冠心病患者甘油三酯-葡萄糖指数、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α表达水平及其与冠脉血管病变程度相关性研究

目的 探讨冠心病(CHD)患者甘油三酯-葡萄糖指数(Ty G)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平,分析上述指标与冠状动脉狭窄程度的关系。方法 选取2022年3月至12月就诊于新疆医科大学第五附属医院确诊CHD并完善冠脉造影检查患者127例。根据冠脉造影结果和Gensini评分将患者分为轻度狭窄组(Gensini评分<36分,n=69)与重度狭窄组(Gensini评分≥36分,n=58)。另选取冠脉造影结果正常的57例受试者为非CHD组。收集研究对象一般临床资料,计算TyG,采用酶联免疫吸附试验检测IL-6、TNF-α水平。采用Logistic回归分析筛选CHD患者冠脉重度狭窄的独立危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线检验TyG、IL-6、TNF-α以及三者联合预测CHD患者冠脉重度狭窄的价值。结果 重度狭窄组Ty G、IL-6、TNF-α表达水平高于轻度狭窄组、非CHD组;轻度狭窄组IL-6水平高于非CHD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,TyG与Gensini评分(r=0.269,P<0.01)、IL-6(r=0.348,P<0.01)、TNF-α(r=0.443,P<0.01)呈正相关。Logistic回归分析结果显示,性别(OR=0.301,95%可信区间:0.104~0.868,P=0.026)、年龄(OR=1.110,95%可信区间:1.044~1.181,P<0.001)、脂蛋白(OR=1.004,95%可信区间:1.001~1.008,P=0.011)、IL-6(OR=1.052,95%可信区间:1.024~1.081,P<0.001)、TyG(OR=3.163,95%可信区间:1.105~9.056,P=0.032)为CHD患者冠脉重度狭窄的独立危险因素。Ty G、IL-6、TNF-α以及三者联合预测CHD患者冠脉重度狭窄的ROC曲线下面积分别为0.656、0.630、0.622、0.677。结论 TyG表达水平与CHD患者IL-6、TNF-α水平及冠状动脉血管病变程度密切相关,TyG可能是CHD的潜在炎性指标。TyG联合IL-6、TNF-α对于预测CHD患者冠脉狭窄程度有一定价值。

芍药苷-6'-O-苯磺酸酯在甲醇中降解杂质结构解析和降解机制研究

目的:探究芍药苷-6’-O-苯磺酸酯在甲醇中的降解杂质,确证其结构,阐明降解机理。方法:将芍药苷-6’-O-苯磺酸酯溶于甲醇中,在加热的条件下生成降解杂质,通过硅胶柱层析和制备液相分离得到2个降解杂质,采用核磁共振、红外、质谱等技术确证杂质的结构,并对其降解机理进行推理。结果:鉴定了2个降解杂质结构,推测出芍药苷-6’-O-苯磺酸酯在甲醇中的降解机理。结论:为芍药苷-6’-O-苯磺酸酯的杂质研究提供了物质基础,同时也为其工艺路线的选择、分析方法开发以及质量研究与控制提供较为科学的依据。

6-羟基己酸甲酯高效催化加氢制备1,6-己二醇的工艺研究

在釜式反应器内进行6-羟基己酸甲酯加氢制备1,6-己二醇的工艺研究,考察了反应温度、反应压力、催化剂质量分数和反应时间等因素对催化加氢过程的影响,并采用气相色谱仪分析监测6-羟基己酸甲酯催化加氢制备1,6-己二醇的反应进程,得到最优工艺条件:温度为200℃、压力为7 MPa、催化剂质量分数为8%、反应时间为6 h。进一步采用核磁共振氢谱和红外光谱等分析手段对产品进行结构确认,结果表明,6-羟基己酸甲酯的转化率达99%,1,6-己二醇选择性最高可达86%。

