蓝萼甲素调节Akt/Nrf2/HO-1信号通路对冠心病大鼠的影响

目的:探讨蓝萼甲素(GLA)调节蛋白激酶B(Akt)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路对冠心病(CHD)大鼠的影响。方法:通过高脂饲料喂养及腹腔注射垂体后叶素制备CHD大鼠模型,设置分组为CHD组、GLA低剂量(GLA-L,5 mg/kg)组、GLA中剂量(GLA-M,10 mg/kg)组、GLA高剂量(GLA-H,20 mg/kg)组、GLA-H+LY294002(Akt/Nrf2/HO-1通路抑制剂,20 mg/kg GLA-H+40 mg/kg LY294002)组,同时以基础饲料喂养及腹腔注射生理盐水的10只大鼠为对照组;干预结束后,分别检测各组大鼠血清中血脂代谢水平[低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)以及三酰甘油(TG)]、血管内皮功能指标[内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)]、炎症因子水平(IL-6、TNF-α)、心脏组织中氧化应激水平[丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)]以及病理学及斑块面积变化、Akt/Nrf2/HO-1通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组相比,CHD组NO、T-AOC含量、PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、HO-1表达显著降低,ET-1、MDA、TNF-α、IL-6、TG、TC、LDL-C含量显著增加(P<0.05);与CHD组相比,GLA-L组、GLA-M组、GLA-H组NO、T-AOC含量、PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、HO-1表达显著增加,ET-1、MDA、TNF-α、IL-6、TG、TC、LDL-C含量显著降低(P<0.05);与GLA-H组相比,GLA-H+LY294002组NO、T-AOC含量、PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、HO-1表达显著降低,ET-1、MDA、TNF-α、IL-6、TG、TC、LDL-C含量显著增加(P<0.05)。结论:GLA可以通过激活Akt/Nrf2/HO-1信号通路抑制炎症反应及氧化应激水平,改善CHD大鼠病理损伤及内皮功能障碍。

蓝萼甲素调节PINK1/Parkin信号通路对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响

目的:探讨蓝萼甲素(GLA)调节PTEN诱导的激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)信号通路对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响。方法:将关节软骨细胞分为Control组、IL-1β组、L-GLA组、M-GLA组、H-GLA组、Suramin组;细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测关节软骨细胞增殖;TEM检测关节软骨细胞自噬;流式细胞仪检测关节软骨细胞凋亡;ELISA检测关节软骨细胞中炎性因子(MMP3、TNF-α、MMP13)和活性氧(ROS)水平;蛋白印迹法检测关节软骨细胞中裂解的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)I、LC3Ⅱ、P62、PINK1、Parkin蛋白表达。结果:与Control组相比,IL-1β组存活率、LC3Ⅱ/Ⅰ、PINK1、Parkin降低,自噬空泡数、凋亡率、MMP3、TNF-α、MMP13、ROS、cleaved caspase-3、P62升高(P<0.05);L-GLA组、M-GLA组、H-GLA组存活率、自噬空泡数、LC3Ⅱ/Ⅰ、PINK1、Parkin高于IL-1β组,凋亡率、MMP3、TNF-α、MMP13、ROS、cleaved caspase-3、P62低于IL-1β组(P<0.05);Suramin组存活率、自噬空泡数、LC3Ⅱ/Ⅰ、PINK1、Par-kin低于H-GLA组,凋亡率、MMP3、TNF-α、MMP13、ROS、cleaved caspase-3、P62高于H-GLA组(P<0.05)。结论:GLA通过激活IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬,抑制细胞凋亡,进而抑制OA的进展,其机制可能是通过激活PINK1/Parkin信号通路实现的。

蓝萼甲素调节HMGB1-RAGE信号通路对阿尔茨海默病大鼠神经炎症的影响

目的探究蓝萼甲素(GLA)对阿尔茨海默病(AD)大鼠神经炎症及高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终末产物受体(HMGB1-RAGE)信号通路的影响。方法通过在脑室注射Aβ1-42溶液建立AD大鼠模型,并将大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、GLA低剂量组、GLA高剂量组、GLA高+HMGB1组,每组15只。Morris水迷宫实验检测大鼠学习和记忆能力;HE染色检测海马组织病理形态学变化;ELISA检测海马组织中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量;免疫荧光检测小胶质细胞标记蛋白Iba-1和星形胶质细胞标记蛋白GFAP的表达;Western blotting检测海马组织中HMGB1-RAGE通路相关蛋白的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量、Iba-1和GFAP蛋白阳性表达面积及HMGB1、RAGE、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达均升高(P<0.05),停留目标象限时间、穿越平台次数减少(P<0.05);与模型组相比,GLA低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量、Iba-1和GFAP蛋白阳性表达面积及HMGB1、RAGE、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达均降低(P<0.05),停留目标象限时间、穿越平台次数增多(P<0.05),且GLA高剂量组和多奈哌齐组差异无统计学意义(P˃0.05);进一步使用HMGB1重组蛋白进行回补实验,发现GLA对神经炎症的抑制作用被逆转,且RAGE水平升高(P<0.05)。结论GLA可能通过抑制HMGB1-RAGE信号通路减轻AD大鼠的神经炎症。

