动物发病率较高,若未能进行及时的防制,不仅会造成大范围传染,还会造成牛只的死亡,甚至危害人的身体健康。

蓝舌病的诊断及防控

蓝舌病(BT)因特异性的紫绀舌而得名,由血管损伤导致的舌部缺血而引发。BT是由蓝舌病毒(BTV)感染牛、羊等反刍动物导致的病毒性疾病,在我国广泛存在,被感染动物表现出活动受限和繁殖障碍。近年来,随着反刍动物饲养规模的不断扩大,BT对养殖业的造成的损失随之增加,对反刍动物饲养业的发展造成了阻碍。因此,加强BT的诊断、预防和控制具有重要意义。

规模化牛场牛蓝舌病的诊断及防控措施

牛蓝舌病是由蓝舌病病毒引起反刍动物的一种典型的非接触性病毒性传染病,该病传播迅速,发病率、病死率高,给畜牧养殖业带来了严重的威胁。本文通过介绍该病的临床症状、诊断及治疗方法,并采取疫苗免疫、生物安全措施、加强饲养管理和科学授精引种等防控措施,以期提高人们对规模化牛场健康管理的重视,为该病的预防和控制提供参考。

羊蓝舌病的流行病学、诊断与防控

羊蓝舌病是一种由蓝舌病毒引起的反刍动物病毒性传病,主要感染绵羊,并在全球范围内广泛存在。该病以其严重的临床表现和经济损失而备受关注。随着气候变化等因素的影响,羊蓝舌病的流行呈现出不容忽视的趋势。本文旨在通过对羊蓝舌病的流行病学特点、诊断方法和防控措施的进行综述,为畜牧行业从业人员提供参考和指导。1流行病学羊蓝舌病是一种严重的传染病,其流行特点具有一定的季节性和动物特异性。该病主要通过库蠓等昆虫传播,在湿热的夏季和早秋更容易发生。在库蠓叮咬感染动物后,病毒会在其体内繁殖,并通过叮咬其他动物而传播。绵羊对蓝舌病极为易感,不论品种、性别和年龄,尤其是1岁左右的绵羊最容易受到感染。然而,正在吃奶的羔羊相对具有一定的抵抗力。

羊蓝舌病的流行特点与防控措施

羊蓝舌病是一种由蓝舌病病毒引起的非接触性传染病,主要通过昆虫传播给绵羊等反刍动物。本文通过对蓝舌病的病原特点、流行特点、临床症状、病理变化及防控措施进行分析,总结了羊蓝舌病的流行特点和防控策略,为疫情防控提供了理论依据和实践指导。

重庆部分地区山羊场蓝舌病流行情况调查

为了调查重庆地区山羊场蓝舌病(BT)的流行情况,本研究应用RT-nested PCR检测方法,对2020~2023年重庆市6个区县的1771份山羊全血样品进行检测,结果显示:BTV的总样品阳性率为6.2%(109/1771),酉阳的样品阳性率为11.1%(36/325),荣昌的样品阳性率为9.6%(29/303),武隆的样品阳性率为1.1%(2/183),石柱的样品阳性率为3.8%(13/344),彭水的样品阳性率为2.9%(9/310),长寿的样品阳性率为6.5%(20/306)。本调查结果为重庆地区山羊场的BTV防控工作提供了科学依据。

牛羊蓝舌病的诊断与防控

蓝舌病最开始是1876年南非地区所报道的细毛羊发病案例,1943年在非洲大陆首次发现,并迅速蔓延到全世界的50多个国家中,我国则是在1979年的云南师宗首次发现该病并分离到蓝舌病病毒。该病主要会危害牛、羊等反刍动物,致死率较高,已经被世界动物卫生组织列为目录内疾病,据调查,每年由蓝舌病造成的全球经济损失可达30亿美元以上。牛、羊是我国基层养殖产业的主要经营内容,因此我国农业农村部也将蓝舌病列为一类动物疫病,由于该病无特效药物,因此必须做好该病的防控工作,以便可以最大程度上降低蓝舌病的不利影响。基于此,本文就牛羊蓝舌病的诊断与防控进行了分析,以期能够为基层养殖户的健康养殖工作提供科学的参考依据。

