Preparation of Ephedra houttuynia Granule and Its Therapeutic Mechanism of Anti-Mycoplasma gallisepticum Infection Based on Network Pharmacology

The use of Chinese herbal medicines can replace antibiotics that cause drug-resistance problems,which are currently necessary for disease control.In this paper,a traditional Chinese medicine compound named Ephedra houttuynia granule for the treatment of Mycoplasma galliscepticum(MG)infection was prepared.Furthermore,its action mechanism was explored through network pharmacology.The optimal extraction and granulation processes of the compound were determined by high performance liquid chromatography(HPLC)method and L9 orthogonal test,and in the treatment experiment,Ephedra houttuynia granule showed a significant therapeutic effect on MG infection.In the study of network pharmacology,the results showed that the core targets of Ephedra houttuynia granule against MG infection were vascular endothelial growth factor(VEGFA),fos proto-oncogene(FOS),prepro-coagulation factor II(F2),etc.,the gene ontology/kyoto encyclopedia of genes and genomes(GO/KEGG)analysis results indicated that the signaling pathways of neuroactive ligand receptor interaction,cAMP,IL-17,T cell receptor,and tumor necrosis factor(TNF)might involve in anti-MG infection.In conclusion,this study would provide a new idea for elucidating the action mechanism of other diseases in veterinary clinic,which had a certain guiding significance.

Chemical composition and biological activity of Houttuynia cordata

Houttuynia cordata is an important traditional Chinese medicine.It is widely used for clearing heat and detoxification,reducing swelling and treating sores,diuresis and dehumidification.It is also used to treat lung carbuncles,ulcers,hemorrhoids,rectal bleeding,spleen and stomach heat,which are caused by excess heat,heat toxicity,dampness,and disease heat.Modern pharmacological experiments have shown that H.cordata has antibacterial,antiviral,immune enhancing,diuretic and other effects.This article reviews the chemical components and biological activities of H.cordata to provide reference for clinical application.

蕺菜属不同居群间比较解剖学研究

对采自四川、重庆、江苏等地蕺菜属的 2 5个不同居群间进行了较为全面的比较解剖学研究。结果表明 :蕺菜属不同居群间的根、地上茎、地下茎、叶等器官在解剖结构上存在较大差异。但峨眉蕺菜与蕺菜解剖结构的种间差异不明显。文中还对蕺菜属不同居群间解剖结构差异与质量间关系进行了探讨。

蕺菜浸提液的抗氧化能力研究

为了探究蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)浸提工艺以及对羟自由基的清除能力,以一定浓度的乙醇为浸提剂提取蕺菜叶中的活性成分,利用邻二氮菲—Fe2+分光光度法测定蕺菜浸提液的抗氧化能力,通过单因素试验对影响浸提工艺的主要因素进行分析,采用L9(34)正交试验和极差分析确定最佳浸提工艺条件。以羟自由基清除率为考察指标,结果表明,蕺菜活性成分的最佳浸提工艺条件为料液比为1∶20(g:mL),70℃恒温回流条件下浸提2.0 h,该蕺菜浸提液对羟自由基的最大清除率为83.54%。结果表明,蕺菜提取物具有明显的抗氧化能力,开发前景广阔。

猕猴桃园套种蕺菜对土壤养分、酶活性及果实品质的影响

为了提高猕猴桃果实产量与品质,在猕猴桃园以套种蕺菜、清耕和对照作为试验处理,测定不同时期猕猴桃根际土壤养分含量、微生物数量、酶活性和果实产量及品质,分析其相关性。结果表明:套种蕺菜后猕猴桃根际土壤碱解氮、速效磷、速效钾含量分别比对照处理提高13.95%、7.92%和3.94%,土壤细菌、真菌、放线菌数量分别提高19.01%、28.89%和16.32%,土壤过氧化氢酶、脲酶、蔗糖酶、磷酸酶活性分别提高17.02%、12.63%、17.57%和7.98%,单果质量和单位面积产量分别提高7.14%和7.68%,维生素C、干物质、可溶性固形物、可溶性总糖和可滴定酸含量分别提高7.97%、18.29%、2.09%、12.37%和14.18%。相关性分析结果表明,套种蕺菜后猕猴桃根际土壤速效钾含量与土壤中细菌数量、真菌数量、放线菌数量、脲酶活性、蔗糖酶活性、磷酸酶活性极显著正相关。土壤细菌数量与蔗糖酶活性显著正相关,与磷酸酶活性极显著正相关。土壤真菌数量与蔗糖酶活性极显著正相关。土壤放线菌数量与蔗糖酶活性、磷酸酶活性显著正相关。土壤速效磷含量与维生素C含量、可滴定酸含量极显著负相关,与干物质含量、可溶性固形物含量和可溶性总糖含量极显著正相关。土壤细菌数量、放线菌数量与维生素C含量极显著负相关。土壤真菌数量与维生素C含量显著负相关。土壤脲酶活性与干物质含量显著正相关,与可滴定酸含量显著负相关。维生素C含量与土壤蔗糖酶活性极显著负相关,与土壤磷酸酶活性显著负相关。套种蕺菜有利于提高猕猴桃根际土壤养分含量、微生物数量和酶活性,增加猕猴桃果实产量,改善猕猴桃果实品质。