蓝萼甲素对骨肉瘤细胞的作用及机制

目的 探讨蓝萼甲素(GLA)对骨肉瘤(OS)细胞的作用及机制。方法 将不同浓度的GLA作用于骨肉瘤细胞(143B、HOS、U2OS);CCK8法检测不同浓度GLA处理24 h、48 h、72 h后的细胞活性,选取影响最为明显的细胞系作为工具细胞进行深入研究;采用细胞克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Transwell实验检测细胞侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用RT-qPCR实验和Western Blot实验分析潜在的分子机制。结果 CCK8实验显示GLA以浓度依赖方式抑制骨肉瘤细胞的恶性增殖,且对143B细胞系的增殖抑制最为明显;细胞克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术表明,GLA抑制143B细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进143B细胞凋亡;RT-qPCR实验和Western Blot实验显示GLA可明显下调IL-6/STAT3通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达,但不影响IL-6下游MAPK级联通路和PI3K通路相关蛋白的表达;GLA可抑制细胞周期和凋亡相关蛋白(Cyclin D1、Bcl-2、XIAP)的表达。结论蓝萼甲素可能通过调控IL-6/STAT3通路抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

蓝萼甲素对急性髓系白血病U937细胞增殖、凋亡、自噬及SIRT1/FoxO1信号通路的影响

目的:探究蓝萼甲素对急性髓系白血病(AML)U937细胞增殖、凋亡、自噬及沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框转录因子O1(FoxO1)信号通路的影响。方法:体外培养AML U937细胞,取培养至对数生长期的U937细胞分为对照组(常规培养U937细胞)、三氧化二砷组(在含U937细胞的培养基中加入2μmol/L的三氧化二砷)、蓝萼甲素低(在含U937细胞的培养基中加入2μmol/L蓝萼甲素)、高(在含U937细胞的培养基中加入4μmol/L蓝萼甲素)浓度组,继续培养48 h后。四甲基偶氮唑蓝法检测U937细胞增殖率,流式细胞术检测U937细胞凋亡率,单丹磺酰尸胺荧光染色观察U937细胞自噬小体数量,荧光定量PCR法检测U937细胞SIRT1、FoxO1 mRNA表达水平,蛋白印迹法检测U937细胞SIRT1、FoxO1蛋白表达水平。结果:与对照组相比,三氧化二砷组、蓝萼甲素低、高浓度组U937细胞增殖率显著降低(均P<0.05),凋亡率、自噬小体数量、SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(均P<0.05);与三氧化二砷组相比,蓝萼甲素低、高浓度组U937细胞增殖率显著升高(均P<0.05),凋亡率、自噬小体数量、SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);与蓝萼甲素低浓度组相比,蓝萼甲素高浓度组U937细胞增殖率显著降低(P<0.05),凋亡率、自噬小体数量、SIRT1、FoxO1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。结论:蓝萼甲素能抑制U937细胞的增殖,促进其凋亡和自噬,其机制可能与激活SIRT1/FoxO1信号通路有关。