顶空-气相色谱法测定芍药苷-6'-O-苯磺酸酯中的残留溶剂

目的:建立顶空-气相色谱法测定芍药苷-6’-O-苯磺酸酯中的6种残留溶剂的测定方法。方法:采用顶空-气相色谱法,HP-INNOWAX(0.530 mm×30 m,1μm)石英毛细管柱,氢火焰离子化检测器,载气为氮气,流速5 mL/min;柱温为程序升温,进样口温度为120℃,检测器温度260℃。顶空进样条件:顶空平衡时间为30 min,平衡温度80℃,定量环温度95℃,传输线温度90℃。结果:测定的6种有机溶剂完全分离,在相应浓度范围内线性关系良好。甲醇、乙醇、丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯和碳酸二甲酯的定量限分别是10.0 mg/kg,5.0 mg/kg,1.0 mg/kg,1.5 mg/kg,1.0 mg/kg和5.0 mg/kg,检测限分别是3.0 mg/kg,1.5 mg/kg,0.3 mg/kg,0.45 mg/kg,0.3 mg/kg和1.5 mg/kg。加标回收率、精密度、重复性和耐用性的RSD均小于10%。结论:本方法可以较好地用于测定芍药苷-6’-O-苯磺酸酯中的残留溶剂,对芍药苷-6’-O-苯磺酸酯的质量控制提供了科学依据。

超声条件下蔗糖-6-月桂酸单酯及蔗糖-6’-月桂酸单酯的合成、纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了超声处理条件下合成的蔗糖月桂酸单酯,并对纯化后的组分采用高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振(1H-NMR、13C-NMR)进行了结构鉴定和表征。TLC分离蔗糖月桂酸酯的理想条件:点样量4μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸/水(V/V/V/V,75:15:7:3)展开25min,然后用10%磷钼酸乙醇溶液喷雾,105℃显色10min。硅胶柱层析分离蔗糖月桂酸酯的较佳条件为:3g样品溶于10mL洗脱剂上,35mm×700mm硅胶(200～300目)层析柱,流动相为TLC展开剂配比,流速为40～50mL/h,每30min收集一份洗脱液。两种单酯组分分别为蔗糖-6-月桂酸酯和蔗糖-6’-月桂酸酯。

芍药苷-6-氧-苯磺酸酯(CP-25)通过TLR-4/NF-κB信号通路对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨芍药苷-6-氧-苯磺酸酯(CP-25)通过Toll样受体4(TLR-4)/核因子κB(NF-κB)信号通路对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:CCK-8实验检测人卵巢癌细胞A2780、SK-OV-3、HO8910及正常卵巢细胞HOSEpiC的活性。A2780细胞分为对照组(0.01%二甲基亚砜)、CP-25低(0.5 mg/ml CP-25)、中(1 mg/ml CP-25)、高(2 mg/ml CP-25)浓度组和CP-25高浓度+LPS组(2 mg/ml CP-25和0.1μg/ml TLR-4激活剂LPS)。CCK-8和克隆形成实验评估细胞增殖能力;流式细胞术和TUNEL染色分析细胞凋亡情况;Western blot分析增殖蛋白Ki67、凋亡相关蛋白(Cleaved caspase-3、Caspase-3、Bax、Bcl-2)、TLR-4、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白表达水平;免疫荧光染色观察TLR-4、NF-κB p65蛋白表达。结果:与HOSEpiC细胞相比,A2780、SK-OV-3、HO8910细胞活性随CP-25浓度增加而逐渐减弱(P<0.05),且CP-25在低、中、高浓度下对A2780细胞的生长有50%左右的抑制作用,故采用A2780细胞进行实验。与对照组相比,CP-25低、中、高浓度组A2780细胞克隆形成率显著下降,细胞凋亡率和凋亡指数明显上升,Ki67、Bcl-2、TLR-4、p-NF-κB p65表达水平和细胞核NF-κB p65水平显著降低,Cleaved caspase-3/Caspase-3、Bax表达显著升高(P<0.05),且呈现浓度依赖性。与CP-25高浓度组相比,CP-25高浓度+LPS组细胞活性、克隆形成率明显升高,细胞凋亡率和凋亡指数明显降低,Ki67、Bcl-2、TLR-4、p-NF-κB p65表达水平和细胞核NF-κB p65水平明显升高,Cleaved caspase-3/Caspase-3和Bax表达明显降低(P<0.05)。结论:CP-25通过抑制TLR-4/NF-κB信号通路抑制卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡。