蕺菜的矿物元素测定及其饮料的工艺研究

在食品工业步入天然、高科技时代,蕺菜具有应用价值和良好前景犤1犦。本文用毛细管电泳法测定了蕺菜的9种矿物元素含量,对蕺菜饮料的生产工艺和配方进行了研究。通过正交试验及方差分析,确定出该饮料的最佳组合方式为A2B2C2D4E3,即澄清的蕺菜汁用量35%,蔗糖5%,蜂蜜2.2%,柠檬酸0.4%,柠檬酸钾0.3%,水为57.1%。通过小试,还确定出产品最适稳定剂配方为0.12%CMC和0.10%海藻酸钠复合使用。此外还简述蕺菜的营养价值和药用价值,这一切为蕺菜饮料的研制提供了科学依据。

薇菜、蕺菜中氨基酸及其他营养素含量的测定

对秦巴山区薇菜 (Osmundajaponicathunb .)、蕺菜 (Houttuyniacordatathunb.)两种山野菜可食部分中氨基酸、灰分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖等含量进行了测定。结果表明 :所测定的 1 7种氨基酸中 ,薇菜含 1 7种氨基酸 ,蕺菜含 1 6种氨基酸 ,七种必需氨基酸含量占各自氨基酸总量的百分数分别为 4 3 .2 6%、3 6.58%。薇菜、蕺菜灰分含量分别为 8.1 1 %、9.4 0 % ;粗蛋白含量分别为 2 2 .80 %、1 7.2 2 % ;粗脂肪含量分别为 3 .3 4 %、5.4 3 % ;粗纤维含量分别为 1 3 .0 7%、1 7.89% ;总糖含量分别为 2 1 .1 4 %、1 3 .4 2 %。

蕺菜属植物富钾基因型的筛选

在低钾土壤培养和营养液培养的条件下,采用植株含钾量、吸钾速率和钾素利用率并结合植株根系形态特征,对蕺菜属(Houttuynia Thunb.)16份不同基因型材料的富钾能力进行筛选。结果表明,峨眉蕺菜W01-86以及蕺菜W01-34和W01-71在低钾土壤培养和溶液培养时植株含钾量分别高于9.0%,5.50%,吸钾速率大于1.50μmol/(g.h),低钾土壤培养和溶液培养时的钾素利用率分别高于2.50,0.30g/g,为富钾基因型;W01-4和W01-99低钾土壤培养和溶液培养时的植株含钾量分别低于8.5%,5.0%,吸钾速率小于0.65μmol/(g.h),低钾土壤培养和溶液培养时的钾素利用率分别低于2.00,0.30g/g,为低钾基因型。

蕺菜植株间的蛋白质多样性研究

目的：揭示同一GAP产地同一批次的鲜蕺菜植株间的蛋白质多样性,为蕺菜＂节点代谢网络＂的构建奠定基础。方法：采用3种方法从3个角度对蕺菜植株间的蛋白质进行多样性研究,即采用Ramagli改进的Bradford法、SDS-PAGE凝胶电泳法和双波长薄层扫描法分别研究其总蛋白含量多样性、蛋白种类差异性及各种类的含量变异性。结果：53株蕺菜蛋白条带分子量大多集中在6.5~97.2 kDa范围内,蛋白种类差异性不明显,主要表现为条带颜色深浅不一;蛋白电泳条带扫描图的总量统计矩零阶矩（AUCT）、一阶矩（MCRTT）和二阶矩（VCRTT）的RSD分别为40.92%、6.01%和18.57%。结论：同一GAP产地不同植株鲜蕺菜个体间蛋白质具有丰富的多样性,为后续关键蛋白酶的寻找、＂节点代谢网络＂的构建奠定基础,也进一步拓展了中药质量的稳定性研究。