蓝萼甲素对宫颈癌C33A细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的 探讨蓝萼甲素(GLA)对宫颈癌C33A细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 将对数生长期宫颈癌C33A细胞随机分为阴性对照组、5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组、40μmol·L^(-1)GLA组,阴性对照组细胞不加任何药物干预,5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组、40μmol·L^(-1)GLA组细胞分别加入终浓度为5、10、20、40μmol·L^(-1)GLA进行干预。分别于培养24、48、72 h时,采用3,3′-[1-(苯氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸钠法检测5组细胞的增殖抑制率;于培养48 h时,采用流式细胞术检测阴性对照组、5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞凋亡率,Western blot法检测阴性对照组、5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞中磷酸化B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(p-BAD)和10号染色体缺失与张力蛋白同源磷酸酶(PTEN)蛋白相对表达量。结果 培养24、48、72 h时,5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组、40μmol·L^(-1)GLA组细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组,10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组、40μmol·L^(-1)GLA组细胞增殖抑制率显著高于5μmol·L^(-1)GLA组,20μmol·L^(-1)GLA组、40μmol·L^(-1)GLA组细胞增殖抑制率显著高于10μmol·L^(-1)GLA组,40μmol·L^(-1)GLA组细胞增殖抑制率显著高于20μmol·L^(-1)GLA组(P<0.05)。不同浓度GLA组细胞培养48、72 h时的增殖抑制率显著高于培养24 h时,培养72 h时的增殖抑制率显著高于培养48 h时(P<0.05)。5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞凋亡率显著高于阴性对照组,10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞凋亡率显著高于5μmol·L^(-1)GLA组,20μmol·L^(-1)GLA组细胞凋亡率显著高于10μmol·L^(-1)GLA组(P<0.05)。5μmol·L^(-1)GLA组、10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞中p-BAD蛋白相对表达量显著低于阴性对照组,PTEN蛋白相对表达量显著高于阴性对照组(P<0.05);10μmol·L^(-1)GLA组、20μmol·L^(-1)GLA组细胞中p-BAD蛋白相对表达量显著低于5μmol·L^(-1)GLA组,PTEN蛋白相对表达量显著高于5μmol·L^(-1)GLA组(P<0.05);20μmol·L^(-1)GLA组细胞中p-BAD蛋白相对表达量显著低于10μmol·L^(-1)GLA组,PTEN蛋白相对表达量显著高于10μmol·L^(-1)GLA组(P<0.05)。结论 GLA可通过上调PTEN蛋白、降低p-BAD的表达,抑制C33A细胞增殖,促进C33A细胞凋亡,且呈剂量依赖性。

蓝萼甲素抑制骨关节炎软骨细胞炎症反应的研究

目的 探究蓝萼甲素(GLA)对骨关节炎(OA)软骨细胞的影响。方法 根据体外炎症细胞模型构建GLA的不同应用浓度,将人原代关节炎软骨细胞分为以下5组:正常对照组,不对细胞施加任何处理;炎症模型组,即10 ng/mL白细胞介素-1β(IL-1β)处理软骨细胞24 h;梯度浓度GLA(5、10、20μM)+IL-1β组,即不同浓度(5、10、20μM)GLA处理软骨细胞2 h,然后用10 ng/mL的IL-1β处理24 h。采用qRT-PCR、Western blot、ELISA检测各组炎症相关分子mRNA和蛋白的表达;采用Western blot、免疫荧光检测各组NF-κB信号通路蛋白的表达。结果 GLA能抑制IL-1β诱导的软骨细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)的表达,减少一氧化氮(NO)和前列腺E2(PGE2)的释放;同时,GLA也抑制了IL-1β诱导的软骨细胞中炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-8的表达;并且,GLA还抑制了软骨细胞中p-p65的表达和p65的核转位,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 GLA能够减轻骨关节炎软骨细胞的炎症反应,这提示GLA可能成为一种治疗OA的有效药物。

蓝萼甲素对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞损伤模型HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨蓝萼甲素(GLA)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2细胞损伤的保护作用以及与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路的关系。方法:体外培养H9c2心肌细胞并构建H9c2细胞H/R损伤模型,实验分为6组:对照组(正常培养)、模型组(构建H/R细胞模型)、GLA-L组(细胞中加入5μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-M组(细胞中加入10μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-H组(细胞中加入20μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-H+甘草素组(细胞中加入20μmol/L的GLA和100μg/mL的HMGB1/TLR4/NF-κB通路抑制剂甘草素后构建H/R细胞模型)。CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;试剂盒测定细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测HMGB1、TLR4、NF-κB p65蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组H9c2细胞存活率和SOD含量明显降低,细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α、IL-6含量及HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,GLA-L组、GLA-M组、GLA-H组H9c2细胞存活率和SOD含量明显升高,细胞凋亡率、LDH、ROS、MDA、TNF-α、IL-6含量及HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平明显降低,均呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05)。与GLA-H组相比,GLA-H+甘草素组H9c2细胞HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平、细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α、IL-6含量均进一步下降,细胞存活率和SOD含量进一步上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:GLA可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,降低细胞凋亡率,减少炎性因子表达,进而保护H9c2细胞免受H/R诱导损伤。

蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的作用及其相关机制研究

目的观察蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,探讨其诱导凋亡的机制。方法采用体外细胞培养方法,以不同浓度蓝萼甲素作用于HeLa细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的存活率;透射电镜观察细胞的形态学变化;流式细胞仪(AnnexinV-FITC)检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达情况。结果与对照组相比,蓝萼甲素对HeLa细胞有增殖抑制作用,呈剂量、时间依赖趋势;Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上调,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调。结论蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞有增殖抑制及诱导凋亡的作用,其分子机制可能与线粒体信号通路有关。

蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型5种细胞因子水平的影响

目的:探讨蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型细胞因子水平的影响。方法:采用Cytometric Bead Array(CBA)法检测蓝萼甲素对小鼠脾细胞Th1/Th2型5种细胞因子(IL-2,IFN-γ,TNF-α,IL-4,IL-5)水平的影响。结果:蓝萼甲素对ConA诱导的Th1细胞来源的细胞因子(IL-2,IFN-γ,TNF-α)和Th2细胞来源的细胞因子(IL-4,IL-5)的产生均有显著的抑制作用,且蓝萼甲素对Th1细胞来源的细胞因子的抑制作用要强于Th2细胞来源的;对未经ConA活化的小鼠脾细胞,蓝萼甲素对IL-2,IFN-γ和TNF-α的产生有抑制作用,而对IL-4,IL-5则有促进作用。结论:蓝萼甲素的免疫抑制作用可能与其对Th1/Th2型细胞因子的影响有关。

蓝萼甲素对人肺癌A549细胞的作用及其机制

蓝萼甲素（glaucocalyxinA）是由唇形科香茶菜属植物香茶菜Rabdosia amethystoieds （Benth） Ham中分离提取出的二萜化合物，可抑制SiHa、Hela、HL-60等细胞株增殖。本文研究了蓝萼甲素对人肺腺癌A549细胞增殖的影响，并初步探讨其机制。

蓝萼甲素抗血栓作用研究

目的:研究蓝萼甲素的抗血栓作用。方法:考察蓝萼甲素对SD大鼠的血小板聚集性、血瘀模型大鼠血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α以及NO和ET含量的影响,通过大鼠动-静脉旁路血栓形成实验、ADP-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成实验、急性血瘀模型大鼠血液流变学实验、大鼠离体动脉条的舒张实验,研究蓝萼甲素的抗血栓作用,并初步探讨其机制。结果 :蓝萼甲素浓度依赖性降低ADP以及凝血酶所诱导的血小板聚集;降低血瘀模型大鼠血浆中TXB2含量,显著升高血浆中6-KetoPGF1α含量,升高血浆中NO的含量,降低血浆中ET含量;蓝萼甲素对大鼠动-静脉旁路血栓形成有抑制作用,对ADP-肾上腺素混合溶液诱导的小鼠血栓性偏瘫形成有保护作用;显著降低急性血瘀模型大鼠的全血及血浆黏度,蓝萼甲素依赖内皮细胞发挥舒张血管作用,而且与NO合成通路密切相关。结论:蓝萼甲素通过抑制血小板聚集,抑制血栓形成,降低全血及血浆黏度,舒张血管,从而发挥抗血栓作用。

蓝萼甲素体外细胞毒活性研究

目的:观察蓝萼甲素对正常肝细胞株(BRL)、人白血病细胞株(Jurkat)、人乳腺癌细胞株(SK-BR-3)、人结肠癌细胞株(SW 480)、人肝癌细胞株Bel-7402、人胃癌细胞株SGC-7901、人白血病HL60、人淋巴瘤HUT-78、人喉癌hep-2、人宫颈癌hela的细胞毒性作用。方法体外培养条件下,用不同浓度蓝萼甲素分别处理1种正常细胞和9种肿瘤细胞株,MTT法测定各细胞株的抑制率。结果:蓝萼甲素对所选用的细胞株均具有较强的抑制活性,并存在浓度剂量效应,高浓度抑制作用强。结论蓝萼甲素具有较强的细胞毒性。

蓝萼甲素对兔血小板生成血小板活化因子及花生四烯酸代谢的影响

蓝萼甲素在浓度0.1～100μmol·L^(-1)时可抑制A23187刺激的免血小板生成血小板活化因子,其IC_(50)为0.47μmol·L^(-1),当其浓度为10,100μmol·L^(-1)时能抑制花生四烯酸诱导的兔血小板血栓素A_2生成同时升高前列腺素E_2,推测蓝萼甲素通过抑制血小板活化因子生物合成及选择性抑制血栓素A_2生成而抑制血小板激活。