基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术建立血清IL-6水平检测方法与初步应用评价

目的基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法。方法采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和素包被的磁性固相微粒特异反应发光,通过测量发光信号值进行定量分析;并对其标记抗体稀释缓冲液、标记抗体浓度、样本加样量等进行条件优化;对空白限(LOB)、检出限(LOD)、中间精密度、可报告范围、干扰实验、钩状(HOOK)效应等性能指标进行评价;选择145例血清样本,采用线性回归分析与罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果成功建立一种基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术检测血清IL-6的方法。该方法选择MESBSA作为标记抗体稀释缓冲液,标记抗体浓度选择0.2μg/ml,样本加样量选择50μl。该方法的LOB为0.2 pg/ml,LOD为0.5 pg/ml,可报告范围为0.5~30000 pg/ml,中间精密度<5.3%。在IL-6达到200000 pg/ml浓度水平时,未出现HOOK效应现象。在三酰甘油(TG)30000μg/ml,血红蛋白(HGB)9000μg/ml,胆红素(TBIL)330μg/ml,类风湿因子(RF)1500 IU/ml浓度范围内,干扰物质对检测结果无影响。与电化学发光法测定IL-6比对,线性回归方程为Y=0.9802X-3.4879,r=0.9977,两种方法试剂测定结果呈高度相关(P<0.05)。结论建立了基于吖啶酯化学发光检测血清IL-6的方法,各项指标均符合临床应用要求,适宜在临床实验室推广应用。

蔗糖-6-乙酸酯氯化过程热力学及动力学研究

蔗糖-6-乙酸酯(S-6-A)氯化制备三氯蔗糖-6-乙酸酯(TGS-6-A)是合成三氯蔗糖(TGS)的关键步骤。采用基团贡献法对氯化反应进行热力学计算,结果表明,在372~389 K的温度范围内,该反应为放热且不可逆反应;同时对目标产物TGS-6-A的水解反应进行了热力学计算,获得了不同温度下的平衡常数计算值,与平衡常数实验值的对比进一步验证了该计算方法的可靠性;通过间歇实验研究了温度对反应速率的影响,建立了氯化连串反应动力学模型。在所研究温度范围内,主反应生成二氯蔗糖-6-乙酸酯和目标产物TGS-6-A的活化能分别为103.87 kJ/mol、153.87 kJ/mol;副反应生成四氯蔗糖-6-乙酸酯的活化能为87.09 kJ/mol。动力学实验结果表明主反应受温度的影响更大,升高温度并且控制反应时间能有效提高目标产物TGS-6-A的收率。

离子液体中酶法合成蔗糖-6-月桂酸单酯的研究

以脂肪酶Lipozyme TLIM为催化剂在离子液体中选择性催化蔗糖和月桂酸乙烯酯合成了蔗糖月桂酸酯。利用单因素试验考察了酶制剂、离子液体种类、温度、原料的摩尔比、酶浓度对产率的影响,得到在离子液体[Bmim]BF4,反应最佳温度为45℃、糖酯最佳摩尔比为1∶4,最佳酶浓度为60 mg/mL。用TLC、HPLC、MS和NMR等手段对蔗糖-6-月桂酸单酯进行了表征。

脂肪酶催化合成蔗糖-6-月桂酸单酯的研究

提出了一种酶催化合成蔗糖-6-月桂酸单酯的新方法:在两种有机溶剂混合组成的媒介中,蔗糖与月桂酸乙烯酯在脂肪酶的选择性催化下通过酯交换反应定向合成蔗糖-6-月桂酸单酯。通过改变溶剂的种类、酶的来源、酶的浓度及反应物料摩尔比等因素进行优化反应。最佳的反应条件为:叔戊醇/DM SO=4/1(V/V)的混合体系,100 g/LL ipozym e TL IM,40℃下反应6小时,转化率为97.2%.

