蓬子菜总黄酮基于TGF-β/Smad3和JNK信号通路对动脉硬化内皮细胞的影响研究

目的探讨蓬子菜总黄酮基于转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对动脉硬化内皮细胞的影响。方法将24只成年雄兔随机分为正常组、模型组、蓬子菜总黄酮低剂量组、蓬子菜总黄酮高剂量组,每组6只。除正常组外,其余组兔建立下肢动脉硬化闭塞模型。建模成功后,蓬子菜总黄酮低、高剂量组分别给予45 mg/kg、180 mg/kg的蓬子菜总黄酮灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。各组兔灌胃2周后处死,取右侧髂股动脉,分离培养内皮细胞。采用Western blot法检测内皮细胞中TGF-β_(1)、Smad3、JNK及磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达情况,分别采用酶联免疫分析法、硝酸还原法、放射免疫法检测内皮细胞中炎症因子[C反应蛋白(CRP)、可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)含量。结果模型组内皮细胞中TGF-β_(1)、Smad3、JNK、p-JNK蛋白表达量及CRP、sICAM-1、TNF-α、IL-1β、ET-1含量均明显高于正常组(P均<0.05),蓬子菜总黄酮各组上述各指标均明显低于模型组(P均<0.05),且蓬子菜总黄酮高剂量组各指标均明显低于蓬子菜总黄酮低剂量组(P均<0.05)。模型组内皮细胞中NO含量明显低于正常组(P<0.05),蓬子菜总黄酮各组NO含量均明显高于模型组(P均<0.05),且蓬子菜总黄酮高剂量组明显高于蓬子菜总黄酮低剂量组(P<0.05)。结论蓬子菜总黄酮可减轻炎症反应,保护血管内皮细胞,抑制平滑肌细胞增殖和细胞凋亡,改善血管内皮功能,机制可能与抑制TGF-β/Smad3和JNK信号通路有关。

蓬子菜中香叶木苷对华法林在大鼠体内药动学和药效学影响的研究

目的研究蓬子菜中香叶木苷对单剂量和稳态华法林在大鼠体内药动学和药效学的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,每组6只。单剂量华法林组给予0.5%CMC-Na液灌胃,单剂量华法林+香叶木苷组给予香叶木苷药液80.00 mg/kg灌胃,均连续7 d;第8天,2组再分别给予华法林药液0.25 mg/kg灌胃1次。华法林稳态组、华法林稳态+香叶木苷组每天给予华法林药液0.25 mg/kg灌胃,连续8 d;第5天起,华法林稳态组同时给予0.5%CMC-Na液灌胃,华法林稳态+香叶木苷组同时给予香叶木苷药液80.00 mg/kg灌胃。给药后于不同时间点采集血浆样品,测定血药浓度,DAS 2.0计算主要药动学参数(C_(max),t_(1/2),AUC_((0-t)),AUC_((0-∞)));测定凝血酶原时间(PT),计算国际标准化比值(INR)。结果单剂量华法林+香叶木苷组的C _(max),t_(1/2),AUC_((0-t)),AUC_((0-∞))和血药浓度均较单剂量华法林组有所升高,但2组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);单剂量华法林+香叶木苷组PT明显长于单剂量华法林组(P<0.05),INR明显高于单剂量华法林组(P<0.05)。华法林稳态+香叶木苷组联合用药后第1,2,3天华法林的血药浓度均较华法林稳态组有所升高,但2组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);华法林稳态+香叶木苷组PT明显长于华法林稳态组(P<0.05),INR明显高于华法林稳态组(P<0.05)。结论香叶木苷与华法林联合应用可延长PT,升高INR,二者联合应用时应监测PT和INR,以免发生出血。