蕺菜汁饮料生产工艺研究

对蕺菜汁饮料生产工艺作了研究。结果表明，以蕺菜地上茎或地下茎叶为原料，经１００℃烫漂１ｍｉｎ后破碎、榨汁，再用复合果胶酶澄清处理，最后经调配、精滤、灌装和灭菌等过程可制成风味独特的蕺菜汁饮料。

国产蕺菜的染色体数目变异及核穿壁现象

为了从细胞学水平上探讨蕺菜Houttuyniacordata的遗传多样性 ,对四川和重庆地区 90份材料的根尖体细胞染色体数目以及花粉母细胞减数分裂情况进行了观察。结果表明 ,其染色体数目变化范围为 36- 1 2 6。其中 ,染色体数目 36、5 4、72和 1 2 6为首次报道 ,以染色体数目 81的出现频率最高。推测蕺菜染色体基数为 9。首次发现蕺菜在其花粉母细胞减数分裂二分体、四分体和花粉粒形成初期具核穿壁现象 ,其核物质转移可通过胞间连丝、接合孔和接合管进行。

铅、锌及其交互作用对鱼腥草(Houttuynia cordata)叶绿素含量及抗氧化酶系统的影响

采用营养液培养方法研究铅、锌及其交互作用对鱼腥草叶绿素含量及抗氧化酶系统的影响。实验结果显示,随着Pb浓度的增加,鱼腥草叶绿素含量逐渐降低但无显著变化。Zn在一定浓度下能提高鱼腥草叶绿素含量,而在高浓度Zn胁迫下,叶绿素含量急剧下降。鱼腥草叶片中SOD、POD和CAT3种酶活性都是随着Pb浓度的增加先上升后下降。随着Zn浓度的增加,SOD和CAT也是先上升后下降,POD则是逐渐上升。Pb-Zn交互作用增加了鱼腥草叶绿素含量,对SOD和POD活性具有抑制作用,对CAT活性影响不明显。同时研究结果还表明,单一Pb、Zn对鱼腥草叶绿素含量和抗氧化酶系统的影响大于Pb、Zn二者的共同作用,其中高浓度Zn对鱼腥草的伤害作用最大,而当溶液Pb处理浓度达到400mg/L时,鱼腥草仍能正常生长,说明鱼腥草具有较强的耐Pb能力。

蕺菜ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化

[目的]针对蕺菜ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究蕺菜的居群遗传多样性奠定基础。[方法]通过筛选引物并设定影响蕺菜ISSR反应各因素的浓度,检测ISSR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立蕺菜ISSR稳定可靠的反应体系。[结果]建立了可用于蕺菜ISSR-PCR分析的最适宜反应体系。Taq酶质量、退火温度、Mg^(2+)浓度、dNTP浓度均对ISSR反应结果具有较大影响。[结论]建立的蕺菜ISSR反应体系具有省时、经济、简便、扩增条带清晰而稳定以及重复性好等特点,可以较好地应用于蕺菜的居群鉴别及居群分子生态的研究。

优化蕺菜属ITS-PCR扩增条件的研究

目的:建立蕺菜rDNA ITS扩增反应的优化体系。方法:以蕺菜DNA为模板,采用单因素试验设计,对影响蕺菜rDNAITS区扩增的重要参数进行了优化试验。结果:最优蕺菜ITS-PCR的反应体系为25μl反应体系中含Taq酶0.75U、Mg2+2.5mmol/L、dNTP0.15mmol/L、引物对0.6μmol/L、模板DNA10ng。扩增程序为在94℃下预变性4min,然后进行36个循环(94℃变性45s,60℃退火50s,72℃延伸90s),最后在72℃延伸8min。结论:这一体系的建立为利用蕺菜rDNAITS区研究蕺菜种质资源的系统进化提供了标准化程序。

峨嵋蕺菜营养成分及抑菌效果的研究

目的:研究峨嵋蕺菜的营养成分含量和挥发性油的抑菌效果,观察其异地栽培后形态的变化,为评价这一蕺菜属新物种的食用和药用价值提供依据。方法:观察峨嵋蕺菜引种栽培到湖南怀化后的形态特征,测定其地上、地下部分营养成分和药用成分含量;采用二倍稀释法,检测其地上、地下部分挥发性油对6种细菌的抑菌效果。结果:峨嵋蕺菜在湖南怀化栽培4年后形态特征无明显变化;地上部分总糖、脂肪、VC、蛋白质、黄酮的含量分别为7.1%、6.38%、70.46mg/100g、12.35%、11.80mg/g,地下部分的含量则分别为12.6%、6.25%、51.62mg/100g、10.20%、3.09mg/g;峨嵋蕺菜挥发油对于所有受试细菌均存在不同程度的抑制作用,其中对八叠球菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较明显,但对大肠埃希氏菌、普通变形杆菌、铜绿假单胞菌的抑制作用很不显著,地上部分挥发性油的抑菌效果略好于地下部分。结论:峨嵋蕺菜与鱼腥草在营养成分含量和挥发性油抑菌效果方面非常接近。