蔗糖-6-苯甲酸酯的合成研究

采用高效液相色谱法研究二丁基氧化锡区域选择性催化合成蔗糖 6 苯甲酸酯的反应过程 ,得到第一步反应的适宜条件为 :n(蔗糖 )∶n(二丁基氧化锡 ) =1∶1,反应温度为 80～ 12 0℃ ,反应时间为 5～ 8h ;第二步反应中苯甲酸酐适宜用量为 :n(蔗糖 )∶n(苯甲酸酐 ) =1∶1。蔗糖 6 苯甲酸酯收率为 84 6 % ,产品质量分数 95 .7% ,二丁基氧化锡

三氯蔗糖-6-乙酸酯的合成及其工艺优化

用SOCl2和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)合成Vilsmeier试剂,氯化蔗糖-6-乙酸酯制得三氯蔗糖-6-乙酸酯,并经IR、1H NMR确认其结构。考察投料物质的量比、向反应体系中所添加甲苯的比例、还原反应过程中pH值及氯代温度。结果表明:在80℃条件下最适宜制备Vilsmeier试剂;n(Vilsmeier试剂):n(蔗糖-6-乙酸酯)=11:1,m(甲苯):m(DMF)=1:10,还原反应中pH7.5;反应分3个阶段,一氯代在70℃、二氯代在90℃、三氯代在110℃最适宜进行氯代反应;合成三氯蔗糖-6-乙酸酯收率达到55.7%。

蔗糖-6-乙酸酯的合成方法研究

采用高效液相色谱法指示反应进程 ,对蔗糖 - 6-乙酸酯的合成方法进行了系统研究。实验结果表明 ,二丁基氧化锡催化酯化法与原乙酸三甲酯酯化法相比 ,收率高 ,产物纯度高 ,催化剂和溶剂可回收重复使用 ,产物可不经分离直接用于下一步反应 ,是目前较理想的合成蔗糖 - 6-乙酸酯的方法。

一种合成三氯蔗糖-6-乙酯的新方法

以蔗糖为原料,采用单基团保护法合成蔗糖-6-乙酯;采用固体光气与DMF合成Vilsmeier试剂,氯化蔗糖-6-乙酯过程中不污染环境。经IR、1H NMR确认三氯蔗糖-6-乙酯结构。考察了投料比、缚酸剂及升温时间等条件对产物收率的影响。结果表明,二次乙酰化反应较佳条件为:m(水)∶m(原乙酸三甲酯)∶m(对甲苯磺酸)=10.0∶3.5∶0.06;氯化反应较佳条件为:n(固体光气)∶n(蔗糖-6-乙酯)=5∶1,以吡啶为缚酸剂,分3个阶段升温,2 h升温到70℃、2 h升温到90℃、3 h升温到110℃最适宜进行氯代反应,总收率为57.3%。

m6A甲基化对邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导小鼠睾丸间质细胞自噬的作用

目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质(TM-3)细胞自噬中m6A甲基化的作用。方法 将对数生长期的TM-3细胞暴露于浓度梯度(0、5、10、20、40、80μmol·L^(-1))的m6A甲基化抑制剂3-脱氮腺苷(3-Deazaadenosine,DAA)24 h,CCK-8法检测细胞活力,确定3-脱氮腺苷的染毒剂量后,梯度稀释为对照组(0μmol·L^(-1))、MEHP低剂量组(200μmol·L^(-1))、MEHP中剂量组(400μmol·L^(-1))、MEHP高剂量组(800μmol·L^(-1)),将TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L^(-1)MEHP,40μmol·L^(-1)DAA+400μmol·L^(-1)MEHP和40μmol·L^(-1)DAA染毒组24 h,光镜下观察TM-3细胞形态。CCK-8法检测细胞存活率;m6A RNA甲基化定量检测试剂盒检测m6A修饰水平;丹酰尸胺(MDC)荧光染色检测自噬形成情况;Western blot检测LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达水平。结果 与对照组相比,DAA浓度为5、10、20、40μmol·L^(-1)时,细胞活力均无明显变化(P均>0.05);DAA浓度为80μmol·L^(-1)时,细胞活力下降(P<0.01);各MEHP染毒组TM-3细胞活力和m6A甲基化水平均降低(P均<0.01),细胞空隙变大,圆形细胞增多,贴壁细胞的数量明显减少;DAA组m6A甲基化水平较对照组降低(P<0.01);与MEHP中剂量组相比,DAA+MEHP组细胞活力和m6A甲基化水平均下降(P均<0.01),细胞发生皱缩,细胞间隔稍有增大。与对照组相比,各MEHP染毒组、DAA+MEHP组和DAA处理组LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高(P均<0.05),MEHP低剂量组MDC荧光信号强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的蛋白表达量均无明显变化(P均>0.05);MEHP中、高剂量组和DAA+MEHP组荧光强度、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的表达量均升高(P均<0.01);DAA组荧光强度和Beclin-1的表达水平均升高(P均<0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ无明显变化(P均>0.05)。DAA+MEHP组荧光强度和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ较MEHP中剂量组呈上升趋势(P<0.05)。结论 MEHP可能通过降低RNA甲基化m6A修饰的水平来诱导TM-3细胞发生自噬。