蓬子菜总黄酮通过LncRNA TPTEP1/miR-770-5p对高糖诱导足细胞损伤的影响及其机制

目的探讨蓬子菜总黄酮(FGVL)对高糖诱导足细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用高糖诱导小鼠足细胞建立细胞损伤模型,不同浓度的FGVL处理足细胞,用脂质体转染法将pcDNA、pcDNA-TPTEP1转染至足细胞后用25 mmol/L葡萄糖处理24 h,用脂质体转染法将si-NC、si-TPTEP1转染至足细胞后用200μg/ml FGVL与25 mmol/L葡萄糖处理24 h;用试剂盒检测丙二醛(MDA)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TPTEP1、miR-770-5p的水平;双荧光素酶报告实验验证TPTEP1与miR-770-5p的靶向关系;Western印迹检测肾病蛋白(nephrin)、足突蛋白(podocin)、突触极蛋白(synaptopodin)、酶切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达量。结果FGVL可明显降低高糖诱导的足细胞中miR-770-5p表达量和MDA水平(P<0.05),并可明显降低细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平(P<0.05),而细胞存活率和SOD、CAT活性明显升高(P<0.05),TPTEP1表达量和nephrin、podocin、synaptopodin蛋白表达明显升高(P<0.05);TPTEP1可靶向调控miR-770-5p表达;转染pcDNA-TPTEP1后高糖诱导的足细胞中miR-770-5p表达量和MDA的水平明显降低,细胞凋亡率明显下降,Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白表达明显下降,细胞存活率和SOD、CAT活性明显升高,nephrin、podocin、synaptopodin蛋白表达明显升高(均P<0.05);转染si-TPTEP1可逆转FGVL对高糖诱导的足细胞增殖、凋亡和氧化应激反应。结论FGVL能有效调控细胞增殖与各项氧化反应,其有效调控TPTEP1/miR-770-5p表达是其发挥调控作用的基础,因此有效改善因高糖引起的足细胞受损。

蓬子菜的化学成分

目的对茜草科拉拉藤属植物蓬子菜(Galium verumL.)全草的体积分数为95%的乙醇溶液提取物进行分离并鉴定。方法采用硅胶柱色谱等方法分离化学成分,1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定。结果从体积分数为95%的乙醇溶液提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为2,5-二羟基-1-甲氧基-蒽醌(2,5-dihydroxy-1-methoxyanthraquinone,1)、1-羟基-2-羟甲基-3-甲氧基-蒽醌(1-hydroxy-2-hydroxymethy-3-methoxyanthraquinine,2)、环烯醚萜内酯(morindolide,3)、水晶兰苷(monotropein,4)、去乙酰车叶草苷酸(deacetylasperulosidic acid,5)、6α-羟基-京尼平苷(6α-hydrox-ygeniposide,6)。结论化合物1、2、3为从本属植物中首次分离得到。

蓬子菜浸出液湿敷对PICC所致静脉炎预防作用的临床观察

目的:观察预防性蓬子菜浸出液湿敷对PICC所致静脉炎发生率的影响。方法:按照随机分组法把96例行PICC的患者随机分为观察组、对照组,两组患者性别、年龄、置管部位均无显著差异,具有可比性。观察组患者PICC后立即于穿刺点上方、沿穿刺静脉走行进行预防性蓬子菜浸出液纱布湿敷,纱布外层使用保鲜膜包裹,每日3次湿敷,10天为1疗程;对照组不予预防性药物湿敷。观察两组患者PICC穿刺10天后静脉炎发生率。结果:观察组患者PICC穿刺10天后静脉炎的发生率为6.38%,对照组患者为20.40%,观察组静脉炎发生率显著低于对照组(P<0.05),具有统计学意义。结论:采用预防性蓬子菜浸出液湿敷,可以有效降低PICC患者静脉炎的发生率。

蓬子菜药材HPLC指纹图谱研究

目的建立蓬子菜药材的HPLC指纹图谱。方法以香叶木苷为内标物,采用高效液相色谱法分析不同产地10个蓬子菜样品,并进行相似度计算。色谱条件Hypersil ODS2柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%醋酸溶液梯度洗脱;体积流量为1.0mL/min;检测波长340nm;柱温26℃。结果本研究建立了具有19个共有峰的蓬子菜药材指纹图谱,各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论本方法重现性好,可用于不同产地蓬子菜药材的指纹图谱的测定和质量评价。