峨眉山不同山峪和海拔高度鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)居群挥发油成分的变化

以分布于峨眉山不同山峪不同海拔（500-1800m）的17个鱼腥草（Houttuynia cordata Thunb.）居群及生长地土样作为试验材料，按土壤农化分析常规方法对土壤pH值及土壤营养元素进行测定，用水蒸馏法提取植株地上部分的挥发油，并用GCMS对挥发油化学成分进行分离和鉴定，峰面积归一法测定各成分含量。结果显示：峨眉山鱼腥草生长地土壤肥力水平较高，对鱼腥草的生长极为有利。从所有居群中共鉴定出35种化合物，各居群挥发油成分组成及含量存在较大的差异。月桂烯作为四个山峪唯一共有的主要成分在各居群中均能检测到，且在各居群中的平均含量最高。乙酸龙脑酯和trans-β-罗勒烯的含量与海拔高度间分别存在显著和极显著正相关。方差分析及多重比较的结果表明，不同山峪以及海拔高度对各居群挥发油成分和含量有显著影响。通过偏相关分析发现土壤微量元素对鱼腥草挥发油共有成分合成与积累的作用大于大量元素，微量元素中以有效钼的影响最为显著，大量元素中以速效钾的影响最为显著。采用逐步多元回归分析筛选出了对挥发油共有成分含量影响显著的土壤营养元素。

Expression of Exogenous Antimicrobial Peptide and Resistance to Stem Rot Disease of Houttuynia cordata Thunb.

[Objective] This study was to identify the expression of exogenous antimicrobial peptide in transgenic Houttuynia cordata Thunb. plants,and analyze their resistance to stem rot disease. [Methods] SDS-PAGE and Western blot analysis were employed to detect expression of exogenous antimicrobial peptide in transgenic H. cordata plants. Both wild type and transgenic H. cordata plants were inoculated with different concentrations of Rhizoctonia solani spores for detecting their resistance. [Results] The exogenous antimicrobial peptide was detected at translation level. The optimal parameters for detecting the resistance of transgenic H. cordata plants to R. solani was inoculation of spores at a concentration of 3×105 ind./ml and cultured for three days. The results showed that resistance of transgenic H. cordata plants to R. solani was enhanced in comparison with CKs. [Conclusion] Expression of exogenous antimicrobial peptide can enhance the resistance of transgenic H. cordata plants to stem rot disease.

蕺菜汁饮料生产工艺研究

蕺菜汁饮料生产工艺的研究结果表明 ,以蕺菜地下茎或地上茎叶为原料 ,经 1 0 0℃烫漂 1min后破碎、榨汁 ,再用复合果胶酶澄清处理 ,最后经调配、精滤、灌装和灭菌等过程 ,可制成风味独特的蕺菜汁饮料。

Standard Operating Procedure of Houttuynia cordata Thunb.Plastic Greenhouse Cultivation

This standard operating procedure stipulated the natural condition of pro- ducing area, cultivation technique, disease and pest control, harvest, quality stan- dard, packaging, transportation and storage of H. cordata, in order to provide a ba- sis for the standard cultivation of H. cordata.

茎节数、株距和覆土深度对蕺菜茎段发芽的影响

以蕺菜为试验材料,采用正交试验设计,比较播种茎段的茎节数、栽植株距和覆土深度3个因素及其3个水平对蕺菜地下茎茎节发芽的影响,筛选出最佳的栽培因素组合。试验结果表明,影响蕺菜茎段出芽数、鲜苗质量、幼苗根系活力和幼苗CAT活性的最主要因素是播种蕺菜茎段的节数,其次为覆土深度,栽植株距的影响最小;影响幼苗PPO活性的最主要因素是播种蕺菜茎段的覆土深度,茎节数的影响次之。筛选出的最佳栽培因素组合为茎段节数4节、栽植株距9 cm、覆土深度10 cm。