蓝舌病病毒NS4蛋白原核表达及多克隆抗体制备

【目的】制备蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)NS4蛋白多克隆抗体,为BTV NS 4基因在病毒增殖及颉颃宿主细胞天然免疫应答中的作用研究奠定基础。【方法】构建pCzn1-NS4原核表达载体,经PCR和测序鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达,使用His标签镍柱纯化NS4蛋白,并经SDS-PAGE、Western blotting鉴定。利用NS4蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经SDS-PAGE和间接ELISA法测定多克隆抗体纯度及效价,以制备的NS4蛋白多克隆抗体为一抗,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测BTV感染的BHK-21细胞内NS4蛋白的表达。【结果】成功构建了原核表达质粒pCzn1-NS4,在37℃、IPTG浓度为0.6 mmol/L时诱导8 h获得大量NS4重组蛋白,SDS-PAGE及Western blotting试验结果显示,重组蛋白分子质量约为18 ku,可与兔His-tag抗体发生特异性反应;制备的NS4蛋白多克隆抗体效价在1∶512000以上。经SDS-PAGE和IFA鉴定,制备的BTV NS4多克隆抗体具有良好的纯度,且在BTV感染的BHK-21细胞中能特异性识别病毒表达的NS4蛋白。【结论】本研究利用原核表达的NS4蛋白制备了特异性多克隆抗体,并初步将该多克隆抗体用于NS4蛋白免疫荧光试验研究,为BTV NS 4基因的功能和应用研究提供参考依据。

2022年云南省边境地区牛蓝舌病病毒及阿卡斑病毒抗体检测

为了解云南省边境地区牛蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)与阿卡斑病毒(Akabane virus,AKAV)的流行与分布现状,2022年在云南省9个边境县(市)采集1 820份牛血清样本,应用c ELISA方法进行BTV与AKAV抗体检测,并对检测结果利用IBM SPSS Statistics 22、Excel 2007等软件进行区间、群间和时间的分类统计分析。结果显示:共检出BTV阳性样品1 207份,样品阳性率为66.32%(1 207/1 820);检出AKAV阳性样品350份,样品阳性率为32.17%(350/1 088)。各县(市、区)的BTV样品阳性率为43.50%~93.00%,AKAV为12.90%~50.00%,不同地区间的差异有统计学意义(P <0.01);黄牛和西门塔尔牛的BTV和AKAV抗体样品阳性率均高于水牛,入境牛BTV抗体阳性率显著高于本土牛,两组数据差异均有统计学意义(P <0.01);规模养殖场的BTV和AKAV抗体阳性率和散养户差异无统计学意义(P> 0.05);7-8月的BTV和AKAV抗体阳性率显著高于5-6月(P <0.01)。结果表明:BTV和AKAV在云南省边境地区已广泛存在,其感染有加重趋势;病原通过境外牛传入国内的风险不断增加,防控形势较为严峻。因此,云南省应继续加强边境地区BTV、AKAV等虫媒病毒的监控,并制定实施相应防控措施,以保障国内畜牧业健康发展。

蓝舌病流行病学、诊断及疫苗策略

蓝舌病的名字来源于独特的紫绀舌,因为该病引起的血管损伤导致组织缺血。蓝舌病已在各大洲均被报道,由库蠓(Culicoides)从受感染的反刍动物传播给易感的反刍动物,因此蓝舌病的流行区域与库蠓媒介适宜的气候条件相吻合,集中在热带和亚热带地区,已报道的区域包括欧洲、美洲、中东、南亚和澳大利亚。

蓝舌病病毒反向遗传操作系统的建立

为建立蓝舌病病毒(BTV)的反向遗传操作系统,本研究构建了分别表达血清1型BTV SZ97/1株VP1、VP3、VP4、VP6、VP7、NS1和NS2蛋白的7个真核表达质粒,同时又构建了含有SZ97/1株BTV的全部10个基因节段的T7聚合酶体外转录重组质粒。并利用T7 RNA聚合酶对酶切线性化的10个体外转录质粒进行体外转录,制备BTV全部10个基因的体外转录RNA。将已构建的7个真核表达质粒和体外转录获得的RNA产物依次共转染BHK-21细胞,拯救出含有分子标记的BTV。本研究首次在我国建立了BTV的反向遗传操作系统,为我国深入开展该病毒致病机理、传播机制、基因组功能的研究以及新型疫苗的研发奠定了基础。

羊蓝舌病的诊断与防治

羊蓝舌病是由蓝舌病毒感染引起,主要症状表现为体温异常升高,口腔黏膜肿胀、溃疡,跛行等,羊最终会因身体衰竭而亡,给养殖户带来重大的经济损失。目前,羊蓝舌病没有有效的治疗方法,主要通过控制虫媒传播以及注射羊蓝舌灭活疫苗等措施来预防该疾病的发生,助力羊养殖产业实现更好的发展。