反相高效液相色谱法监测蔗糖-6-乙酸酯合成

A method was established of reversed-phase high performance liquid chromatography for the determination of sucrose-6-acetate.In the method,SupelcosilTMLC-18（250mm×4.6mm i.d.5μm）was used as chromatographic column and V（acetonitrile）∶V（methanol）∶V（water）=10∶10∶80 as mobile phase.The linear ranges was 0.5mg/L～900mg/L.The lower limit of detection of surose-6-acetate was 0.2mg/L.The recovery of the method was 98.53% and the relative standard deviations was 0.95%.By the method,the reaction raw materials,the reaction mediates and the reaction products could be separated effcctively,and the reaction progress could also be indicated directly.

原酸酯法制备蔗糖-6-乙酸酯的研究

三氯蔗糖是性能最为优良的高甜度甜味剂之一。蔗糖-6-乙酸酯是合成三氯蔗糖的关键中间体。采用蔗糖的DMF溶液或悬浮液与原酸酯在对甲苯磺酸的催化下合成蔗糖-4,6-原酸酯,在微酸性条件下水解生成蔗糖-4-乙酸酯和蔗糖-6-乙酸酯的混合物,在碱作用下,将4-乙酸酯转换为6-乙酸酯。最佳反应条件是:对甲苯磺酸6mg/g蔗糖,水10mL/100mLDMF,特丁胺2.5mL/100mLDMF,酰基迁移时间70min。

薄层色谱法在蔗糖-6-苯甲酸酯合成过程中的应用

用薄层层析法对蔗糖 - 6-苯甲酸酯合成过程中所涉及的反应物进行分离分析 ,选择优化出最佳展开剂体系为 :四氢呋喃∶丙酮∶水∶乙酸 =4∶ 6∶ 5∶0 .5(v/v)。在该展开剂条件下 ,可以有效地分离反应原料、反应中间体和反应产物 。

蔗糖-6-苯甲酸酯的制备

以蔗糖为原料,苯甲酸甲酯为酯化试剂,使用碳酸铯为催化剂合成蔗糖-6-苯甲酸酯。探讨了催化剂用量、反应温度、反应时间和物料配比对反应的影响。最优的反应条件:催化剂质量分数为2%(以蔗糖质量计,下同),n(蔗糖):n(苯甲酸甲酯)=1:4,反应温度为45℃,反应真空度为0.05 MPa,反应时间为5 h,蔗糖-6-苯甲酸酯的收率可达81.0%。

三氯蔗糖-6-乙酯的制备及结构表征

以蔗糖为原料,原乙酸三乙酯为酯化剂,经C-6乙酰化,生成蔗糖-6-乙酯,再用氯化亚砜和DMF制备的Vilsmeier试剂与蔗糖-6-乙酯进行氯化反应,得到三氯蔗糖-6-乙酯。考察了反应物的投料比对酯化反应的影响;反应温度、反应物的投料比和反应时间等因素对氯化反应的影响。结果表明:最佳反应条件为酯化反应温度为0℃,反应时间4 h,n(蔗糖)∶n(原乙酸三乙酯)∶n(对甲苯磺酸)=1∶2.5∶3.0×10-2,收率为70.2%。氯化反应温度110℃,反应时间2 h,n(蔗糖-6-乙酯)∶n(Vilsmeier)=1∶18.5,收率为51.9%。通过HPLC-MS、IR、1H NMR和13C NMR对产物的结构进行了表征。