药理效应法测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药动学参数

目的:采用药理效应法测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药动学参数。方法:以谷胱甘肽过氧化物酶活力升高率作为药理效应评价指标,测定蓬子菜总黄酮在大鼠体内的药物动力学参数。结果:低、中、高不同剂量蓬子菜总黄酮大鼠口服给药后t_(1/2α)分别为1.23,0.93,0.97 h;t_(1/2β)分别为11.84,12.06,16.51 h;AUC_(0-t)分别为143.43,206.25,275.92 mg·L^(-1)·h^(-1);AUC_(0-∞)分别为181.02,231.74,295.06 mg·L^(-1)·h^(-1);达峰T_(max)为2 h。结论:蓬子菜总黄酮口服给药后,在大鼠体内的药物动力学过程符合二室模型,且在给药剂量范围内呈线性动力学特征。

蓬子菜水溶液对大鼠皮肤溃疡创面修复影响的实验研究

目的:观察采用常规换药基础上局部喷洒蓬子菜水溶液治疗的大鼠皮肤溃疡创面与常规换药基础上局部喷洒0.9%氯化钠溶液的大鼠皮肤溃疡创面愈合程度上的差异,评价蓬子菜水溶液对大鼠皮肤溃疡的治疗作用。方法:将60只Wistar大鼠随机分为两组,常规换药基础上局部喷洒蓬子菜水溶液治疗30只大鼠皮肤溃疡创面(实验组),常规换药基础上局部喷洒0.9%氯化钠溶液治疗30只大鼠皮肤溃疡创面(对照组),造模后第2天开始治疗,分别于治疗第3天、第7天、第10天采用数码相机照相电子计算机软件分析及透明生物膜描膜法观察溃疡创面愈合情况,治疗第10天切取创面肉芽组织,经HE染色后在光学显微镜下观察皮肤溃疡创面肉芽组织及新生血管的生长情况。结果:两组比较,伤后同一时间点上,实验组皮肤溃疡创面面积明显小于对照组皮肤溃疡创面面积,差异有统计学意义(P<0.05)。显微镜下观察溃疡愈合情况,实验组比空白组肉芽组织形成更加明显,且新生毛细血管更加丰富。结论:常规换药基础上局部喷洒蓬子菜水溶液治疗大鼠皮肤溃疡创面的效果明显优于常规换药基础上局部喷洒0.9%氯化钠溶液治疗,方法简单,疗效显著,疗程短。

蓬子菜水溶液对糖尿病患者皮肤溃疡的临床疗效观察

目的:观察蓬子菜水溶液对糖尿病患者皮肤溃疡的临床疗效。方法:将60例符合纳入标准的2型糖尿病下肢皮肤溃疡患者随机分成两组,每组30例。在控制血糖和溃疡创面局部换药基础上,观察组患者溃疡病灶创面喷洒蓬子菜水溶液,对照组患者溃疡病灶创面喷洒贝复济溶液,两组患者每日局部换药后喷洒药物治疗1次,连续4周为1个疗程,并于本实验药物治疗开始和药物治疗结束时分别采用透明生物膜描膜法计算溃疡创面面积,观察两组患者的皮肤溃疡创面愈合情况,进行组间的疗效比较。结果:观察组药物治疗的总有效率、创面愈合的效率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间观察组和对照组患者均未发生治疗不良反应,患者全身重要器官功能也未出现异常。结论:蓬子菜水溶液对糖尿病患者皮肤溃疡创面愈合具有明显的促进作用,疗效确切,无副作用,值得临床推广应用。

蓬子菜有效成分对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎症损伤的保护作用

目的:研究蓬子菜中总黄酮和木犀草苷对脂多糖(LPS)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症损伤的保护作用。方法:以HUVEC为研究对象,用CCK-8检测总黄酮及木犀草苷对HUVEC增殖的影响;采用流式细胞仪检测不同浓度LPS对HUVEC细胞周期的影响;酶联免疫分析法检测总黄酮及木犀草苷对LPS诱导的HUVEC炎症因子生成的影响;实时定量PCR法检测HUVEC中P-选择素E-选择素mRNA水平。Western blot法测NF-κB,P-IκB蛋白表达。结果:药物浓度在6.25、12.5、25μg/m L时细胞增殖率最大;总黄酮及木犀草苷能明显下调LPS诱导的炎症因子和黏附分子的分泌,同时也降低了P-选择素E-选择素的表达,NF-κB,P-IκB蛋白表达量。结论:LPS对HUVEC有抑制作用呈剂量、时间依赖性,给予总黄酮和木犀草苷后,损伤有明显改善。