蓝萼甲素通过PI3K/Akt信号通路诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

目的研究蓝萼甲素(GLA)诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其对PI3K/Akt信号通路的影响。方法 MTT实验检测GLA对乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435s,正常乳腺上皮细胞MCF-10a的增殖抑制活性;倒置显微镜观察GLA对MDA-MB-231细胞的形态的影响;Annexin V/PI双标记流式细胞术检测GLA诱导MDA-MB-231细胞凋亡;qRT-PCR检测GLA干预后,细胞中Bax、Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达水平变化;Western blot检测PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt、Bax、Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达水平变化。结果 GLA呈剂量依赖性抑制MDA-MB-231和MDA-MB-435s细胞生长,IC50分别为5.11、6.32μmol·L^-1;GLA作用MDA-MB-231细胞48 h后,贴壁细胞间隙增大,形态变圆;GLA可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,8μmol·L^-1 GLA作用48 h细胞凋亡率达到61.65%;qRT-PCR和Western blot结果显示,GLA下调MDA-MB-231细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA和蛋白质水平,上调Bax mRNA和蛋白质水平,下调p-PI3K,p-Akt蛋白水平,PI3K,Akt蛋白水平基本不变。结论 GLA在一定浓度范围内可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖,并通过抑制PI3K/Akt信号通路诱导MDA-MB-231细胞凋亡。

两种环糊精蓝萼甲素包合物的制备与抗肿瘤作用比较

目的制备羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精蓝萼甲素包合物,比较其体外溶解性能及体内抗肿瘤作用。方法分别用羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精制备蓝萼甲素包合物。差示热分析法鉴定,紫外分光光度法测定含量,从相溶解度、溶解度、体外溶出速率以及对小鼠S180移植瘤瘤重的影响方面比较两种包合物。结果蓝萼甲素采用环糊精包合后,相溶解度、溶解度、体外溶出速率均提高,其中γ-环糊精包合作用更好,对小鼠S180移植瘤的抑瘤率43.87%,羟丙基-β-环糊精包合的蓝萼甲素抑瘤率30.66%。结论γ-环糊精包合在改善蓝萼甲素体外溶解性能方面优于羟丙基-β-环糊精,且对S180移植瘤生长的抑制作用更明显。

RP-HPLC法测定大鼠血浆中蓝萼甲素含量与药代动力学及排泄研究

目的:研究蓝萼甲素在大鼠体内的药代动力学过程及排泄过程并建立大鼠生物样品测定的高效液相色谱方法。方法:采用液液萃取的方法从生物样品中提取出蓝萼甲素后用 Hypersil BDS C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱进行分离,流动相为甲醇-水(45:55)。结果:蓝萼甲素在大鼠体内静脉给药后药代动力学符合二房室模型。t_(1/2α)和 t_(1/2β)分别为4.32 min 和28.56min,12 h 蓝萼甲素在尿、粪便中的排泄量分别为12.8%和23.8%,在10 h 内胆汁中的排泄量为35.68%。结论:此方法快捷、灵敏、简便,适合于蓝萼甲素的药代动力学研究。

蓝萼甲素抗凝血作用研究

目的:研究蓝萼甲素抗凝血作用。方法:测定蓝萼甲素对小鼠毛细管凝血时间和尾尖出血时间的作用;测定蓝萼甲素对小鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)、血浆复钙时间(PRT)的影响。测定蓝萼甲素对家兔体外TT、PT、APTT和PRT的影响。结果:蓝萼甲素能显著延长小鼠毛细管凝血时间和尾尖出血时间;显著延长小鼠TT、PT、APTT和PRT。蓝萼甲素在体外显著延长家兔TT、APTT和PRT。结论:蓝萼甲素具有抗凝血活性。

蓝萼甲素γ-环糊精包合物对S_(180)肿瘤生长及凋亡的影响

目的探讨蓝萼甲素γ-环糊精包合物(GLA-γ-CD)对荷瘤小鼠S180移植瘤生长及凋亡的影响。方法制备小鼠S180皮下移植瘤模型,随机分为5组,每组10只。对照组给予生理盐水,环磷酰胺组给予环磷酰胺10 mg/kg,GLA-γ-CD高、中、低剂量组分别给予GLA-γ-CD 80、40、20 mg/kg,均腹腔注射给药12 d,观察抑瘤作用,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法及实时荧光定量PCR法分别检测突变型p53蛋白及mRNA的表达。结果与对照组比较,GLA-γ-CD各剂量组的瘤重均明显降低(P<0.01,P<0.05),其中GLA-γ-CD高剂量组抑瘤率达57.26%,肿瘤细胞凋亡指数明显提高(P<0.01),突变型p53蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),且与环磷酰胺组作用相当。结论 GLA-γ-CD能明显抑制S180肿瘤生长,其机制可能与减少突变型p53的表达,从而诱导细胞凋亡有关;并且GLA-γ-CD在发挥抗肿瘤同时毒性作用不大,具有较好的开发前景。