蓬子菜冲剂对降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平的影响

目的:观察蓬子菜冲剂对股动脉闭塞症家兔的降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的水平的影响。方法:建立股动脉闭塞症家兔模型,并观察蓬子菜冲剂对其血浆降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的影响。结果:股动脉闭塞症家兔的降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平降低。蓬子菜冲剂能够明显提高降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素的水平,且效果类似康脉胶囊。结论:蓬子菜冲剂治疗动脉闭塞症的机理与调节降钙素基因相关肽和肾上腺髓质素水平相关。

蓬子菜总黄酮颗粒剂的制备工艺研究

目的:优选蓬子菜总黄酮颗粒剂最佳成型工艺条件并建立其质量控制方法。方法:在对辅料筛选的基础上,采用正交试验,以颗粒的粗粒及细粉总和的百分率为指标,优选蓬子菜总黄酮颗粒成型工艺。采用TLC对蓬子菜总黄酮颗粒剂进行鉴别;采用UV法测定颗粒剂中总黄酮的含量。结果:最佳成型工艺为浸膏粉:辅料(糊精:甘露醇=1∶1)=1∶1.5比例混合,95%乙醇为润湿剂,所制颗粒各项指标均符合《中国药典》(2010年版一部附录I C)颗粒剂项下相关规定。TLC鉴别图谱斑点清晰;总黄酮在0.008～0.024mg/mL范围内线性关系良好。结论:该成型工艺稳定可控,建立的定性及含量测定方法可有效控制该颗粒剂质量。

蓬子菜中活性成分DXG在大鼠体内的药物动力学研究

目的:研究蓬子菜活性成分DXG在大鼠体内的药物动力学。方法:采用HPLC法测定大鼠血浆中药物浓度,利用3P97药动学软件处理数据。结果:大鼠静脉注射不同剂量DXG后,DXG的血药浓度-时间变化符合二室模型,分布半衰期分别为3.57,3.70,3.48min(RSD2.51%),消除半衰期分别为34.10,37.99,32.98min(RSD6.13%);AUC值分别为53.62,107.74,242.27mg/min/L。结论:不同剂量DXG静脉注射后,在大鼠体内的药物动力学符合二室模型,且在给药剂量内呈线性药动学特征。

蓬子菜总黄酮对D-半乳糖致过氧化损伤大鼠SOD、MDA和GSH-Px水平的影响

目的:探究FGVL对D-半乳糖致过氧化损伤大鼠的保护作用。方法:采用腹腔注射D-半乳糖建立过氧化损伤模型后,分别灌胃给予FGVL低、中、高剂量和维生素E,记录大鼠体质量变化。末次给药后取血,并取出心、肾、脾、肝和脑称重,同时进行血浆、肝脏和脑组织中T-SOD、MDA和GSH-Px的测定。结果:给予FVGL不同剂量后,D-半乳糖致过氧化损伤大鼠的一般状态均明显改善,行动敏捷,毛色有光泽,体质量呈逐渐上升趋势,且与空白组相比无显著差异(P>0.05)。血浆和肝脏、脑组织中的T-SOD和GSH-Px水平均不同程度增加,而MDA的水平降低。结论:FGVL可通过降低活性氧自由基的含量,改善D-半乳糖致过氧化损伤大鼠的老化状态,提高其抗氧化能力,并维持各脏器指标正常,表明FVGL对衰老所致的氧化损伤具有良好的保护作用。

蓬子菜中香叶木苷对急性血瘀及血管内皮功能影响的实验研究

目的:研究蓬子菜活性成分香叶木苷对急性血瘀模型大鼠凝血功能及血管内皮功能的作用。方法:采用皮下注射盐酸肾上腺素复合冰水浴制备大鼠急性血瘀模型,通过测定凝血四项研究香叶木苷对血瘀大鼠凝血功能的影响,并通过测定血液中可溶性细胞间黏附因子-1(s ICAM-1)、可溶性血管细胞黏附因子-1(s VCAM-1)的含量,研究香叶木苷对血管内皮功能的影响。结果:与模型组比较,香叶木苷能明显改善血瘀大鼠凝血功能,延长凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),降低纤维蛋白原(FIB)及细胞黏附因子s ICAM-1、s VCAM-1的含量。结论:香叶木苷可改善急性血瘀大鼠凝血功能,有效减少细胞黏附因子的释放,具有抗凝血功能,并能改善血管内皮功能。

药用植物蓬子菜的有效部位、活性成分及指纹图谱研究

从药用植物蓬子菜的有效部位，分离得到3个有机酸化合物和6个黄酮类化合物，分别为绿原酸、咖啡酸、水杨酸、芸香苷，喇叭茶苷，香叶木苷，香叶木素（2→1）葡萄阿拉伯糖苷，异槲皮苷，香叶木素7-O-β-D-葡萄糖苷。并对十个不同产地的蓬子菜进行了指纹图谱研究，确定了19个共有峰，分离所得到的大部分活性化合物出现在指纹图谱中。

蓬子菜化学成分及其药理活性研究进展

蓬子菜为茜草科植物 ,其化学成分主要为黄酮、蒽醌、环烯醚萜类 ,另外还含有一定的有机酸、蜡质及其他成分 ,并以国内外文献为依据 ,对蓬子菜的化学及药理方面予以综述。

蓬子菜黄酮对老龄荷瘤小鼠抗氧化防御体系的影响

目的观察蓬子菜黄酮(GVL-F)对老龄荷瘤小鼠血清抗氧化防御体系的影响。方法小鼠腹腔注射D-半乳糖60 d后,于小鼠左前肢腋窝皮下接种0.2 ml U14肿瘤细胞建立老龄宫颈癌鼠模型。实验分为对照组、环磷酰胺(CTX)和GVL-F低、高剂量(L、H)组。经GVL-F处理13 d后,各组试验动物血清的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平及碱性磷酸酶(AKP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性被测定。结果 GVL-F处理13 d后,荷瘤小鼠体重减轻的症状有明显改善,GVL-F对肿瘤的生长有显著抑制作用。与对照组相比,GVL-F(L)和GVL-F(H)均可升高荷瘤小鼠血清中T-AOC水平(P<0.05,P<0.01);GVL-F(H)组小鼠血清SOD活性与对照组相比显著升高(P<0.05),作用效果与CTX相似;与对照组相比,GVL-F(L,H)处理均可以显著降低小鼠血清MDA水平(P<0.05)。GVL-F处理对荷瘤小鼠血清AKP活性影响不大,而与对照组相比,GVL-F(L)、GVL-F(H)组的LDH水平均显著降低(P<0.01)。结论 GVL-F可以通过降低脂质过氧化物水平、减少LDH含量及提高血清抗氧化酶活性抑制老龄荷瘤小鼠肿瘤细胞的生长。

蓬子菜水溶液对股动脉硬化闭塞症家兔模型血清C-反应蛋白的影响

目的:观察蓬子菜水溶液对股动脉硬化闭塞症家兔模型的血清C-反应蛋白的影响,进一步探讨蓬子菜水溶液治疗动脉硬化闭塞症的作用机理。方法:采用复合手段制成"股动脉硬化闭塞症"家兔模型,观察蓬子菜水溶液对其血清血清C-反应蛋白的影响。结果:蓬子菜水溶液可降低股动脉硬化闭塞症家兔血清C-反应蛋白,并且明显优于对照组(P<0.01)。结论:蓬子菜水溶液可降低血清C-反应蛋白,对动脉硬化闭塞症的发生发展有着很好的抑制作用,起着积极的治疗作用。

复方蓬子菜颗粒剂质量控制研究

复方蓬子菜颗粒剂是临床用于治疗周围血管病的有效药物制剂,己达30多年,效果甚佳。本文在其质量控制方面进行了研究,实验采用薄层色谱法对黄英、蓬子菜和土获苓进行了鉴别研究;采用高效液相色谱法,以蓬子菜为对象,以绿原酸为指标进行含量测定研究。结果在供试品色谱中均含有对照品或对照药材相应的斑点;本品含蓬子菜以绿原酸计不少于0.029%。